纸片法人促甲状腺激素(h-TSH)放免测定在临床中的应用

干血点滤纸片 h-TSH 放免测定法具有方法简单、采血量少,样品易保存及运输等优点,本文在自己建立的方法基础上进一步观察纸片法在正常及病理人群中的 TSH 水平及 TRH 兴奋试验的检测结果,与血清法相比以观察纸片法的科学性及可靠性。一、材料和方法(一)材料:1.PB 温育液,含0.4%牛血清白蛋白(BSA)-0.06M EDTA-Na(乙二胺四乙酸钠)-0.01MPB(磷酸盐缓冲液)pH7.6,2.PB     

雌激素对诱发自身免疫性甲状腺炎影响的实验研究

目的自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease,AITD)的发病,女性多于男性,育龄期女性对AITD的易感性更高于男性,存在明显的性别差异.本文研究女性激素中的雌激素对诱发实验性自身免疫性甲状腺炎(experiment autoimmune thyroiditis,EAT)形成的影响,探讨雌激素在AITD发病机制中的作用.方法选用Wistar大鼠,雌性,10周龄.大鼠随机分为4组①切除大鼠的双侧全部卵巢(OVX),高碘(HI)饮食喂养,诱发EAT为OVX-HI-EAT组;③高碘饮食喂养,诱发EAT为HI-EAT组;③高碘饮食对照组(HI组);④适碘饮食正常对照组(NI组).适碘饮食是用低碘饲料(碘含量≤35μg/kg)加适碘水(含KI为0.3 mg/L)喂养,高碘饮食用低碘饲料加高碘水(含KI为15mg/l)喂养,EAT的诱发采用同种属不同品系的SD大鼠甲状腺球蛋白(Tg)加完全福氏佐剂(complete freund's adjuvant)免疫Wistar大鼠(Tg每次1 mg,每周2次,共3次),诱发EAT的形成,末次免疫的4周后,处死全部大鼠.各组均检测血清中雌二醇(Eα-17β)和泌乳素(PRL)水平,观察甲状腺组织炎细胞浸润程度和炎症反应,测定血清Tg抗体水平.并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测甲状腺组织中干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA的表达水平.结果去卵巢高碘饮食诱发EAT(OVX-HI-EAT)组大鼠血清中E2-17β(17.60±1.03)pmol/L和PRL(2.45±0.15)μg/L水平均明显低于未切除卵巢的高碘饮食诱发EAT(HI-EAT)组、高碘饮食(HI)组和适碘饮食对照(NI)组,P＜0.01.OVX-HI EAT组诱发EAT的发病率和甲状腺的炎细胞浸润程度(10例中,甲状腺炎细胞浸润1例为"++",5例为"+")明显低于HIEAT组(8例中甲状腺炎细胞浸润5例为"++",2例为"+").甲状腺组织中Th1细胞因子IFN-γmRNA的表达水平,OVX-HI-EAT组为0.87±0.03(细胞因子/β-actin)低于HI-EAT组(0.99±0.002),P＜0.05.OVX-HI-EAT组Th2细胞因子与IL-10mRNA的表达水平为0.98±0.009(细胞因子/β-actin)高于HI-EAT组(0.83±0.05),P＜0.05.诱发EAT大鼠血清中Tg自身抗体的水平明显高于未诱发EAT组大鼠.结论雌激素水平低下可减少或缓解EAT的发病率和甲状腺的炎症反应,高水平雌激素是构成女性对AITD易感的重要因素,雌激素水平低下致Th1细胞偏于Th2细胞可能是EAT发病率和甲状腺炎症反应得以缓解的主要机制.     

补体系统蛋白的测定特点和结果判断

补体系统蛋白是11种补体成分和交替途径的各种因子及抑制因子等20多种蛋白所构成的反应系统。近年,对各种疾病的患者血清进行了补体效价。各成分的溶血活性以及补体蛋白定量的测定,特别是应用荧光抗体法检查组织中局部存在的补体蛋白。并用于研究疾病发生的免疫学机理和疾病的诊断及病程的判断。一、补体系统蛋白的定量法补体的各成分,交替途径的各因子和补体的抑制物(Inactivator),均是蛋白质。它     

