槲皮素对肝肿瘤细胞生长周期的影响

目的 :研究槲皮素对肝肿瘤细胞细胞周期的影响并探讨其机制。方法 :用联合四唑盐比色法研究槲皮素对肿瘤细胞生长的抑制作用 ,流式细胞仪、电镜及免疫细胞化学等方法观察槲皮素对肝肿瘤细胞株QGY ,HepG2体外生长的影响。结果 :槲皮素对HepG2和QGY均有抑制作用 ,使 G0 /G1期细胞增加 ,G2 /M期和S期细胞减少 ,出现凋亡峰 ,电镜下可凋亡小体。 4 8,72h后对HepG2的作用更明显。免疫细胞化学显示使用槲皮素后 ,2种细胞中增殖细胞核抗原 (PCNA)的阳性表达均减弱 ,而P2 1WAF1的表达均增强 ,Bax仅在HepG2细胞中表达增强。结论 :槲皮素对 2种肝肿瘤细胞株都有一定的抑制作用 ,可能主要通过增强 2种细胞株的P2 1WAF1的表达及减弱PCNA的表达诱导G0 /G1期阻滞及细胞凋亡     

奥沙利铂诱导人白血病细胞株凋亡的研究

目的：研究第三代铂类化合物奥沙利铂对人早幼粒细胞白血病细胞株(HL—60)的影响。方法：采用MTT法检测奥沙利铂对HL—60细胞作用的时间效应和剂量效应；流式细胞仪检测细胞的DNA含量，分析细胞周期的改变；光镜和电镜观察奥沙利铂作用后细胞形态变化。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，奥沙利铂对HL-60细胞增殖的抑制作用就越明显。0．032mmol/L奥沙利铂作用72小时，细胞生长抑制率86．5％，流式细胞仪检测HL-60细胞Q／M期细胞增多，形态学显示细胞凋亡。结论：奥沙利铂有明显抑制恶性白血病细胞生长和促进细胞凋亡的作用。     

熊果酸诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的作用及机制

目的研究熊果酸(Ursolicacid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制。方法MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率;Westernblot法检测P27kip1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果20～50μmol/L熊果酸对Eca-109细胞具有显著的抑制作用(P<0.01);电镜下,18.32～36.65μmol/L熊果酸处理过的Eca-109细胞可见典型的凋亡形态及坏死形态;流式细胞检测显示细胞凋亡率及G0/G1期细胞随着熊果酸浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Westernblot检测结果提示熊果酸能使Bcl-2表达下降而Bax、P27kip1增加。结论熊果酸对人食管癌细胞系Eca-109具有显著的增殖抑制、诱导细胞凋亡作用。其作用与提高P27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期,下调Bcl-2的表达和增加Bax的表达有关。     

不同转移潜能喉癌细胞株的分离及生物学特性比较

目的：获得高侵袭性喉癌细胞株,为建立高转移喉癌动物模型奠定基础.方法：改良侵袭实验筛选出高低两种侵袭潜能细胞亚群,通过生长曲线、倍增时间和流式细胞术检测两种细胞的生长和周期差异;采用侵袭实验、迁移实验检测侵袭和迁移能力的差异;各取5只裸鼠进行动物实验检测体内肿瘤生长和转移能力的差异.结果：经过改良侵袭实验筛选出了高低两种侵袭潜能细胞亚群,倍增时间分别为（31.6±1.1）,（60.2±11.1）h（P〈0.05）;增殖指数分别为（27.6±0.5）%,（16.3±0.8）%（P〈0.01）;高低亚群侵袭细胞数分别为210.2±12.9和11.6±5.0（P〈0.01）,迁移细胞数分别为229.8±12.1和6.0±4.5（P〈0.01）.动物实验中,高低侵袭组在裸鼠体内的成瘤时间分别为2,4wk,病理活检高侵袭组3只同侧腘窝淋巴结转移、4只同侧腹股沟淋巴结转移、1只对侧腹股沟淋巴结转移;低侵袭组1只同侧腹股沟淋巴结反应性增生,2只同侧腹股沟淋巴结转移;瘤重分别为（17.0±3.0）,（9.7±3.8）mg（P〈0.05）;瘤内血管数分别为21.2±4.0,1.4±0.9（P〈0.01）.结论：成功从喉癌同一亲本细胞系中分离得到了高低两种侵袭潜能细胞亚群,高侵袭性亚群的恶性程度高于低侵袭性亚群.     

Bmi-1、Caspase-8蛋白在原发上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Bmi-1、Caspase-8蛋白表达与卵巢癌发生、发展及复发的关系.方法:采用免疫组织化学SABC法,测定26例浆液性、22例粘液性、12例内膜样卵巢癌,16例良性卵巢肿瘤和10例正常卵巢组织中Bmi-1、Caspase-8蛋门表达情况.结果:Bmi-1蛋白在卵巢癌组中表达(68.3%)高于良性组(37.5%)和正常组(10.0%);Caspase-8蛋白在卵巢癌组中表达(31.7%)低于良性组(68.8%)和正常组(90.0%);Bmi-1、Caspase-8在卵巢癌组织中的表达呈负相关关系(r=0.296).结论:Bmi-1、Caspase一8的蛋白作为一种新型肿瘤标志物,与卵巢癌发生、发展及复发密切相关.     

