先天性肛门直肠畸形Hoxd 13基因表达的研究(英文)

目的：检测Hoxd 13基因在肛门直肠畸形病人和正常人的直肠末端表达状况 ,探讨Hoxd 13基因与人类先天性肛门直肠畸形发生的关系。方法：应用RT -PCR方法检测Hoxd 13基因在 16例肛门直肠畸形患儿和 5例正常儿童直肠末端的表达水平。结果：Hoxd 13基因mRNA在先天性无肛畸形直肠末端表达水平明显低于正常直肠末端的表达 (0 .32± 0 .36vs 0 .73± 0 .10 )。 (P <0 .0 1)。结论：Hoxd 13基因表达可能与人类先天性肛门直肠畸形的发生有关     

Notch-1及Jagged-2基因在肛门直肠畸形大鼠直肠发育过程中的表达及意义

目的 检测Notch-1及Jagged-2基因在肛门直肠畸形(ARM)胎鼠直肠肠壁的胚胎发育过程中的表达变化,探讨其与肠壁神经肌肉发育的关系.方法 应用免疫组化和Western blot方法检测正常与乙烯硫脲致畸的ARM胎鼠直肠末端组织Notch-1及Jagged-2蛋白的定位及定量表达,应用RT-PCR方法检测Notch-1及Jagged-2基因mRNA的表达差异.结果 Notch1/Jagged-2在正常大鼠胚胎直肠发育过程中,在肠壁肌间神经丛(MP)、肠壁平滑肌及黏膜层均有表达,随着胚胎发育,表达强度逐渐增强,胚胎晚期主要集中在肠壁平滑肌及神经丛处;ARM组E17～E21表达均较正常组减弱,E19-E21表达与正常组差异更为显著.正常胎鼠直肠末端壁内中Notch-1及Jagged-2总蛋白量及mRNA明显高于畸形组(P＜0.05).结论 Notch-1/Jagged-2基因在肛门直肠畸形的神经肌肉发育过程中表达下调,可能与其发育不良有一定关系.     

中枢神经系统原发性神经外胚层肿瘤干细胞的分离与鉴定

目的 从中枢神经系统原发性神经外胚层肿瘤(Central nervous system primitive neu-roectodermal tumor,CNS-PNET)中分离并鉴定肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs).方法 应用无血清的干细胞培养基,分离CNS-PENT的细胞球细胞,应用二代细胞球形成分析、免疫细胞化学染色以及不同亚群肿瘤细胞裸鼠颅内接种等方法 ,进行CSCs鉴定.结果 2种CNS-PNET细胞在于细胞培养条件下均形成了细胞克隆球,部分细胞球细胞均表达了神经干细胞标记抗体Sox2和Nes-tin.原代细胞球在连续传代培养中均可形成2代细胞球,且也能表达Sox2和Nestin.在血清的刺激下细胞球细胞可分化为多种形态的细胞,分化细胞亚群免疫染色均为阳性.10个CNS-PNET细胞球细胞在颅内接种后几乎全部裸鼠形成肿瘤,相反,同等数量的原代肿瘤细胞接种后未见肿瘤生长.结论 使用无血清的干细胞培养条件可以简便快捷的培养并分离出CNS-PNET的悬浮细胞克隆球体,具备自我更新、多向分化、体内成瘤的基本特征,并能表达干细胞的标记抗体,可以作为理想的CSCs进行一系列的后续研究.     

Tcf4在肛门直肠畸形大鼠胚胎发育中的表达

目的 观察Tcf4在大鼠正常和畸形肛门直肠发育过程中的表达,探讨Tcf4在正常和肛门直肠畸形的胚胎发生机制中的作用.方法 用乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)致畸Wistar孕鼠24只肛门直肠畸形动物模型,切片于显微镜下观察,确定肛门直肠畸形的存在.标本经显微镜下观察后分为正常组和肛门直肠畸形组.正中矢状面、连续切片,Tcf4免疫组化染色.连续动态对比观察Tcf4在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠发育过程中的空间分布情况.常规制备胎鼠冰冻切片,解剖显微镜下手工显微切割方法准确切取泄殖腔标本,从中提取总RNA和总蛋白,通过RT-PCR和Western blot方法分别研究Tcf4 mRNA和Tcf4蛋白在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的表达.结果 ①免疫组化结果:Tcf4在大鼠发育过程中正常胚胎泄殖腔中表达,在13 d和14 d主要表达于尿直肠隔和泄殖腔膜,胚胎15 d时在尿生殖膈与泄殖腔膜融合处Tcf4表达较强,16 d时肛膜破裂,肛门直肠形成,Tcf4在直肠黏膜层表达.Tcf4在肛门直肠畸形胎鼠泄殖腔和直肠黏膜层表达较弱或呈现阴性表达.②Western blot和RT-PCR半定量检测结果:在发育期的后肠中Tcf4蛋白和Tcf4 mRNA的表达表现出时间依赖性的特点,在肛门形成的关键时期即14 d、14.5 d和15 d时Tcf4的表达水平达到高峰,一旦肛门形成其表达量随即开始降低,畸形组与正常组相比较,Tcf4蛋白和Tcf4 mRNA的表达在14～15 d明显降低,有统计学意义(P<0.05).结论 在肛门直肠畸形大鼠胚胎中,在肛门直肠形成的关键时期(13～16d),Tcf4存在着时空表达不平衡的特点;在正常大鼠胚胎期泄殖腔和直肠发育过程中,Tcf4可能起重要作用.泄殖腔/后肠Tcf4的表达下调可能与肛门直肠畸形的发生有关.     

