小儿结核病

小儿结核病山东医科大学附属医院（２５００１２）曾凤华沈柏均由于卡介苗（ＢＣＧ）的接种和抗结核药物的应用小儿结核病的发病率及病死率逐年下降，但８０年代中期以后又呈上升趋势，应引起临床重视。１病原结核杆菌（ＴＢ）是一种抗酸杆菌，对人有致病性的主要有人型和...     

骨髓干细胞可塑性的研究进展

骨髓主要包含造血干细胞和间充质干细胞。前者可以分化成各种成熟的血细胞 ,后者又称为骨髓基质细胞 ,可以分化成多种成熟的间充质组织细胞如脂肪、骨和软骨细胞。最近的研究表明 ,成体骨髓干细胞还能分化成另外一些成熟的非造血细胞 ,包括肝、肾、肺、消化道、心肌和骨骼肌细胞等 ,称为骨髓干细胞可塑性。该文重点介绍骨髓干细胞的分化潜能及分化成非造血细胞的可能机制。     

异体外周血造血干细胞移植

Auto-PBSCT近年发展迅速,而Allo-PBSCT因存在诸多疑虑而徘徊不前。最新研究表明,经造血因子动员的供体外周血造血干/祖细胞含量及增殖能力和骨髓相当,异体植入迅速并能支持长期造血,并不因大量淋巴细胞的输入而产生严重移植物抗宿主病。这为临床治疗恶性肿瘤及血液病提供了新的有效途径。     

人胚骨髓基质细胞饲养层对人胚胎生殖细胞生长的作用

目的:研究人胚原代骨髓基质细胞(BMSC)饲养层对人胚胎生殖细胞(hEGC)生长的支持作用。方法:以非意愿妊娠流产胎儿股骨为材料制备BMSC饲养层;同时取胎儿组织分离培养人成纤维细胞,以成纤维细胞培养液上清制备条件培养液(CM)。另取13.5d胎鼠制备原代小鼠胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层。分组培养人原始生殖细胞:A组(PMEF饲养层)、B组(BMSC饲养层)、C组(CM)、D组(BMSC饲养层+CM),观察不同条件下hEGC生长增殖行为。结果:D组与A组均有利于支持人胚胎生殖细胞的体外生长,并保持其不分化的状态和多分化的潜能,两组比较无明显差异。单用B组可支持人胚胎生殖细胞的体外生长,但效率低于上述两组。单用条件培养液不能获得贴壁生殖细胞克隆。结论:BMSC饲养层+CM可支持hEGC的体外培养,且无异源性蛋白的污染,更有利于临床应用。     

脐血造血细胞移植

脐血中含有丰富的造血细胞。这些造血细胞具有增殖能力强,对造血因子的反应性高等特点。动物实验表明,脐血中的造血细胞具有造血重建功能。近两年来,脐血造血细胞移植的临床成功为造血细胞移植开辟了一条崭新的途径。     

"超剂量"造血干细胞移植的研究进展

动物实验及临床研究证明,单倍型不相合的"超剂量"去除T细胞或纯化CD34造血干细胞移植,能够跨越异体移植时人白细胞抗原屏障,有效防止移植物抗宿主病的发生,诱导持久、快速和稳定的植入,并使受者产生对供者的特异性免疫耐受,临床上尤其适用于那些高危患者急需移植治疗而又找不到相合的无关供者的病人.     

