PCR技术在检测基因突变中的新进展

PCR(polymerase chain reaction)已作为分子生物学研究中的基本技术得到广泛应用。近年来,以PCR为基础发展起来的检测基因突变的新技术,设计先进、操作省时、方便,比传统的分子杂交分析法更具有实用性。且已在遗传病的基因诊断的应用中显示出巨大的潜力。本文就运用这些方法检测基因突变的基本原理及方法学加以综述。     

应用反向点杂交检出新疆六种β地中海贫血突变型

应用反向点杂交检出新疆六种β地中海贫血突变型李厚钧，徐湘民，周常文，刘忠英，余伍忠，秦清和β地中海贫血（β地贫）是我国南方常见的遗传性溶血性贫血，大部分系β珠蛋白基因的点突变所致。新疆已有５种见诸文献报道［１］，近来又在乌鲁木齐市检出６种β地贫的基因...     

DNA甲基化分析技术的研究进展

在生物中,特别是在真核生物中,DNA甲基化已成为阐明正常和病理基因表达现象的重要机制,因而已成为当前分子生物学的研究热点之一。由之而产生的DNA甲基化技术也有了长足的发展。目前至少已报道了三类10种此类技术。而近几年迅速发展起来的以HSO3^-转化为基础的各种DNA甲基化检测技术,因其具有简便可行,准确灵敏等诸多优点,最令人瞩目。本仅就这些方法的原因,灵敏度和准确性以及应用作一简要的综述。     

应用温度梯度凝胶电泳分析非缺失型〆-地中海贫血突变

目的　建立用于非缺失型 α-地中海贫血 (α-地贫 )突变筛查的温度梯度凝胶电泳(temperature gradientgel electrophoresis,TGGE)技术。方法　以不同基因型人基因组 DNA为模板 ,选择性扩增全长 α2 -珠蛋白基因 ,继以巢式 PCR扩增突变热点区域 ,然后建立并优化 TGGE参数。在此基础上 ,筛查表型阳性的 15例非缺失型 α-地贫疑诊样品 ,阳性样品经 DNA序列测定确认突变。结果　建立了分析5 43bp PCR片段和 α2珠蛋白基因全长 10 85 bp片段的 TGGE技术 ,可检测出中国人群中常见的两种 α-地贫点突变 :Hb Constant Spring(Hb CS)和 Hb Quong Sze(Hb QS)及 Hb Westmeadα2 CD12 2 CAC→ CAG(His→ Gln)。15例样品中 ,10例为 Hb CS,2例为 Hb QS,2例为 Hb Westmead,1例为新的与 Hb H病相关的突变 α2 CD31AGG→ AAG(Arg→ L ys)。结论　所建立的 PCR- TGGE技术可用于非缺失型 α-地贫点突变和 α-珠蛋白基因多态性的分子筛查