IRF3调控瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质表达的研究

目的通过观察干扰素调节因子3（IRF3）对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质表达的作用,探讨IRF3在皮肤纤维化中的调控机制。方法取行瘢痕疙瘩切除手术的10例患者的术中切除的瘢痕疙瘩组织为研究材料,另择8例外科手术患者的正常皮肤组织为对照,培养两者的成纤维细胞。采用real-timeRT-PCR、Westernblot检测成纤维细胞IRF3mRNA、蛋白表达水平,转染siRNAs-IRF3后IRF3蛋白水平;检测TGF-茁1诱导后瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖情况,细胞外基质Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ）、a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）I型胶原与TGF-茁受体Ⅰ、Ⅱ,及TGF-茁1信号通路调节蛋白p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3表达水平。结果IRF3在瘢痕疙瘩组织中表达显著上调。下调IRF3的表达,显著抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并抑制collagenⅠ、a-SMA的表达,同时抑制TGF-茁1诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞的TGF-茁受体Ⅰ、Ⅱ的表达。下调IRF3的表达亦抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3表达水平。结论IRF3表达下调通过抑制TGF-茁1/Smad信号通路,抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和细胞外基质的表达。IRF3或为治疗瘢痕疙瘩新的靶点。     

温州地区8591例浅部真菌病发病及镜检情况分析

目的:了解温州地区皮肤科门诊浅部真菌病发病的种类、构成比及流行病学特点,评估直接镜检法对浅部真菌病的诊断意义。方法:采用病例回顾性分析,对8591例临床拟诊为浅部真菌病者进行直接镜检。结果:近五年就诊人数呈上升趋势,各种浅部真菌病发病种类和构成比没有明显变化。浅部真菌病发病率以手足癣(33.3%)、甲癣(23.3%)、花斑癣(12.8%)为前三位。镜检阳性率排在前三位的是股癣(68.8%)、花斑癣(68.4%)、马拉色菌毛囊炎(63.1%),总阳性率为55.0%。结论:温州地区浅部真菌发病的种类和构成比无明显变化,直接镜检法作为真菌学检验方法经济、简便易行,值得临床使用。     

幽门螺杆菌感染与寻常型银屑病的相关性研究

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与寻常型银屑病的相关性.方法 选取86例寻常型银屑病患者作为研究对象,随机分为A组及B组各43例,A组患者给与抗幽门螺杆菌三联疗法,并且外用维甲酸软膏进行治疗;B组患者单纯给与维甲酸软膏外用治疗;同时根据年龄、性别相匹配选取同期门诊正常体检者60例作为对照组.结果 寻常型银屑病组Hp总感染率为52.33％,其中A组感染率48.84％,B组感染率55.81％,对照组Hp感染率为28.33％,寻常型银屑病组与对照组Hp感染率之间比较差异有统计学意义(x2=8.33,P＜0.05);治疗后寻常型银屑病组Hp感染转阴率91.11％,其中A组转阴率100.00％,B组转阴率70.83％,两组转阴率比较差异有统计学意义(x2 =85.20,P＜0.05);PASI评分A组治疗前后分别为(15.51±8.46)分、(4.37±2.28)分,B组治疗前后分别为(15.72±8.02)分、(7.33±3.19)分,VAS评分A组治疗前后分别为(5.11±2.49)分、(2.15±1.38)分,B组治疗前后分别为(5.35±2.04)分、(3.24±1.82)分,A、B组PASI及VAS评分治疗后与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05),A、B组治疗后PASI及VAS评分比较差异有统计学意义(P＜0.05);A组治疗总有效率为69.77％,B组治疗总有效率为30.23％,两组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Hp感染与寻常型银屑病具有密切相关性,对异常型银屑病有Hp感染阳性患者应该考虑同时进行抗Hp治疗,有助于提高异常型银屑病的治疗疗效.     

