土贝母皂苷体外诱导SW480细胞凋亡作用

目的探讨土贝母皂苷甲、丙对于SW 480肿瘤细胞的体外诱导细胞凋亡作用机制。方法通过光镜或电镜观察药物干预后SW 480细胞形态改变;采用流式细胞仪测定FITC-Annexin V/PI双标记后SW 480细胞凋亡早期信号;用免疫细胞化学的方法观察药物对细胞中Bc l-2,p53,Fas蛋白表达的影响。结果药物组与对照组比较,从细胞形态中观察到细胞凋亡的特征结构;用流式细胞仪检测到凋亡细胞和坏死细胞数量均有增加;免疫细胞化学检测表明土贝母皂苷是通过抑制Bc l-2,p53基因和上调Fas基因表达诱导细胞凋亡。结论土贝母皂苷甲、丙能够诱导SW 480细胞凋亡,这可能是土贝母皂苷抗肿瘤作用的途径之一。     

中效原理在体外抗癌药物定量分析中的应用

 目的　在体外利用中效原理定量分析抗癌药物联合应用过程中的协同、相加或拮抗作用。方法　采用MTT法 ,利用中效原理判断联合用药 (阿糖胞苷 ,长春新碱 )对HL 6 0细胞的效应。结果　两种药物单用及联合应用时随药物剂量增加 ,其效应也随之增加。两药大剂量合用时为拮抗效应 ,小剂量合用时为协同效应。两药合用时给药次序不同不会影响合用效应 ,两药合用时药物浓度比例变化会影响合用效应。结论　两种药物合用时大剂量为拮抗 ,小剂量为协同 ,其效应大小与两种药物浓度比例有关 ,而与给药时间次序无关。     

氧化苦参碱对人卵巢癌细胞SKOV-3体外活性的影响

目的研究氧化苦参碱对人卵巢癌细胞SKOV-3体外活性的影响.方法MTT显色法检测不同浓度组药物对SKOV-3细胞的生长抑制作用;透射电镜观察细胞超微结构改变;流式细胞仪分析细胞周期变化.结果氧化苦参碱1mg/ml对细胞生长无明显影响,2mg/ml、5mg/ml、10mg/ml抑制细胞生长,呈量效关系;2mg/ml药物作用72小时后,流式细胞仪可检测到细胞凋亡现象并发现显著的S期阻滞;透射电镜可见胞核固缩,凋亡小体形成等凋亡形态学变化.结论氧化苦参碱在体外能够抑制人卵巢癌细胞SKOV-3生长,将其阻滞在S期,并能诱导细胞发生凋亡.     

西咪替丁对大肠癌患者免疫调节作用的临床研究

目的探讨围手术期使用西咪替丁(Cimetidine,CMD)对大肠癌患者免疫功能的调节作用.方法选用随机对照的研究方法,将42例大肠癌患者分为CMD治疗组和对照组.治疗组从术前7d开始,用CMD治疗,剂量为1.2g/d,至术后14d;对照组用安慰剂治疗.分别于用药前、术后5d和14d抽取实验对象的外周血,采用APAAP法、MTT比色法和ELISA等方法对40例入选患者和15例正常人的T细胞亚群、NK细胞活性及血清IL-2水平等指标进行测定.采用SAS统计软件进行方差分析,P<0.05为有显著性差异.结果①大肠癌患者T细胞亚群与正常人存在明显差异;术后5d对照组CD+3,CD+4,CD+4/CD+8下降明显,而治疗组仅表现为CD+3的下降,CD+4/CD+8无显著改变,与对照组相比则有明显上升;术后14d治疗组T细胞亚群较对照组均有较大改变.②大肠癌患者NK细胞活性与正常人存在明显差异;治疗组术后5d和14dNK细胞活性较术前有所下降,但比对照组术后5d和14d下降程度明显减少.③大肠癌患者术后IL-2水平低于术前,且均低于正常人;术后14d时,治疗组IL-2水平较对照组有明显提高结论围手术期用CMD治疗,有助于改善大肠癌患者的免疫状况,可以作为一种重要的辅助治疗.     

1,25 二羟基维生素 D3联合5-氟尿嘧啶对人食管癌Eca-109细胞移植瘤的影响

探讨1,25二羟基维生素D3、5-氟尿嘧啶单独或联合作用对人食管癌Eca-109细胞裸鼠移植瘤胰岛素生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）的影响。 方法 体外培养人食管癌Eca-109细胞，BALB/c裸小鼠皮下接种荷瘤后随机分为对照组（A）、1,25二羟基维生素D3组（B）、5-氟尿嘧啶组（C）、联合用药组（D），2.5 μg/kg 1,25二羟基维生素D3、25 mg/kg 5-氟尿嘧啶单独或联合腹腔注射，对照组用等体积生理盐水腹腔注射，观察瘤体生长情况，运用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中IGFBP-3蛋白表达，全自动生化分析仪检测血清钙离子水平、Von kossa染色观察肾脏钙沉积情况。 结果 与A组比较，B、C、D组移植瘤生长缓慢，体积较小，IGFBP-3阳性蛋白染色较深，且表达量较多（P<0.05）；而D组较B、C组移植瘤IGFBP-3蛋白表达显著升高（P<0.05）。B、C、D组血清钙离子水平较A组稍有升高，但肾脏组织切片Von kossa染色未见钙沉积。结论 1,25二羟基维生素D3、5-氟尿嘧啶均能抑制移植瘤生长，且联合用药效果更为显著，可能与上调移植瘤组织IGFBP-3蛋白表达有关。肾脏Von kossa染色未见钙沉积。     

