激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与膀胱移行细胞癌进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(lasercap-turemicrodissection,LCM)是不可缺少的,然而从LCM所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文首次将LCM与RNA线性扩增结合用于膀胱癌相关基因研究,目的是确定一条切实可行的技术路线,将膀胱移行上皮细胞从膀胱粘膜中分离出来,将膀胱癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其进行RNA体外线性扩增,以备进一步研究。方法采用LCM技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞,提取RNA,并对微量RNA进行体外线性扩增。然后用RT-PCR验证扩增前、后RNA中β-actin基因表达水平。结果对照实验I证实经LCM后RNA完整性较好;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下LCMshooting次数与可获得RNA量间对应关系。从膀胱粘膜种捕获膀胱移行上皮细胞25万shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞20万shootings。产物RNA扩增后获得片段大小为0.5-2.5kh的aRNA,且β-actin基因表达表达完整。结论LCM结合RNA体外线性扩增技术能成功地获取较为单一的研究目的细胞,扩增后RNA完整性较好,能用于进一步研究中。     

后腹腔镜保留肾单位手术治疗肾癌(附9例报告)

目的：探讨后腹腔镜保留肾单位治疗肾癌的手术方法及其临床效果。方法：采用后腹腔镜保留肾单位手术治疗肾癌共9例,经病理确诊为肾透明细胞癌6例,肾乳头状腺癌3例。结果：9例手术均获成功。手术时间120～160min,平均130min。住院时间7～10天。术后无并发症。术后随访1～18个月,无肿瘤复发及转移,无切口肿瘤种植。结论：后腹腔镜保留肾单位手术治疗肾癌具有创伤小、解剖清晰、术中出血少、术后恢复快等优点。     

维生素D缺乏与Graves病及其并发症关系的临床研究

目的：研究弥漫性甲状腺肿伴甲亢（Graves disease,GD）、甲亢性眼病（Graves’ ophthalmopathy,GO）、甲亢性心脏病（hyperthyroid heart disease,HHD）患者血清25-（OH）D3水平与甲状腺功能、病程、甲状腺大小等的相关性。方法：选取符合试验标准的对象150例,分为：GD组（n=50）,GO组（n=50）,HHD组（n=50）,同期与实验组匹配的50例体检正常者为正常对照组（n=50）,检测所有对象的free triiodothyronine（FT3）、free thyroxine（FT4 ）、thyroid stimulating hormone（TSH）、thyroid peroxidase antibody（TPOAb）、thyrotrophin receptor antibody（TRAb）及25-（OH）D3水平。血清25-（OH）D3水平参照国际标准：＜20 ng/mL视为缺乏,20～30 ng/mL视为不足,≥30 ng/mL视为充足。结果使用SPSS 17.0统计软件进行分析。结果：①与正常组相比,GD组、GO组和HHD组血清 FT3、FT4、TPOAb、TRAb均明显升高（P=0.000）,TSH、25-（OH）D3均明显降低（P=0.000）;GD组、GO组和HHD组血清 FT3、FT4、TPOAb、TRAb和TSH差异均无统计学意义（P＞0.05）;血清25-（OH）D3水平GO组和HHD组均明显低于GD组（P=0.000）,而GO组和HHD组间差异（P=0.320）无统计学意义。②GO组25-（OH）D3水平与FT4（r=0.40,P=0.004）、FT3（r=0.39,P=0.006）呈显著正相关,与TSH未见统计学相关性（P＞0.05）;其余组未见统计学相关性（P＞0.05）。结论：低25-（OH）D3血症可能与GD及相关并发症的出现密切相关,25-（OH）D3水平缺乏还可能参与了GO和HHD的发生和进展。     

