一种快速诊断呼吸道合胞病毒感染的方法

应用引物设计原则，选择呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）基因组中高度保守的Ｆ基因作为扩增靶序列，独立设计合成了两对引物，建立了一个逆转录套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＲＳＶＲＮＡ的方法。结果：对引物进行敏感度实验，其检测敏感度为每ｍｌ１０ＴＣＩＤ５０ｓ（５０％ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｉｎｆｅｃｔｉｖｅｄｏｓｅ）的病毒量；用副流感病毒１型、甲型流感病毒、乙型流感病毒、新城疫病毒、腮腺炎病毒和腺病毒２型作对照，均无预期扩增产物出现，证实了设计引物的特异性；用建立的逆转套式ＰＣＲ方法对５例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测，发现３例阳性，２例阴性；同时用病毒培养法检测，结果完全相同。提示：该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点。     

一次性输液针在新生儿疾病筛查采血中的应用

[目的]探讨一次性输液针在新生儿疾病筛查采血中的应用效果。[方法]将107例新生儿随机分为观察组和对照组,观察组采用一次性输液针足拇趾采血,对照组采用传统一次性无菌三棱采血针足跟采血,比较两组采血一次成功率、采血时间、止血时间、新生儿哭闹时间及对护理服务的满意度。[结果]观察组采血一次成功率和护理服务满意度均明显高于对照组（P〈0.05）;观察组采血时间、止血时间和新生儿哭闹时间均明显少于对照组（P〈0.05）。[结论]在新生儿疾病筛查中应用一次性输液针足拇趾采血可提高采血一次成功率、减轻新生儿的痛苦、提高护理服务满意度。     

可溶性MOG35-55多肽预防实验性自身免疫性脑脊髓炎机制的初步研究

目的:探讨效应T细胞在可溶性MOG35-55多肽预防实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用。方法:脊髓病理切片观察中枢神经系统细胞浸润情况;流式细胞术检测效应T细胞表面标志物表达情况;ELISA检测脾脏中淋巴细胞上清液中干扰素-γ、白细胞介素-17、肿瘤坏死因子-α三种细胞因子的分泌。结果:MOG多肽成功诱导自身免疫性脑脊髓炎动物模型,对照组小鼠脊髓可见大量炎性细胞浸润,脾脏中MOG组T细胞总数增加,CD44highCD62Llow表达增高;中枢神经系统中MOG组T细胞总数减少,CD44highCD62Llow表达较EAE组低,干扰素-γ、白细胞介素-17、肿瘤坏死因子-α的分泌明显高于EAE组。结论:在实验过程中,效应T细胞被束缚于外周器官,MOG35-55多肽可能有效阻止了效应T细胞向中枢神经系统迁移,这可能是MOG多肽能够预防自身免疫性脑脊髓炎的机制之一。     

逆转录套式聚合酶链反应检测呼吸道合胞病毒

建立一种敏感、特异和快速诊断人呼吸道合胞病毒感染的方法。选择ＲＳＶ基因组中高度保守的Ｆ基因作为扩增靶序列，独立设计合成了两引物，建立了一个完整的逆转录套式聚合酶链反应检测ＲＳＶＲＮＡ的方法。对引物进行特异性实验，证明其具有高度特异性。     

骨髓染色体联合FISH技术在恶性血液病诊断中的应用价值

目的 探究联合改良骨髓染色体制备方法和荧光原位杂交(FISH)技术,分析其在恶性血液病特别是在慢性粒细胞白血病(CML)中的临床应用价值。方法 收集2019年1月至2022年6月来清远市人民医院就诊的355例恶性血液病患者作为研究对象,首先抽取16例患者的骨髓细胞对骨髓染色体制备的接种浓度、秋水仙碱浓度、时间和低渗等进行改良,优化后对培养时间进行单因素方差分析,按照不同培育时间(16 h、20 h、24 h和28 h)将每例平均分成A、B、C和D 4组;最后用改良方法对所有患者进行骨髓染色体核型分析,同时利用FISH技术对CML患者进行BCR-ABL融合基因检测,并对异常染色体统计分析。结果 单因素方差分析发现4组染色体分裂相均值差异有统计学意义(P<0.05),且B组(20 h)显著高于D组(P<0.05);B组的培养成功率同样显著高于D组(P<0.05)。355例恶性血液病患者均一性培养成功率为96.6%(343/355),异常染色体检出率为40.3%(143/355)。CML患者骨髓染色体和FISH阳性检出率一致,在加速期和急变期检出额外异常染色体。结论 改良后...     

人食管癌Eca-109细胞膜蛋白的分离和纯化

目的:建立人食管癌Eca109细胞系膜蛋白分离和初步纯化方法。方法:使用改良的Neville法提取细胞膜,在pH6.3的条件下,用去垢剂TritonX100和辛基β葡糖苷把细胞膜上的蛋白溶解下来,以超滤法纯化膜蛋白并分组。结果:在pH6.3的条件下,适当的去垢剂与膜蛋白质量之比使用去垢剂辛基β葡糖苷时为61;使用TritonX100时为21。超滤法将膜蛋白分为相对分子质量<3000、3000～10000、<10000、10000～30000、30000～100000、>100000共6个组分。结论:获得适当的去垢剂与膜蛋白质量比,并获得了不同的膜蛋白组分,为进一步研究人食管癌Eca109细胞肿瘤抗原奠定了基础。     

儿童过敏性哮喘尘螨特异性免疫治疗中干扰素-γ白介素4 T-bet和GATA-3 mRNA表达变化的研究

目的　探讨在过敏性哮喘尘螨特异性免疫治疗（SIT）过程中,与TH1/TH2细胞分化相关的干扰素-γ（IFN-γ）、白介素4（IL-4）、T-bet和GATA-3 mRNA在外周血单个核细胞（PBMCs）中表达的变化。方法 根据进行抗原特异性免疫治疗（SIT）的时间,采集郑州大学第一附属医院儿科门诊2007年11月至2008年9月收治的过敏性哮喘患儿36例,对其SIT治疗前、治疗16周后和治疗1年后的外周静脉血分离外周血单个核细胞,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR的方法检测每组中IFN-γ、IL-4、T-bet和GATA-3 mRNA表达情况。同时,观察患儿治疗前后的临床疗效。结果 随着SIT治疗的进行,患儿临床症状明显减轻,外周血中在mRNA表达水平IFN-γ/IL-4和T-bet/GATA-3的比值逐渐升高。结论 哮喘患儿特异性免疫治疗有效;治疗后TH1/TH2细胞的失衡得到一定的纠正;T-bet和GATA-3转录因子在哮喘的发生和SIT治疗中起重要作用。