突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中

目的将突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。方法利用PCR方法从重组子pEGFP—N2-mSOD1中扩增突变的SOD1cDNA片断。以EcoRⅠ／salⅠ双酶切突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7，在T4DNA连接酶的作用下，连接突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7。转化感受态DH5α，筛选重组子，进行双酶切和测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定，突变SOD1cDNA成功地亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。结论亚克隆成功，可以对目的基因进行下一步研究。     

β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究

目的探讨β4整合素结合蛋白（ITGB4BP）对成纤维细胞胞外基质生成的调控作用。方法分别构建、包装能在哺乳动物细胞中促进和抑制ITGB4BP表达的腺病毒表达载体pAdEasy-ITGB4BP-EGFP和慢病毒表达载体Lentivirus-FIV-H1／U6-copGFP-ITGB4BP-RNAi,经筛选鉴定有效后,分别感染人正常皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕（HTS）成纤维细胞,利用ELISA检测细胞培养上清内基质金属蛋白酶（MMP-9）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和I型胶原蛋白（collagen I）的表达情况。结果正常皮肤成纤维细胞内IT—GB4BP高表达后,引起MMP-9、TGF-β1和collagen I表达降低;反之HTS成纤维细胞内ITGB4BP表达抑制后,MMP-9、TGF-β1和collagen I表达增高。结论ITGB7BP对MMP-9、TGF-β1和collagen I表达具有重要调节功能。提示ITGB4BP可能具有抗纤维化的重要功能,为下一步深入探讨HTS的形成机制提供了重要依据。     

HT036是纤维化相关基因P311的相互作用蛋白

目的利用激光共聚焦显微镜观察未知蛋白（HT036）与纤维化相关蛋白（P311）的细胞内表达与共定位。方法构建带绿色荧光的HT036真核表达载体,经鉴定正确后,与前期构建带红色荧光的P311真核表达载体共转染人胚肾上皮细胞株（HEK293）,同时共转染空载体做对照,激光共聚焦显微镜下观察蛋白在细胞内表达、分布和共定位。结果HT036真核表达载体经聚合酶链反应（PCR）、双酶切和测序鉴定正确,与P311共转染HEK293细胞后,激光共聚焦显微镜观察到绿色和红色荧光表达。HT036和P311主要分布在细胞胞浆,两者在HEK293细胞中存在共定位,而对照组则无该现象。结论通过酵母双杂交筛选出的P311相互作用蛋白HT036,在活体细胞内存在空间上的共定位,进一步证明它们之间的相互作用,为探讨P311纤维化机制提供新的切人点。     

深入浅出话内丹 ——养胎及五炁朝元(二)

大家看《黄帝内经》知道,对于普通人来说,维持生命就要进食五谷,五谷代表后天八卦有形的五行物质.想不想吃是脾管,能不能吃是胃负责.脾胃是"后天之本",能运化水谷,五谷在胃肠之中消化吸收,在胃中腐熟,经过脾的运化,变成水谷精微,也就是营气等,输送到身体各处滋养身体.对于个体而言,先天必须附着在后天的有形肉身之中才能存在,这...     

降纤酶治疗急性脑梗死的临床分析

目的观察降纤酶治疗急性脑梗死的临床疗效及安全性.方法在发病24h使用降纤酶治疗急性脑梗死67例,同时与注射等容生理盐水的对照组72例脑梗死作对照研究.结果降纤酶治疗后血浆纤维蛋白原(FIB)水平降低显著,临床神经功能显著改善,可能有出血并发症,两组比较无显著差异. 结论降纤酶治疗急性脑梗死安全可靠.     

肺纤维支气管镜细胞病理学检查对肺癌的诊断价值

〔摘 要〕 目的：探讨肺纤维支气管镜细胞病理学检查对肺癌的诊断价值。 方法：选取驻马店市中心医院 2019 年 1 月至 2019 年 12 月期间收治的 96 例肺癌患者，对全部患者进行组织病理学诊断和肺纤维支气管镜细胞病理学诊断，观察诊断结果。 结果：96 例患者均经病理学诊断为肺癌，其中肺纤维支气管镜细胞病理学诊断结果显示 75 例与组织病理学诊断结果一致， 诊断符合率为 78.13 %。同时将不同肺纤维支气管镜细胞病理学检查方式在小细胞癌、鳞癌、腺癌中的诊断符合率进行比较， 差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）；灌洗液联合刷片与肺癌组织类型的诊断符合率明显高于灌洗液细胞学检查的诊断符合率， 差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：肺纤维支气管镜细胞病理学检查对于肺癌的诊断具有较高的诊断价值。为了能 够进一步提高肺癌的检出率，可使用肺纤维支气管镜刷片细胞学联合灌洗液细胞学检查方法。     