金雀异黄素和5-FU对人结肠癌细胞株(Colo320)的相互作用的体外观察

目的体外观察金雀异黄素(Gen iste in)和5-氟脲嘧啶(5-FU)合用对人结肠癌细胞株(Colo320)的相互作用。方法采用MTT法利用中效原理判定2药合用的效果。结果2种药物单独应用时随着药物剂量的增加其效应增加,合用时2药大剂量时(>中效浓度)具有拮抗作用,小剂量(<中效浓度)时具有协同作用;2药给药时间及给药顺序都会影响效应的大小。结论上述2种药合用时大剂量时有拮抗作用,小剂量时有协同作用且效应大小与给药时间及给药顺序有关。     

肿瘤基质血管内皮细胞模型的建立及生物学特性研究

 目的 建立肿瘤基质血管内皮细胞模型并探讨其生物学特性。方法 用人卵巢癌细胞SKOV3培养上清液诱导人内皮细胞ECV304，获得能稳定生长的ECV304-SKOV3细胞。观察其形态改变，检测其生长情况，免疫细胞化学测定其增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、粘合素(TN)表达变化，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定其端粒酶活性，并分析其核型、蛋白合成能力、对常用抗癌药物的反应性。结果 ECV304-SKOV3细胞出现畸形核、有微绒毛的腔隙，染色体众数略有增加。细胞群体倍增时间较亲代细胞BCV304缩短；分裂指数增高；表达PCNA、bcL-2、MMP-9增强(t≥2．4671，P<0．05)，而TN减弱(t=2．2473，P<0．05)；S期细胞数增加，G0／G1期细胞数减少(x²=923．313，P<0．01)，增殖指数(PI)明显增高(x²=570．197，P<0．01)。对作用于S期或S期和M期的抗癌药物较ECV304敏感，且与SKOV3癌细胞一致(F≥24．14，P<0．01)。蛋白质合成能力增强(t=-12．2465，P<0．001)。端粒酶活性强于亲代细胞ECV304(t=-25．2990，P<0．001)。结论 DCV304-SKOV3细胞较亲代细胞DCV304增殖快，核型发生变化，存活能力强，功能活跃，某些血管形成因子表达增强，具有肿瘤基质血管内皮细胞的某些特性，可作为肿瘤基质血管内皮细胞模型用于进一步研究。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞和外周血单核细胞表达IL-10及其临床意义

目的　探索肺癌患者肺泡巨噬细胞 (AM )和外周血单核细胞 (PBMC)分泌白介素 10 (Inter leukin 10 ,IL 10 )的能力 ,了解肺癌患者局部及全身的细胞免疫功能状态。方法　从 5 7例肺癌患者、3 3例良性肺病患者、12例正常人的支气管肺泡灌洗液及外周血中分别获取肺泡巨噬细胞 (AM )及外周血单核细胞(PBMC) ,用ELISA法测定其培养上清液中IL 10含量。结果　 ( 1)肺癌组AM及PBMC分泌IL 10的水平显著高于正常人组和良性肺病组 (P <0 .0 0 1)。 ( 2 )Ⅳ期肺癌患者PBMC分泌IL 10水平显著高于Ⅰ +Ⅱ期和Ⅲ期患者 (P <0 .0 0 1) ,Ⅲ、Ⅳ期患者AM分泌IL 10水平显著高于Ⅰ +Ⅱ期 (P <0 .0 0 1) ;小细胞未分化癌患者PBMC、AM分泌的IL 10水平显著高于非小细胞肺癌患者 (P <0 .0 1) ;肿瘤直径越大、KPS评分越低 ,PBMC、AM分泌IL 10水平则越高 ;生存期≥ 2年的肺癌患者PBMC、AM分泌IL 10的水平显著低于生存期<2年者 (P <0 .0 1)。结论　肺癌患者全身及局部都存在较高水平的IL 10 ,IL 10在肺癌的恶化进程方面可能发挥着重要作用。检测IL 10水平可作为评价肺癌患者细胞免疫状态、预后判断的有效途径。     

中效原理在顺铂、5-氟脲嘧啶、长春新碱对人卵巢癌细胞株(SKOV3)相互作用中的应用

目的 :体外观察顺铂、5 氟脲嘧啶、长春新碱配伍对人卵巢癌细胞株 (SKOV3)的相互作用。方法 :采用MTT比色法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :三种药物单用及合用时随着剂量增加其效应也增加 ;顺铂与 5 氟脲嘧啶合用时产生协同作用 ;顺铂与长春新碱合用时产生拮抗作用 ;5 氟脲嘧啶与长春新碱合用时 ,小于中效浓度时产生协同作用 ,大于中效浓度时产生拮抗作用。结论 :两种药物合用时可以产生协同或拮抗作用 ,而且效应大小与两药浓度比例有关。     

人乳头瘤病毒与人宫颈上皮细胞永生化及癌变关系

高危型人乳头瘤病毒感染是宫颈癌发生的重要因素。人乳头瘤病毒整合于宫颈上皮细胞过程中，其编码产物E2缺失和E6、E7过表达，宿主细胞p53、Rb和转化生长因子。B改变，有丝分裂通路的激活等为宫颈癌发生机制。