β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白在皮肤基底细胞癌中的表达和意义

目的：探讨皮肤基底细胞癌（basal cell carcinoma,BCC）中β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白的表达与BCC发生发展的关系。方法：采用免疫组化方法检测BCC组织切片中β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：48例BCC标本中β-catenin蛋白的异常表达率为91.67%,Bcl-2、Bax蛋白的表达率分别为89.58%、62.5%,且Bcl-2与Bax蛋白的表达呈负相关。结论：β-catenin和Bcl-2、Bax蛋白的异常表达在BCC的发生、发展中起重要作用。     

外周血T淋巴细胞亚群及Th17指标与梅毒的关系探究

目的:探究外周血T淋巴细胞亚群及Th17指标与梅毒的关系。方法:选取2014年2月至2015年12月于本院进行诊治的63例梅毒患者为观察组,63名同龄健康体检者为对照组,然后将两组的外周血T淋巴细胞亚群指标及血清Th17指标进行分别检测与比较,并比较观察组中不同分期与TRUST滴度梅毒患者的上述指标检测结果,另采用Logistic分析外周血T淋巴细胞亚群及Th17指标与梅毒的关系。结果:观察组的NK细胞均低于对照组,其他外周血T淋巴细胞亚群指标及血清Th17指标均高于对照组,且观察组中不同分期及TRUST滴度梅毒患者的上述指标检测结果也存在明显差异;采用Logistic分析显示,外周血T淋巴细胞亚群及Th17指标均与梅毒有密切的关系,P均0.05。结论:外周血T淋巴细胞亚群及Th17指标均与梅毒有密切的关系,因此对梅毒患者进行上述指标的检测价值较高。     

HPV16型E7抗原B细胞表位的预测与鉴定

目的分析人乳头瘤病毒16型(HPV16)早期蛋白E7的B细胞优势表位,并对其进行免疫原性鉴定。方法采用亲水性方案、柔韧性方案、抗原指数方案及表面可能性方案综合评估其B细胞优势表位,并运用固相合成法合成多肽,经RP-HPLC纯化及纯度分析,用质谱进行定性鉴定。以合成肽免疫Balb/c小鼠,进行免疫效果评价。结果综合分析考虑HPV16 E714-21(P1),HPV16 E726-37(P2),HPV16 E744-51(P3)可能是B细胞优势表位,免疫小鼠后可明显诱导小鼠血清抗体滴度升高,但只有P1和P2产生的抗体与人宫颈癌组织上清液结合呈阳性反应。结论HPV16 E714-21和HPV16 E726-37具有较强的免疫原性,可能成为HPV感染肽疫苗的候选表位。     

2型糖尿病合并肺炎克雷白杆菌败血症脾脓肿一例

患者男性 ,4 7岁。因多饮、多食、多尿、消瘦 13年 ,畏寒、发热 12ｄ入院。 13年前被确诊为 2型糖尿病 ,用降糖片、胰岛素治疗后症状缓解。 6个月前出现双下肢水肿 ,12ｄ前出现畏寒、发热。为进一步诊治入我院。体检 :Ｔ 38 9℃ ,Ｐ88次 /ｍｉｎ ,Ｒ 2 0次 /ｍｉｎ ,ＢＰ 74 / 4 6ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ =0 133ｋＰａ) ,神志清楚 ,消瘦 ,中度贫血貌 ,心率 88次 /ｍｉｎ ,律齐 ,双肺未见异常 ,腹软 ,肝脾未扪及 ,肝脾及双肾区无叩痛 ,移动性浊音阴性 ,双足水肿。查血象 :ＷＢＣ 8 2× 10 9/Ｌ ,中性0 195 ,淋巴 0 80 5 ,ＲＢＣ 2 86× 10 12…     