3种诱导自身免疫性甲状腺炎动物模型的效果比较

目的 采用3种诱导方法建立小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)动物模型，比较其成功性和效果及实验方法的简易程度。为自身免疫性甲状腺疾病发病机理的深入研究和探讨，提供较理想的EAT动物模型。方法 采用①同种不同系的甲状腺球蛋白(Tg)与完全福氏佐剂(Complete freund’s adjuvant，CFA)免疫实验动物。②同种不同系的甲状腺组织移植入实验动物腹腔中。③同种不同系Tg致敏的淋巴细胞被动转移给同系实验动物，分别诱发EAT动物模型，同时设立正常小鼠作为对照组。4周后，观察甲状腺组织病理改变和检测血清中Tg抗体水平等。结果 Tg CFA组小鼠血清中的自身Tg-抗体水平与正常未免疫组比较，高出约5倍之多，其甲状腺组织亦发生明显的炎症反应，淋巴细胞浸润指数≥2为5例，为本实验组例数的50％。其它2种方法诱发小鼠EAT的实验组中，其甲状腺组织未发现明显的炎症反应和炎细胞浸润。结论 根据形成EAT的2个标准即自身Tg-抗体水平和甲状腺组织淋巴细胞的浸润程度，比较3种诱发小鼠EAT实验方法，可以认为采用Tg cFA免疫动物，建立EAT动物模型有较高的成功性和可靠性，且诱导EAT的实验方法较简单，易行。可为自身免疫性甲状腺疾病发病机理的实验研究提供较满意的动物模型。     

免疫缺陷和呼吸道感染

小儿呼吸道感染在日常诊断治疗中占有重要位置。但是,随着防治方法的进步,呼吸道感染的内容已发生很大的变化。其理由之一就是抗生素的进步。无潜在疾病的健康小儿其细菌性感染较易治愈,但并不意味这些感染容易控制,例如对抗生素敏感的细菌,引起感染减少,相反,对抗生素不敏感的细菌、弱毒性细菌、或真菌引起感染的比例相对增加;而且这些感染,由某些原因造成防御功能下降而造成的显性感染比无潜在疾病者为多。因此,这类患儿的感染,一方面用一般抗生素治疗效果不佳,另方面又因有宿主的不良因素,所以很难控制。宿主方面的因素主要是原发性和继发性免疫缺陷。在免疫缺陷的感染疾病中,呼吸道感染将占很大比例,是今后感染治疗中的一大课题。     

雷帕霉素缓释膜治疗兔高危角膜移植排斥反应实验研究

目的 探讨局部应用雷帕霉素(RAPA)缓释膜抑制兔高危角膜移植免疫排斥反应的机制.方法 将角膜新生血管白兔68只分为4组,每组17只,行穿透性角膜移植术,供体为健康灰兔.A组为未治疗组;B组术中前房植入空白缓释膜;C组术后每天1%RAPA滴眼液滴眼3次共28天;D组术中前房植入RAPA缓释膜.术后隔天用裂隙灯显微镜观察植片免疫排斥反应发生的时间;用CD.和CD8单克隆抗体行免疫组织化学染色,观察各组T淋巴细胞的迁移和数量. 结果兔角膜植片存活时间:D组(44.89±8.95)d,较A组(11.11±1.69)d、B组(11.56±2.70)d、C组(17.78±8.41)d明显延长(P＜0.01).免疫组化检查:术后14 d,B、c组植片中聚积了大量CD4和CD8 T淋巴细胞,并随时间延长而增加.D组药物治疗后期,植片仅见少量CD4 和CD8 细胞浸润;当RAPA缓释膜消失后,CD4 和CD8 T淋巴细胞开始聚集.结论 RAPA缓释膜能显著延长兔高危角膜移植植片存活时间,减轻全身用药可能引起的并发症.     

