汉坦病毒A9株全长L片段cDNA克隆和核苷酸序列测定

目的克隆我国分离的汉坦病毒A9株L片段全长cDNA,并测定其核苷酸序列.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分段扩增汉坦病毒A9株全部L片段,用T-A克隆方法进行PCR产物克隆,测定PCR产物的核苷酸序列.通过亚克隆将分段的L片段连接成全长cDNA克隆.结果A9株的基因组L片段长度为6533个核苷酸,腺嘌呤核苷酸和尿嘧啶核苷酸丰富(%A+U=62.47).包含有一个单一的开放读码框架(ORF),编码一个标准的质量为2.46×105的蛋白,含有2151个氨基酸.A9株与76-118、C1-1和C1-2株的同源性最高,达到83.8%.与TULA病毒的关系较远,其核酸序列的同源性为65.8%.将推导的A9株编码的氨基酸序列与其他21种负链RNA病毒的依赖RNA的RNA聚合酶的氨基酸序列以及汉坦病毒几个代表株的L片段氨基酸序列进行比较,显示A9编码的RNA聚合酶也有6个比较保守的区域以及几个极端保守的氨基酸残基.结论汉坦病毒A9株L片段具有和其他汉坦病毒RNA聚合酶相似的核苷酸一级结构,通过对推导的氨基酸分析,该片段具有一些在RNA病毒聚合酶中都存在的保守区域.     

合肥某高校教职工门诊慢性病患病情况分析

<正>门诊慢性病是经有关专家确认、各省市社会保险部门批准的部分诊断明确并需要门诊长期用药或治疗的疾病,特指基本医疗保险门诊慢性病。合肥某高校2000年参加安徽省直职工基本医疗保险,截止2015年,参加安徽省直职工医保者5982人,其中932人申报成为门诊慢性病患者,现将情况统计分析如下。1对象与方法分析对象为所有申报并经鉴定为门诊慢性病患者的合肥某高校正式在编教职工,共932例。其中     

一种寨卡病毒富集检测方法的性能评价

  目的  对一种无需核酸提取纯化的寨卡病毒实时荧光定量反转录PCR检测方法的性能进行评价。  方法  该检测方法基于实时荧光定量反转录PCR技术, 样本处理采用病毒富集法: 取100~200 μL待测样本, 加入112~224 μL样本处理液Ⅰ, 5~10 μL样本处理液Ⅱ, 混匀后进行离心富集(12 000 r/min, 离心半径8.6 cm, 离心5 min)。离心后弃上清液, 加入20 μL复溶缓冲液重悬沉淀; 取10 μL重悬液, 加入50 μL PCR反应液上机检测。从定量检测下限、交叉反应、抗干扰性、精密度方面评价该检测方法的性能。收集北京协和医院检验科临床样本(血清、尿液、唾液样本), 随机选取约1/5构建寨卡病毒感染模拟临床样本, 进一步评定该检测方法的性能。  结果  该检测方法对MR766、ZKC2/2016毒株的检测下限均为10¹半数组织培养感染剂量(50% tissue culture infective dose, TCID50)/mL; 对17种常见虫媒病原体检测结果均为阴性, 无交叉反应发生; 潜在干扰物质胆红素(15 mg/L)、血红蛋白(100 mg/L)、甘油三酯(2000 mg/L)、IgG(37.5 g/L)和EDTA-Na₂(2.5 g/L)对其检测结果无干扰; 检测低、中、高浓度寨卡病毒的批次内和批次间Ct值变异系数均＜10%, 精密度良好。共收集344份北京协和医院检验科临床样本, 其中构建寨卡病毒感染模拟临床样本73份。采用该检测方法对344份样本进行检测, 结果均与实际相符, 无假阳性和假阴性。  结论  寨卡病毒简单富集后再检测的方法特异性高、重复性好, 检测结果不受干扰物质的影响, 检测下限满足临床需求, 且操作简便, 但应用效果仍需在真实临床样本中进一步验证。     

抗M2-3E ELISA:一种新型、高效的PBC血清学诊断方法

原发性胆汁性肝硬化(PBC)是一种免疫介导的慢性炎症性胆汁性肝病,其病因不明。AMA-M2是PBC患者最为灵敏和最为特异的诊断标志,高达94%的PBC患者显示AMA-M2阳性。AMA-M2抗体的靶抗及OADC,由BCOADC-E2、PDC-E2、OGDC-E2、PDC-E1t和PDC-E3结合蛋白组成。德国欧蒙公司(EUROIMMUN)率先把融合重组蛋白BPO与天然的PDC纯化抗原相混合,开发了新型的抗M2-3EELISA检测法。该系统与仅采用天然M2抗原包被或仅包被BPO的ELISA检测系统相比,拥有敏感性较高的优点。     