GLP-1类似物利拉鲁肽对糖尿病神经病变大鼠坐骨神经PARP-1/NF-κB表达的影响

目的：　通过构建大鼠糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy,DPN）模型探究胰高血糖素样肽1（glucagon-like peptide 1,GLP-1）类似物利拉鲁肽对DPN大鼠坐骨神经聚腺苷二磷酸核糖聚合酶/激活核因子-κB（poly ADP-ribose polymerase/nuclear factor kappa-B,PARP/NF-κB）表达的影响。方法：　SD大鼠84只,随机选12只作为正常组;其余大鼠均采用链脲佐菌素诱导建立DPN模型。建模成功后,抽取72只大鼠随机分为模型组,胰岛素组,甲钴胺组,利拉鲁肽低、中、高剂量组。正常组和模型组皮下注射等体积生理盐水,胰岛素组给予胰岛素治疗,甲钴胺组给予甲钴胺治疗,给药组给予不同剂量利拉鲁肽治疗,共治疗8周。记录各组大鼠体质量和血糖,测定神经反应速度,ELISA检测炎症因子,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PARP-1、NF-κB蛋白表达,EMSA检测NF-κB转录活性。选择RSC96细胞建立高糖环境下细胞损伤模型,应用基因芯片预测PARP-靶基因,并通过转染PARP-1进行检验。结果：　与模型组比较,利拉鲁肽治疗后大鼠体质量显著增加,血糖显著降低,神经反应速度提高（P<0.05）;大鼠实验和细胞实验显示利拉鲁肽给药后细胞炎症因子含量及PARP和NF-κB蛋白表达较模型组显著降低,高剂量组降低幅度更明显（P<0.05）;大鼠神经细胞凋亡率较模型组显著降低（P<0.05）;利拉鲁肽抑制了NF-κB的转录活性;PARP-1转染组炎症因子和PARP-1、NF-κB蛋白水平显著高于中剂量组（P<0.05）,PARP-1/NF-κB是GLP-1对糖尿病神经病变大鼠抗炎症作用的重要靶点。结论：　利拉鲁肽可以降低DPN大鼠坐骨神经PARP-1和NF-κB的表达水平,从而降低大鼠坐骨神经损伤,起到防治糖尿病周围神经病变损伤的作用。     

情景模拟教学在大学生“性与健康”课程中的运用

目的在大学生“性与健康”课程中开展情景模拟教学,评价教学效果。方法2010年2月至2011年6月问,在上海交通大学开设面对所有专业本科生的“性与健康”通识核心课程。授课过程中开展情景模拟教学,学期末收集学生对于情景模拟的心得体会及反馈意见,进行整理分类。结果所有课程小组均认真完成情景模拟,所表演的内容包括：大学生同性恋问题、意外怀孕及避孕知识介绍等。根据教学反馈,所有学生均较为认可这样的教学方式。结论情景模拟教学能显著提高学生的学习兴趣和热情,加深学生对知识的掌握和理解,提高学生的表达能力,培养团队合作能力。     

解郁丸对WKY抑郁样大鼠前额叶皮层与海马树突棘的影响

目的:观察Wistar-Kyoto(WKY)抑郁模型大鼠前额叶皮层与海马组织中树突棘的变化,并探讨解郁丸在其中的作用。方法:以成年雄性WKY大鼠为实验组,选用同品系SPF级Wistar大鼠为其对照组。首先,用糖水偏好实验、旷场实验和强迫游泳实验检测大鼠行为学变化,并作为其基线;然后将实验组所有WKY大鼠随机分为模型组、解郁丸组和西酞普兰组,与对照组分别进行21 d灌胃给药,再用相同的行为学方法检测给药后行为的变化。采用Golgi染色观察前额叶皮层与海马组织中树突棘的病理特点。Western blot检测前额叶皮层与海马组织突触后致密区蛋白95(PSD-95)的表达水平。结果:给药前,WKY大鼠表现出明显的抑郁样行为,前额叶皮层与海马组织中树突棘的密度明显降低(P<0. 01),且PSD-95蛋白的表达水平明显降低(P<0. 01);经药物治疗后,WKY大鼠的抑郁样行为明显减少,前额叶皮层与海马组织中树突棘的密度升高(P<0. 01),PSD-95蛋白的表达水平也提高(P<0. 01)。结论:解郁丸能明显减少WKY大鼠抑郁样行为,且影响树突棘的结构改变及PSD-9...     