血管内皮生长因子促进小鼠胚胎干细胞生成CD34+细胞的研究

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)体外促进小鼠胚胎干细胞系ES-D3生成CD34 细胞的能力.方法:将ES-D3形成拟胚体,将拟胚体细胞转入含不同浓度的VEGF和VEGF 干细胞因子(stem cellfactor,SCF)的培养基中.实验分6组,分别为VEGF 5μg/L组、VEGF 10 μg/L组、VEGF 20μg/L组、VEGF 5μg/L SCF组、VEGF 10μg/L SCF组、VEGF20μg/L SCF组,同时设不加因子的自发分化对照组.RT-PCR检测CD34 mRNA的表达,流式细胞仪检测CD34 细胞的比例,甲基纤维素半固体培养法检测生成造血集落的能力.结果:经过1周的诱导培养,实验组生成的细胞可以表达CD34 mRNA,CD34 细胞的比例也升高,并可形成造血祖细胞的集落.从CD34 mRNA的表达水平、诱导生成CD34 细胞的比例和生成的集落数量看,VEGFμg/L SCF组和VEGF 10μg/L SCF组的诱导效率最高.结论:VEGF能够促进ESC生成CD34 细胞,尤以与SCF合用时,其诱导效率更高.     

小鼠胚胎干细胞在血管内皮生长因子作用下造血相关基因表达的研究

目的　研究小鼠胚胎干细胞系ES D3在血管内皮生长因子 (VEGF)的作用下表达造血相关基因的情况。方法　先将ES D3形成拟胚体 ,将拟胚体细胞转入含不同浓度VEGF和VEGF 干细胞因子 (SCF)培养基中。分为VEGF 2 0ng/ml组、VEGF 10ng/ml组、VEGF 5ng/ml组、VEGF 5ng/ml SCF组、VEGF 10ng/ml SCF组、VEGF 2 0ng/ml SCF组 ;同时设不加因子的自发分化对照组。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测各组造血转录因子GATA 2和早期造血细胞阶段表达的基因c kit和 β H1表达 ,并进行定量分析。 结果　经 1周诱导培养 ,各实验组均可检测GATA 2表达 ,其中VEGF 2 0ng/ml组和VEGF SCF组表达较强。未分化胚胎干细胞不表达c kit和 β H1mRNA ,拟胚体细胞开始表达c kit,实验组以VEGF 10ng/ml SCF组和VEGF 2 0ng/ml SCF组表达最强。VEGF 10ng/ml组和VEGF 5ng/ml组 ,β H1的表达分别为阴性和弱阳性 ,其他各组可检测到阳性条带 ,以VEGF 10ng/ml SCF组表达最强 ;而自发分化组未检测到上述mRNA的表达。结论　对造血转录因子和早期造血细胞阶段表达基因的检测可进一步证实胚胎干细胞的成血分化 ,VEGF或VEGF SCF可诱导胚胎干细胞的早期造血分化     

脐血移植治疗难治性儿童白血病

目的：研究用HLA不合多个脐血移植治疗难治性儿童白血病。方法：选择难治性白血病患儿，给予强烈化学治疗杀灭残存白血病细胞，再用多个脐血混合移植解救严重抑制状态的骨髓，从而缓解白血病，延长生命。结果：治疗6例，年龄2．5一16岁，均为男性。用VAC或AV方案化疗后，约11天外周血颗粒细胞降至零。输注脐血后平均13天外周血白细胞升至l．0×109/L。60天内骨髓象正常，全部患者达到完成缓解。随诊I一4年，3例死亡，3例已分别存活36、44、ZO个月。结论：混合脐血移植对难治性白血病有较好疗效，其治疗作用机理值得进一步探讨。     

新生儿脐带血中粒-单系造血祖细胞数量及性质的研究

采用单层琼脂法对30例足月新生儿脐带血造血祖细胞(CFU-GM)进行了培养,并比较了脐血、成人骨髓和外周血 CFU-GM 的数量和性质。结果表明:①新生儿脐血中 CFU-GM 分裂快,集落形成时间早,集落体积大,子代细胞含量多,表现为活跃的增殖状态。②足月新生几脐血 CFU-GM 和Cluster 的产率介于成人骨髓和外周血之间,但个体差异较大;13.3%的脐血样本,CFU-GM 产率高于同时培养的骨髓。此外,脐血、成人骨髓、外周血中 CFU-GM 集落类型不同,提示脐血 CFU-GM 可能是一种不同的亚型。