复发性外阴尖锐湿疣HPV的检测及型别分析

采用聚合酶链反应（PCR）方法结合核酸斑点杂交技术,对45例外阴复发性尖锐湿疣（RCA）进行HPV DNA的检测及分型。结果45例RCA中HPV DNA阳性40例,HPV检出率为88.8%。健康对照组各型均阴性,差异有极显著性（P〈0.001）。40例RCA中低危型HPV6、11分别为27.5%、22.5%;高危型HPV16、18未检出;高危型HPV33为5%。其中HPV6、11、16、18、33多重型别感染的病程大于7个月以上较单一型感染的检出率明显升高（85.7%vs14.2%,P〈0.001）。RCA多重型别感染与对照初发CA多重型别感染检出率比较差异有显著性（45%vs11.1%,P〈0.05）。温州地区复发性尖锐湿疣以多重型别混合感染为主,且与临床病程迁延,病情复发存在着一定的相关性。     

HPV16E7_(11-20)配体抗肿瘤免疫的作用

目的比较HPV16型E7抗原CTL表位E711-20(YMLDLQPETT)与其修饰多肽配体APL(YLLDLQPE-VT)诱发特异CTL免疫应答的能力和抗肿瘤免疫治疗的作用。观察E711-20及其APL的小鼠TC-1细胞肿瘤免除率、存活时间与荷瘤小鼠的肿瘤体积变化,了解其预防和治疗效果。方法以E711-20及其修饰多肽配体(APL)免疫C57BL/6小鼠,测定免疫后小鼠脾淋巴细胞的增殖指数;用LDH释放试验检测免疫后小鼠脾淋巴细胞的CTL杀伤活性。结果脾细胞增殖实验中,3组增殖指数如下:IFA+APL组2.42±0.38,IFA+E711-20组1.68±0.32,IFA组1.07±0.22;CTL杀伤效应实验中,3组靶细胞溶破率(%)如下:IFA+APL组54.21±0.12,IFA+E711-20组62.33±0.46,IFA组0.88±0.07;IFA组肿瘤免除率为0,IFA+E711-20组肿瘤免除率为40%,IFA+APL组肿瘤免除率为80%;荷瘤小鼠中,对照组IFA肿瘤体积迅速增大,E711-20和APL组的肿瘤生长速度较慢。APL免疫诱导的小鼠脾淋巴细胞,其CTL杀伤活性和增殖能力强于E711-20;APL对TC-1肿瘤细胞的预防和治疗效果优于E711-20。结论 APL诱导特异性抗肿瘤免疫应答的能力和抗肿瘤效果优于E711-20,可能为针对HPV16E7抗原的肽疫苗分子设计提供理想的CTL表位。     

掌跖角化牙周病综合征一例及组织蛋白酶C基因突变检测

目的 探讨掌跖角化牙周病综合征患者组织蛋白酶C基因（CTSC）突变的特点。 方法 收集1例掌跖角化牙周病综合征患者的临床资料,采集患者及其父母的外周静脉血各2 ml,同时取100例健康人的静脉血2 ml作为对照。以提取的DNA作为模板,用成对的外显子特异性引物对患者的CTSC基因的全部7个外显子进行PCR扩增后直接测序,检测患者CTSC基因的突变情况。 结果 患者的CTSC基因存在复合型杂合突变,外显子6内第824位碱基C被T置换（c.824C > T）,此突变导致CTSC基因第275位氨基酸密码子由ACC替换为ATC,其编码的氨基酸由苏氨酸替换为异亮氨酸（p.T275I）;外显子7内第1040位碱基A被G置换（c.1040A ＞ G）,导致CTSC基因第347位氨基酸密码子由TAT替换为TGT,其编码的氨基酸由酪氨酸变为半胱氨酸（p.Y347C）。其中c.824C > T突变是CTSC基因的新突变位点。患者父亲和母亲分别为c.824C > T和c.1040A ＞ G杂合突变。100例健康对照中未发现CTSC基因c.824C > T和c.1040A ＞ G突变。 结论 CTSC基因突变是导致掌跖角化牙周病综合征临床表型的致病原因,c.824C > T突变扩大了CTSC基因的突变谱,为掌跖角化牙周病综合征的基因诊断提供了依据。