金银花口服液治疗新型冠状病毒肺炎80例临床疗效分析

目的探讨金银花口服液治疗新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎,COVID-19)的临床疗效。方法将120例COVID-19普通型患者按照1∶2随机分为两组。对照组40例,仅给予洛匹那韦/利托那韦或阿比朵尔、α-干扰素等常规治疗;治疗组80例,在常规治疗的基础上加用金银花口服液治疗。比较两组患者治疗前(V1)和治疗5 d(V2)、10 d(V3)的临床症状消失率、呼吸道样本新型冠状病毒(SARS-CoV-2)-qRT-PCR转阴率、胸部CT检查影像学评分及不良反应发生率。结果两组患者基线资料比较,差异无统计学意义。与对照组治疗后比较,治疗组V2时临床发热(77.94%比56.67%)、乏力(75.86%比57.14%)、咳嗽(67.74%比45.83%)消失率明显提高(P<0.05),治疗组V3时临床咳嗽消失率(90.32%比66.67%)明显提高(P<0.05),治疗组V3时胸部CT检查影像学评分[(10.95±1.43)分比(12.92±2.02)分]明显降低(P<0.01);治疗组临床发热、乏力消失率V3时(100%比100%,91.38%比85.71%),SARS-CoV-2-qRT-PCR转阴率V2时(81.25%比77.50%)与V3时(93.75%比92.50%),以及胸部CT检查影像学评分V2时[(15.09±2.56)分比(15.12±3.371)分]的差异无统计学意义(P>0.05),但显示出有改善趋势。治疗组和对照组与用药相关的不良反应发生率分别为1.25%和0,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在常规治疗基础上加用金银花口服液,可以显著改善新冠肺炎患者的发热、乏力、咳嗽症状,减轻肺部病变,对病毒核酸检测转阴也显示出良好的改善趋势。     

刺络拔罐配合电针治疗急性腰扭伤临床观察

目的：刺络拔罐配合电针治疗急性腰扭伤的疗效。方法：将95例患者,随机分为2组。对照组40例采用常规电针治疗;治疗组55例在电针治疗的基础上再行阿是穴或十七椎刺络拔罐放血疗法。疗程1～2周。结果：治疗组痊愈39例,有效15例,无效1例,总有效率98．2％;对照组痊愈27例,有效9例,无效4例,总有效率90．0％。治疗组较对照组疗效更明显（P〈0．05）。结论：刺络拔罐结合电针治疗急性腰扭伤疗效显著。     

聚乙烯吡咯烷酮碘的临床应用

<正> 聚乙烯吡咯烷酮碘(Polyvinylpyrrolidone-iodine简称PVP-Ⅰ,英美药典中称为Povidone-iodine),作为一种碘附(iodophor)制剂,最先由美国学者Shelanski于1953年合成。目前,我国国内市场仅有溶液剂供应,并称之为强力碘等名称。PVP-Ⅰ以其优越的杀菌消毒作用而被广泛用于临床,并且还具有不挥发、易保存、便于携运等特点,因而更适合野战条件下医疗卫生的需要。     

血清协同刺激分子B7-H3和lL-18与乙肝肝硬化患者分级相关性及临床意义

目的:探讨血清协同刺激分子B7家族3(B7-H3)、 白细胞介素-18(IL-18)水平变化与乙肝肝硬化(HBC)患者Child-Pugh分级的关联性及临床意义.方法:选取2018年2月～2020年8月我院HBC患者126例作为观察组,其中Child-Pugh分级A级68例,B级37例,C级21例,同期慢性乙型肝炎(C...