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转铁蛋白是一种细胞生长因子,在体内担当运铁功能。上海肿瘤研究所免疫室已研制了一批分泌抗人体转铁蛋白单克隆抗体的杂交瘤株。经蛋白电泳吸印实验(Western Blot)证实为转铁蛋白单抗。目前瘤株已稳定分泌单抗9个月,单抗为鼠IgG_1型。杂交瘤细胞染色体数平均为93在免疫病理研究中初步表明用该单抗可显示出某些肿瘤细胞上转铁蛋白的受体。由于转铁蛋白及其受体与癌基因或其产物有关,在体外试验表明免疫系统中NK细胞作用也受其影响,某些肝 相似文献
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采用聚合酶链反应(PCR)方法获得小鼠抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因(cDNA),构建成含人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因质粒(pSV_2△Hgpt2F_7V_HHuγ_3)DNA通过电脉冲介导基因转移的方法,转染小鼠骨髓瘤细胞J558L,并经选择培养基筛选出含有构建质粒基因的克隆,进一步按ELISA方法测定细胞表面和培养上清液中嵌合重链抗体的表达效率,最终选出表达抗体效率较高的单克隆细胞株为5C_2,12B_9,29C_6。Northernblot方法检测证明,阳性克隆细胞总RNA经电泳后在18S附近处与鼠抗人小细胞肺癌单抗的重链变区cDNA探针有明显的阳性杂交带出现。细胞抽提蛋白经SDS──PAGE电泳分离显示在正常人IgG重链分子相当的位置有一清晰条带出现,分子量约为58KD,免疫印迹方法同样检测出此条带特异他与兔抗人IgG(重链特异)抗体反应,证实人──鼠抗人小细胞肺癌嵌合重链基因在小鼠骨髓癌细胞中表达成功。 相似文献
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为克服目前肿瘤基因治疗中载体系统效率低下,缺乏靶向性的不足,研究构建了受体介导的靶向性非病毒型基因转移系统,并利用该系统将p21基因导入体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察p21对肿瘤细胞生长的抑制效应.方法:根据受体配体特异性结合理论,鉴于在多种肿瘤细胞表面存在表皮生长因子受体(EGF-R)的过量表达,分别设计合成了针对EGF-R的16肽GE7配体寡肽以及流感病毒血凝素功能域20肽HA20做为内吞小体释放寡肽,将两者分别与多聚阳离子鱼精蛋白(protamine)共价连接,籍静电效应与DNA形成复合体颗粒,构成受体介导的靶向性载体系统.以此载体系统携带β-gal报道基因转染体外培养的人脑胶质瘤细胞U251,x- 相似文献
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本文通过设计一对分别位于鼠免疫球蛋白轻链变区基因(V_k)FR_1和FR_4骨架区的通用引物,利用PCR技术首次从抗小鼠肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞株染色体组总DNA中直接进行体外扩增,扩增出的特异条带分子量在320~340bp之间,扩增产物经酶解克 相似文献
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目的 检测一种新的以头颈肿瘤细胞表面受体为靶向的多肽基因导入系统对人喉鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )的基因导入效果。方法 链霉亲和素标记生物素 (labeledstreptavidinbiotin ,LSAB)法检测喉癌组织标本和培养的Hep2喉癌细胞表皮生长因子受体 (epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的表达。建立人喉癌裸鼠移植瘤模型 ,分别构建绿色荧光蛋白标记基因和多肽载体系统、半乳糖苷酶报告基因和多肽载体系统四元复合物 ,分别进行报告基因和标记基因的体内外导入实验。结果 EGFR在 6 5 % (15 / 2 3)喉癌组织标本呈阳性表达。Hep2细胞的EGFR亦呈阳性表达。EGFR主要位于细胞膜 ,部分位于细胞质内。绿色荧光蛋白基因转染Hep2后 4 8h显微镜下可见荧光 ,72h达高峰 ,导入率大于 80 % (78/ 97)。β 半乳糖苷酶报告基因荷人喉癌裸鼠移植瘤瘤内转染 12h即表达蓝染 ,2 4h蓝染程度加深 ,72h仍有表达。 结论 EGFR广泛存在于人喉癌细胞 ,新的多肽基因导入系统借助于EGFR可靶向性将报告或标记基因导入体内外人喉癌细胞 ,并得到高效表达 ,为头颈鳞癌的基因治疗提供了一个新的靶向高效的基因导入系统。 相似文献
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It is an Innovative way to diagnose with cancer with monoclonal antibody (MAb) in vivo. 1-3 After proving MAb 2F7 (IgG2a) had a higher affinity and better specificity to human small cell lung cancer cells in vitro, 4.5 and gave a very clear cut γ- camera pictures for the xenografts of human small cell lung cancer (SCLC) born by nude mice, 6 the possibility of clinical radioimmunoimaging was studied with the MAb 2F7 and its fragment F (ab') 2. 相似文献