人视网膜S-AgP35诱发EAU动物模型的建立

目的 采用合成的人视网膜S-Ag多肽片断第35段抗原决定簇(HS-AgP35)在Lewis大鼠建立实验性葡萄膜炎(EAU)模型.方法 雌性Lewis大鼠30只,随机分成3组,每组10只.两实验组中HS-AgP35和BS-Ag分别与CFA混合,致敏Lewis大鼠,正常对照组不做处理.观察大鼠眼部体征和组织病理学改变;ELISA方法 检测大鼠血清中抗HS-AgP35/BS-Ag抗体水平;RT-PCR方法 检测大鼠脾组织内IL- 4和IFN-γ mRNA表达水平.结果 两种抗原均能致Lewis大鼠发生EAU,HS-AgP35组100%发病,BS-Ag组60%发病,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05);HS-AgP35组大鼠发病早(P＜0.01),眼部体征和组织病理学改变严重(P＜0.01),持续时间长(P＜0.01).两实验组大鼠血清中抗BS-Ag/HS-AgP35抗体水平均高于正常对照组(P＜0.01),HS-AgP35组高于BS-Ag组(P＜0.05).两实验组大鼠脾组织中IFN-γ mRNA表达水平均高于正常对照组(P＜0.01);HS-AgP35组IL- 4 mRNA表达较高(P＜0.01),BS-Ag组无明显变化(P＞0.05).结论 抗原特异性高的HS-AgP35能诱导Lewis大鼠发生EAU,可建立具有典型眼部表现和组织病理学改变的动物模型.     

雷帕霉素纳米粒滴眼液联合环孢素A缓释膜治疗兔高危角膜移植术后免疫排斥反应的研究

Objective To evaluate the combined effect of topical rapamycin (RAPA) eye drop in nanometer vector and poly (lactic acid) (PLA) wafers of cyclospoirne A(CsA) in the prevention of acute allograft rejection after rabbit corneal transplantation. Methods It was an experimental study. RAPA was incorporated into the nanometer particles and CsA was incorporated into PLA wafers. A was syngeneic control whose both donor and recipient are New Zealand rabbit. Gray donor corneas were implanted into the 102 recipients of New Zealand albino rabbits with corneal neovascularization who were randomly divided into B, C, D, E, F, G 6 groups to receive the different types of therapy: B was no therapy control; C was eye drop of nanometer vector but no RAPA twice a day,28 days; D was PLA wafers in the anterior chamber of rabbit eyes but no drugs; E was 0.5% RAPA eye drop of nanometer vector twice a day,28 days; F was PLA wafers of CsA in the anterior chamber of rabbit eyes; G was PLA wafers of CsA in the anterior chamber of rabbit eyes and 0.5% RAPA eye drop of nanometer vector eye drop twice a day for 28 days together. Postoperative evaluation included slit-lamp biomicroscopy, histopathology and immunohistoiogy, Cytokines related with neovascularization and immunosuppression in the corneal tissue by RT-PCR. The graft survival was assessed by One-Way ANOVA and q test. Results Corneal allograft survival time: A (100.00±0.00), B ( 8.44±1.24), C (8.89±2.57), D (8.56±2.30), E (43.11±5.58), F (43.67±9.54), G (72.00±15.34)d. Group G led to a statistically significant prolongation of transplant survival and was superior than group E and F which was a statistical prolongation compared with group B, C and D (qGE=11.42, qGF=11.24,qEB=13.64, qEC=13.38, q<=13.46, qFB=13. 82, qFC=13.56, qFD=13.64; P<0.01). Immunohistopathologically, the grafts were subjected to an immune response contained a dense infiltrate of neutorphils,CD4+ and CD8+ T lymphocytes in the group B ,C and D. This cellular infiltrate was a significant reduction in group E,F,G. RT-PCR showed that the gene expression of IL-2 was inhibited earlier (3 days) in group F, G and VEGF gene expression being suppressed later (14 days) in group E, G. Conclusions Combined therapy with topical application of RAPA eye drop of nanometer vector and CsA PLA wafers can significantly prolong the survival of allograft at high-risk. Moreover, topical combined treatment of them is more effective, lower dosage, less side-effects and cheaper than the treatment with topical individual immunosuppressive drug.     

角膜移植免疫排斥反应影响因素及治疗进展

角膜移植失败的主要原因是免疫排斥反应,有效地防治角膜移植术后免疫排斥反应的发生是眼科治疗中亟待解决的实际问题,本文就目前有关角膜移植免疫排斥反应的影响因素和防治进展作一综述。     

自身免疫性甲状腺疾病与细胞凋亡

自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease．AITD)是人类常见的自身免疫性疾病，主要包括Graves’病(GD)和桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)。AITD的病变部位主要发生在甲状腺，属于器官特异性自身免疫性疾病。多数学者研究认为，AITD发病是自身抗体的免疫应答或特异性T细胞介导的细胞免疫引起甲状腺组织的免疫损