下腰段硬脊膜穿孔后硬膜外阻滞在麻醉中的应用

腰麻 /硬膜外联合阻滞法近年来已在临床麻醉工作中普遍应用 ,此法虽弥补了单纯硬膜外麻醉的不足 ,但有时会碰到蛛网膜下腔注药后硬膜外导管难以置入的情况 ,亦有发生严重并发症的报道[1] 。我们采用下腰段硬脊膜穿孔后行连续硬膜外阻滞麻醉 ,同样可达联合阻滞的效果 ,而且可避免上述严重并发症发生。现报道如下1　资料和方法1.1　一般资料　择期手术患者 4 0例 ,男 19例 ,女2 1例 ,ＡＳＡⅠ～Ⅱ级。年龄 (43± 12 )岁 ,体重 (5 8.5± 10 .9)ｋｇ ,身高 (16 1± 12 .9)ｃｍ。手术种类 :子宫切除术 12例 ,直肠癌根治术 11例 ,下肢骨折钢板内固…     

肛门直肠及畸形发育胚胎学研究进展

先天性肛门直肠畸形是小儿常见的消化道畸形之一 ,发病率为 1/5 0 0 0～ 1/15 0 0 [1] 。目前认为肛门直肠畸形的发生是胚胎期发育障碍的结果 ,但具体发育过程及畸形演变规律仍不清楚。笔者就近年来肛门直肠及畸形胚胎学研究与进展做一综述。一、肛门直肠正常胚胎发育1.泄殖腔与膈观点　多数学者认为[1] ,胚胎第 3周末 ,后肠末端膨胀与前面的尿囊相交通 ,形成泄殖腔。中肾管 原肾管开口于泄殖腔内。泄殖腔的尾端被外胚层的一层上皮细胞所封闭 ,与体外相隔 ,称为泄殖腔膜。第 4周位于泄殖腔与后肠间的中胚层皱襞形成并向尾侧生长 ,同时间充质…     

维甲酸致大鼠胚胎神经管畸形的组织形态学观察

目的 利用维甲酸制作先天性神经管畸形的动物模型已获得公认，但对于其导致神经组织错构瘤的发生却未见报道。本实验利用维甲酸口服制作大鼠神经管畸形动物模型，观察其出现神经组织畸胎瘤、脊髓裂开、脊柱裂等畸形形态学特点，探讨其发生机制。方法 利用成熟未孕的Wistar大鼠，在妊娠10dN经胃管注入维甲酸，诱导产生神经管畸形动物模型，分别在妊娠15d、17d、19d时剖宫取出胎鼠，进行实体观察、畸形统计，同时对神经管畸形进行病理形态学研究。对照组仅给予橄榄油，剖宫时间及观察项目同致畸组。结果 维甲酸致畸组共获得胎鼠99只，48．3％(48／99)孕鼠胚胎肉眼观察出现腰骶部显性脊柱裂。在48只显性脊柱裂胎鼠中，分别取不同胎龄(15d、17d、19d)各3只脊髓裂开的畸形胎鼠共9只，做石蜡切片，全部同时见到表现为多个神经管紊乱排列、骶尾部增生肿物，提示神经组织错构瘤的发生。结论 维甲酸可以干扰神经发育，导致脊柱裂、脊髓裂开和神经错构瘤的发生。     

头孢曲松(罗氏芬)在小儿外科重症疾病中的应用

我科自2003年2月至2004年2月对部分重症患儿在治疗过程中应用罗氏芬治疗，按20～80mg／(kg．d)静脉给药，获得了较满意的临床效果，现报告如下。     

先天性肛门直肠畸形基础与临床研究

先天性肛门直肠畸形是小儿最常见的消化道畸形,是世界卫生组织常规监测的先天畸形之一,发病率约为1/1 000～1/1 500,国内统计为1：2 800.28%～72%伴发其他畸形.男略多于女（1：0.68）.由于先天性肛门直肠畸形发生的多因素性和病理改变的复杂性,手术虽然挽救了患儿生命,但有1/3的病例术后存在不同程度的排便功能障碍,严重影响患儿的生活质量和心理发育,多数需要终生进行治疗,给患儿、家长和社会带来沉重的负担.     

四氢生物蝶呤在缺血再灌注心肌损伤中的研究进展

随着心脏外科体外循环手术的广泛开展，心肌缺血再灌注损伤(myocargdial ischemia repefusion injury，MIR1)越来越受到临床的重视，减轻与心脏手术有关的MIR1是提高心脏手术成功率的关键。在心血管系统，一氧化氮(nitric oxide，NO)被认为具有扩张血管、抑制血小板与中性粒细胞粘附、聚集及激活的功能。