甘利欣作用前后体外酒精性脂肪肝细胞模型甘油三酯水平变化及其可能作用机制

目的:研究甘利欣(Diammonium glyeyrrhizinate,DIG)作用前后,体外诱导的酒精性脂肪肝(Alcoholic fatty liver,AFL)细胞模型甘油三酯(Triglyceride,TG)水平变化及其可能的作用机制.方法:MTY法筛选最佳作用浓度,透射电镜观察细胞超微结构改变,全自动生化仪检测细胞内甘油三酯水平,免疫细胞化学(Immunocyto-chemistry,ICC)方法观察PPAR γ、SREBP-1、SCAP的表达.结果:(1)MTT法筛选出2.273μg/ml为甘利欣最佳作用浓度.(2)透射电镜观察Ld30细胞发现胞浆内存在大量脂滴(3)全自动生化仪测得Ld30细胞内甘油三酯浓度为(1.84±0.16)mmol/L,甘利欣处理组为(1.05±O.12)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.Ol ).(4)与Ld30组相比较.甘利欣处理组PPARγ、SREBP-1、SCAP表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01).结论:甘利欣有减轻体外诱导的酒精性脂肪肝细胞脂肪变的作用,其作用机制可能是通过下调PPARγ、SREBP-1、SCAP表达,从而抑制了细胞内脂肪生成.     

热休克小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的体内抗肝癌作用研究

目的:在荷瘤 BALB/c 小鼠观察热休克小鼠肝癌细胞(H_(22))源 Exosomes(HS-Exo) 激发宿主抗肝癌免疫应答的效应.方法:用自行分离纯化的小鼠肝癌细胞 H_(22) 源 Exosomes 及 HS-Exo 免疫小鼠,然后给小鼠皮下接种 H_(22) 肿瘤细胞,观察肿瘤的生长状况.用MTT法检测小鼠脾细胞增殖情况和细胞毒活性;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞浸润情况.BALB/c 小鼠皮下接种 H_(22) 细胞,肿瘤长至可触及大小后,分别注射Exosomes及HS-Exo进行治疗,观察各组肿瘤大小及其小鼠存活期.结果:与对照组 Exosomes 相比,HS-Exo 能使肿瘤出现时间延迟,肿瘤生长缓慢(P<0.05);更能促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性(P<0.05),能更有效的诱导 CD_4~+ 和 CD_8~+T 细胞活化(P<0.05);更为显著的抑制了小鼠的肿瘤生长(P<0.05).结论:HS-Exo 具有更强的免疫活性,能更好的诱导小鼠抗 H_(22) 肝癌作用,有针对亲本细胞的免疫保护作用,并且具有更为显著的肿瘤治疗作用.     

榄香烯对人肺腺癌细胞A549作用机理的初步研究

目的：研究榄香烯对体外培养的人肺腺癌细胞株A549的作用及其机制。方法：采用MTTI地检测药物对细胞的抑制作用。流式细胞术检测细胞周期变化以及电镜观察细胞的形态变化，结果：榄香烯能明显抑制肺腺癌细胞A549的生长，其半数生长抑制剂量为124．61μg/ml，流式细胞术证实榄香烯能阻滞肺腺癌细胞从S期进入G2／M期；透射电镜超微结构可见细胞浆内脂滴增多和坏死细胞明显增多的形态变化。结论：榄香烯能抑制肺腺癌细胞的生长，并阻滞肺腺癌细胞从S期进入G2／M期。     

儿童实体恶性肿瘤抗癌药物敏感试验

本文采用ＭＴＴ法对１０例淋巴肉瘤、神经母细胞瘤、肾母细胞瘤等实体恶性肿瘤患儿作抗癌药物敏感试验。结果显示ＶＰ－１６、丝裂霉素及顺铂等抗癌药物对儿童实体恶性肿瘤较为敏感。本文讨论了影响试验结果的三个主要因素：肿瘤细胞浓度，培养时间及药物浓度。笔者认为ＭＴＴ法是一种简便易行重复性好的试验方法，抗癌药物敏感试验应逐渐成为化疗药物选择的重要依据。     

一种适宜于病生教学实验的改良血氨测定法

夏制急性肝损害时氨的毒性作用动物实验模型是病理生理教学实验的内容之一,已收录进全国病理生理实验指导,向各医学高校推荐。众所周知,在此实验中,血氨值的变化是其重要的指标。一些院校采用氨气敏电极测定仪快速检测血氨,但在实践中发现并不理想。因此,模索一种适宜病生教学实验的血氨测定方法势在必行,在生化血氨