循膀胱经弹拨法干预亚健康状态方案的优化研究

目的 观察循膀胱经弹拨法干预亚健康状态方案的疗效及优势,并规范其技术标准,为临床提供安全有效的治疗技术范例.方法 2009年3月-2010年8月,采用多中心、分层区组随机、平行对照的临床研究方法,选择亚健康状态受试者360例,随机分为传统组、弹拨组、复合组,每组120例.观察受试者干预前后的临床症状积分、血沉、血浆乳酸...     

mTOR通路抑制剂GDC-0349对CCRF-CEM细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨mTOR通路抑制剂GDC-0349对急性T淋巴细胞白血病细胞株CCRF-CEM细胞增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度GDC-0349作用于CCRF-CEM细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot 检测凋亡相关蛋白及AKT/mTOR通路相关蛋白的表达。结果:GDC-0349作用于CCRF-CEM细胞后细胞增殖率减少且凋亡率增加（P＜0.05);凋亡相关蛋白Caspase3和BCL2下调,Cleaved-Caspase3增加（P＜0.05);通路相关蛋白AKT、p-AKT及p-mTOR下调（P＜0.05）。结论:GDC-0349能够抑制AKT/mTOR通路活化,从而促进CCRF-CEM细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

锁骨下动脉损伤的手术治疗(附5例报告)

目的总结锁骨下动脉损伤的外科治疗方法。方法锁骨下动脉损伤患者5例。锁骨上平行切口1例,锁骨上平行切口+胸骨正中切口4例;1例行动脉结扎,4例行直接缝合修补。结果5例均治愈,无手术并发症发生。结论锁骨下动脉损伤是一种严重而复杂的血管损伤,选择合理的手术入路和适当的手术方法,是手术安全、成功的关键。     

MAGE-3蛋白在非小细胞肺癌中的表达

目的检测MAGE-3蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,为该蛋白作为疫苗来源对NSCLC患者进行免疫治疗提供依据。方法采用流式细胞术(FCM)对MAGE-3蛋白在3种人肺癌细胞系和56例NSCLC标本及相邻正常肺组织标本中的表达情况进行比较。结果3种人肺癌细胞系均表达MAGE-3蛋白;56例NSCLC标本中,26例表达MAGE-3蛋白,其中鳞状细胞癌的表达率明显高于腺癌的表达率(P<0.01),而相邻正常肺组织均不表达该蛋白。结论MAGE-3蛋白在NSCLC中呈高频率表达,提示该蛋白是对NSCLC患者进行免疫治疗的适宜疫苗来源。     

大剂量肌苷治疗心律失常36例报告

目的 通过分析大剂量肌苷治疗心律失常的疗效，以期增加治疗心律失常手段。方法 本对我院近3年来，大剂量肌苷治疗的36例早搏和／或伴有心动过速病人的临床资料进行了回顾和分析，并对其作用作了较详尽的探讨。结果 36例患、治愈13例，有效16例，无效7例。结论 大剂量肌苷治疗某些不明原因的早搏，心肌炎后遗症及冠心病所引起的早搏均有较好的疗效。     

不同消化道重建方式对胃癌合并2型糖尿病患者血糖的影响

目的:探讨胃癌手术不同消化道重建方式对合并2型糖尿病患者血糖变化的影响.方法:分析2006--2008年行根治性手术治疗的55例胃癌合并2型糖尿病患者术前及术后的血糖变化,按重建方式不同分为3组,包括行远端胃大部切除Billroth Ⅰ式吻合术11例,远端胃大部切除BillrothⅡ式吻合术25例,全胃切除食管空肠Boux-en-Y吻合术19例.比较3种术式患者术前、术后2周及半年空腹血糖和餐后2 h血糖水平.结果:Billroth Ⅱ式吻合、Roux-en-Y吻合2组患者术后2周及术后半年的血糖水半与术前相比出现持续而稳定的下降,且均较Billroth Ⅰ式吻合术组下降明显(P<0.05). Billroth Ⅱ式吻合组、Roux-en-Y吻合组术后半年血糖控制有效率分别为72.00%和73.68%,差异无统计学意义,但均高于Billroth Ⅰ式吻合组的27.27%.结论:Billroth Ⅱ吻合和Roux-en-Y吻合术对于合并2型糖尿病的胃癌患者具有一定的血糖控制作用.