混合型肝癌与肝细胞癌共存1例报告并文献复习

背景与目的 混合型肝癌（cHCC-CC）是临床原发肝癌中比较少见的类型,因其临床表现不典型导致术前诊断困难,主要依靠术后病理确诊。在同一肝癌组织标本中,肝细胞癌（HCC）和cHCC-CC同时存在的病例更是少见。本文回顾1例cHCC-CC和HCC共存的临床资料,结合既往文献对本病特点进行复习,以期为临床工作提供经验借鉴。方法 回顾性分析海南省肿瘤医院肝胆胰外科收治的1例肝癌患者的临床资料,该患者术后病理提示肝VII段2个病灶分别为HCC、cHCC-CC,结合前期文献资料进行复习总结。结果 患者,男性,60岁;因肝占位病变就诊海南省肿瘤医院肝胆胰外科行手术治疗。术前上腹部增强MRI可见肝VII段肿物2个,其中一肿物动脉期强化明显,静脉及延迟期造影剂快速排出;另一肿物动脉期肿瘤部分强化,静脉期肿瘤不均匀强化。初步诊断：肝癌伴肝内转移。全麻下行肝VII段切除术。术后病理：肝VII段肿瘤2个,肿瘤1大小2.0 cm×1.5 cm×1.0 cm,免疫组化hepatocyte（+）,GPC-3（部分+）,CD34（血管内皮+）,Ki（2%+）,考虑HCC;肿瘤2大小1.2 cm×1.5 cm×0.5 cm,免疫组化Hepatocyte（+）,GPC-3（-）,CD34（血管内皮+）,Ki（<1%+）,CK19（胆管+）,CK7（胆管+）。病理诊断：cHCC-CC;周围肝组织呈肝硬化改变,有片状坏死及脉管瘤栓,切缘阴性。术后10 d恢复顺利出院;未见高危复发因素,无预防性靶向治疗。常规随访未见肿瘤复发征象,患者肝功能,甲胎蛋白（AFP）,CA19-9,CEA均正常,一般状况良好。结论 当发现影像学和肿瘤标志物不能完全匹配HCC和胆管细胞癌,且存在AFP、CEA、CA19-9同时增高时,应考虑cHCC-CC的可能性,必要时可行穿刺活检证实,在充分考虑肿瘤分期和肿瘤生物学活性的基础上,根治性手术治疗是此类型肝癌的最佳治疗方案。     

改良与传统开胸、关胸方法对胸部疼痛影响的对比分析

目的观察改良与传统开胸、关胸方法对术后手术侧胸部疼痛的影响。方法将开胸手术病例50例随机分成两组,每组25例,传统开胸、关胸方法为A组（n=25）,改良开胸、关胸的方法为B组（n=25）,A组采用切除选定部位的一根肋骨进入胸腔,关胸采用直接用7号丝线缝合切口上下肋间肌和壁层胸膜关闭胸腔;B组采用术中不切除肋骨,经选定的肋间进入胸腔,关胸时用克氏针在切口下位肋骨上钻三个等距小孔后经钻孔处缝入1号可吸收缝合线,并经上位肋骨上缘缝出后结扎关闭胸腔。分别于术后24 h、72 h、10 d、3 mo询问及随访病人,进行疼痛评分,观察有无胸壁疼痛及疼痛程度。结果A组术后24 h、72 h、10 d、3个月疼痛评分分别为7.22&#177;0.65、5.98&#177;0.62、4.70&#177;0.50、3.46&#177;0.38,B组术后24 h、72 h、10 d、3 mo疼痛评分分别为5.26&#177;0.44、3.28&#177;0.56、1.08&#177;0.37、0.30&#177;0.25,两组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论B组较A组术后疼痛消失快,远期效果好。     

神经精神性红斑狼疮6例报告

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者约25%~75%有中枢神经系统受累,尤其是脑损害,出现各种神经精神症状,称之神经精神性红斑狼疮(neuropsychiatriclupus erythematosus,NPLE)或系统性红斑狼疮脑病。现将我院2000年1月~2005年12月收治的6例NPLE患者报告如下。1临床资料1.1一般资料本组6例均为女性,年龄15~37岁,病程4个月~10年。全部病例都符合美国风湿病协会1982年制定的SLE诊断标准[1],患者住院期间出现NPLE临床表现,并经脑电图、脑脊液细胞学和头颅影像学检查除外其他原因如高血压脑病、精神病、颅内感染、尿毒…     

深入浅出话内丹——玉液还丹与金液还丹(三)

大周天是小周天修炼到了一定程度自然出现的一种现象,是小周天水到渠成的结果. 大周天的过程,其实就是药物一次量变到质变的过程.前面小周天不断地采小药,小药为"微阳",每次采集一点,称之为"一刀圭",刀圭是中国古代一种计量工具,一刀圭量非常少,古代炼外丹所放的催化剂就是"一刀圭",就能起到"点石成金"的神奇功效,就像卤水点...