骨髓间充质干细胞体外诱导和端粒酶活性的研究

目的:建立骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离、培养、纯化的方法,探讨其体外诱导条件和端粒酶活性。方法:取正常成人骨髓用含10%小牛血清的LG-DMEM培养液培养、扩增。流式细胞仪行细胞表面抗原检测,细胞化学染色鉴定其生物学特性,在特定培养条件下检测其向成骨和脂肪细胞分化的能力,采用TRAP(Telomerase repeat amplification protocol assay)-银染法测定其端粒酶的活性。结果:分离培养获得的贴壁细胞,碱性磷酸酶染色阳性。流式细胞仪检测CD34、CD45表达阴性,CD29、CD44、CD115、CD166表达阳性。经向成骨和脂肪细胞诱导3周后,可得到成骨和脂肪细胞,经茜素红染色、油红O染色得到证实。TRAP-银染法证实MSCs表达一定的端粒酶活性。结论:体外分离培养的MSCs可以向成骨、脂肪诱导分化,表达一定的端粒酶活性,具有干细胞的生物学特性。     

5例Kasabach-Merritt综合征的治疗体会

我科1980～1996年收治Kasabach—Merritt综合征5例,其中男3例,女2例;年龄15天～6个月。血管瘤位于背部2例,下肢2例,颈部合并内脏1例;血管瘤大小为8×12cm～11×35cm,高起皮面,触之有温热感,边缘不清。入院时血红蛋白30～60g/L3例,60～80g/L2例;网织细胞计数     

胎盘造血功能的初步研究

目的 探讨胎盘在整个胎儿时期造血中的作用,寻找造血干／祖细胞的新来源,供临床移植应用。方法 分别测定脐动脉和脐静脉血中ＣＤ３４＾＋细胞,粒－巨噬泵细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ０及造智力在子含量,胎盘绒毛膜组织切片采用ＨＥ染色和ＣＤ３４单抗免疫组化染色。结果 脐静脉血中ＣＥ３４＾＋、ＣＤ３４＾＋／ＣＤ３８＾－细胞及ＣＦＵ－ＧＭ含量均高于脐动脉,脐静脉血中含有较多的造血刺激因子,而造血抑制因子的含量与肮动脉     

山东地区5 844例脐血HLA I类等位基因多态性分析

目的:研究山东地区脐带血HLA I类(HLA-A,-B)等位基因的分布特征,探讨中国其他地区及世界不同种族利用山东脐血供者进行造血干细胞移植的可能性。方法:应用PCR-SSO方法对山东地区5 844例无血缘关系的汉族健康新生儿脐带血进行了HLA-A,-B等位基因的分布调查。结果:HLA-A等位基因,检出20种;HLA-B等位基因,检出46种。通过与不同地域汉族人群的比较显示:在不同种族的人群中有其各自独特的人群分布特征,在不同地域的同一民族人群中亦有其独特的地理分布特征。结论:山东脐血HLA I类基因具有多态性,能够代表山东汉族人群HLA的分布特征,北方人在山东脐血库中最容易寻找到HLA I类等位基因相合的异基因脐血供者,而南方人找到的机率较北方人稍低。     

间充质干细胞的来源、特性及临床应用前景

间充质干细胞 (MSC)广泛分布于各种不同的组织 ,在骨髓、外周血、脐血、脂肪、胎肺、胎肾等组织中均可分离培养出MSC ,MSC具有成骨、成脂、成软骨等多向分化潜能。另外 ,MSC还具有支持造血的作用 ,对造血干细胞有扩增作用 ,共移植MSC可以促进造血干细胞的植入。临床上MSC可望用于组织工程和细胞工程的种子细胞及基因治疗的靶细胞等 ,具有广阔的应用前景     

ES细胞-D3诱生的胰岛素分泌细胞及其分泌的胰岛素降糖活性的研究

目的：探讨ES细胞-D3来源的胰岛素分泌细胞（IPCs）分泌的胰岛素的降糖活性及IPCs移植对糖尿病（DM）鼠的降糖作用。方法：ES细胞-D3培养于经处理的鼠胚成纤维细胞滋养层上保持未分化状态扩增,对数生长期时转入无血清含bFGF的DMEM诱导液进行诱导分化,使其分化为IPCs。于诱导的第21天,用ELISA法检测IPCs受高糖刺激2h后所分泌的胰岛素,同时将分泌的胰岛素静脉注射给小鼠,观察受鼠血糖的变化;将诱生的IPCs移植给链脲菌素（STZ）诱导的DM小鼠．观察受鼠血糖水平的改变。结果：ES细胞-D3体外诱导生成的IPCs所分泌的胰岛素具有降糖活性．且IPCs经两次移植给DM小鼠后第5天,血糖水平较移植前显著降低（P〈0．05）．第2次移植后第15天,受鼠血糖水平反弹到与移植前没有差别。结论：小鼠ES细胞-D3诱导生成的IPCs能够分泌有活性的胰岛素,且在一段时间内可显著降低DM受鼠的血糖。     

非血缘关系双份脐血移植治疗血液系统疾病19例分析

自1988年首例HLA相合的相关脐血移植(LICBT)获得成功以来,脐血移植发展迅速.由于受单份脐血细胞数量的限制,UCBT在成人造血干细胞移植中的地位尚存争议.进行双份脐血移植(double-unit UCBT)可增加细胞数量[1].我们总结了2001年5月至2006年12月接受非血缘关系双份脐血移植的19例血液病患者的长期随访情况.     

流式分子表型分析技术及其应用

流式分子表型分析是将流式细胞术与细胞内特定核酸序列分析相结合的一种新技术,主要包括流式.荧光原位杂交技术(flow-FISH)、原位PCR/low-FISH以及流式分子表型与免疫表型结合分析等三种技术方法.该技术是对传统流式细胞术的进一步补充和拓展,具有重要的应用价值.该文就流式分子表型分析的主要技术方法及其在临床和科研中的最新应用进展进行综述.     

儿童急性白血病血清IL—3的动态观察及临床意义

为研究血清IL— 3在急性白血病中的动态变化并探讨在白血病治疗过程中如何恰当选用IL— 3。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法测定 34例急性白血病患儿血清IL— 3水平 ,1 6例进行动态观察。结果 ,急性白血病患儿ANLL与ALL之间IL— 3水平无明显差异 (P >0 .0 5 )。完全缓解 (CR)后 ,血清IL— 3水平与治疗前比较 ,无显著性差异 (>0 .0 5 )。急性淋巴细胞白血病患儿治疗后高危型 (HR)组比标危型(SR)组血清IL— 3水平明显降低。经治疗CR后 ,有 1 0例IL— 3水平明显升高 ,6例明显降低 ;IL— 3变化与临床分型、获得CR时间及治疗效果有关。结果表明 ,IL— 3与白血病 (AL)治疗有关。建议 :在高危急淋患儿或完全缓解时间 >4周、骨髓衰竭、急性粒细胞白血病患儿应用IL— 3和化疗联合治疗。对缩短完全缓解时间及减少继发耐药 ,缩短骨髓抑制期时间 ,减少感染并发症可能起到重要作用。