分子杂交法鉴定人睾丸cDNA重组片段

鉴定cDNA表达文库构建是否成功的一个重要指标是cDNA片段与噬菌体载体的重组率,为能精确地反映出我们所构建的人睾丸cDNA表达文库的重组率,我们在运用遗传显色法检测的同时,进一步运用分子杂交法进行了测定.结果显示,运用遗传显色法测定的重组率为66%,分子杂交法测定的重组率为51%.表明所构建文库具有较高的重组率,并提示遗传显色法测出的重组率中有部分是因为基因休克导致的假阳性.运用分子杂交法虽然方法较复杂,但准确性高,应该提倡使用.     

一个新的基因转录本的克隆及序列分析

目的：筛选与精子发生和(或)睾丸发育相关的基因。方法：将不同发育阶段(胚胎和成人)的睾丸组织cDNA探针与人睾丸cDNA芯片进行杂交，通过杂交信号的比较，筛选出差异表达的基因。结果与结论：经测序发现该基因全长1316bp，包含1个1056bp的开放阅读框，编码351个氨基酸。生物信息学序列分析表明，它是p44S10基因家族的一条新的转录本基因，该基因的氨基酸序列编码一26S蛋白酶体调控亚基，在进化中高度保守，提示了该基因在生物体中的重要作用。     

人胚胎干细胞研究进展

人体的发生过程为:精子和卵子受精,形成合子,合子卵裂成卵裂球,于受精后72 h形成桑椹胚,并于受精后5～7 d成为囊胚。囊胚由滋养层和内细胞群组成,滋养层将分化成胎盘及胎儿附属结构;内细胞群则再分化为内胚层、中胚层和外胚层。内胚层分化发育成胎儿的消化道、呼吸道上皮和腺体、肝、胆、胰;中胚层发育分化成胎儿的结缔组织、血液、肌肉、骨骼、泌尿生殖系统;外胚层则分化发育成胎儿的体表结构和神经系统。1 干细胞的基本概念1.1 定义干细胞为具有自我复制能力、在一定条件下能够分化成各种功能细胞的细胞。1.2 分类1.2.1 全能干细胞 包…     

人睾丸cDNA文库的构建

本研究从人睾丸组织的总RNA中纯化mRNA,并以此为模板,在AMV反转录酶的作用下,制备互补的SS-cDNA。用RNaseH降解模板mRNA,经DNA多聚酶Ⅰ作用,合成ds-cDNA。用T_4DNA多聚酶制备cDNA的平末端,在T_4DNA连接酶的作用下,连接Ecorl接头并与λgt11载体重组连接,以大肠杆菌Y1090做受体菌转染,构建人睾丸cDNA文库。结果表明cDNA文库构建成功,将对生殖和避孕进一步研究发挥重要的作用。     

二维电泳及质谱法分离和鉴定胰腺癌差异表达蛋白质

目的 通过分离并鉴定胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织的差异表达蛋白质,发现可能用于早期诊断的胰腺癌肿瘤标志物.方法 用双向电泳分离胰腺癌、癌旁和人正常胰腺组织的总蛋白质.对胰腺癌组织中明显差异表达的蛋白点,行质谱鉴定和生物信息学分析.并对鉴定出的部分蛋白质行免疫印迹验证.结果 建立了稳定、重复性好的凝胶蛋白图谱.对分离出的在胰腺癌组织中明显差异表达的20个蛋白点,成功鉴定出11个蛋白点,其中高表达的有6个,包括:galectin-1、SLP-2、sorcin、3BP-2、BB1和NCC27.Galectin-1和SLP-2在胰腺癌组织中的高表达通过免疫印迹得到验证.结论 胰腺癌组织相对于癌旁、正常胰腺组织蛋白存在明显的表达差异.胰腺癌差异表达蛋白质可能成为用于早期诊断和评价预后的胰腺癌标志物.     

2例46,XX性发育睾丸疾病报道并文献复习

目的:探讨46,XX性发育睾丸疾病患者的表型、病因病机及其分子生物学特点。方法:对2例46,XX性发育睾丸疾病患者进行病史采集,盆腔B超扫描,染色体核型分析,PCR扩增法检测SRY、YRRM1、DYS240、DAZ基因。结果:两例患者均表现为小睾丸,无精子,第二性征较差。盆腔B超探查未发现女性内生殖器官。两患者染色体核型均为46,XX,且SRY(+),其中1例YRRM1(+)。结论:对性发育异常患者进行染色体核型分析和SRY基因检测,有利于了解该类患者的遗传学病因,为明确诊断和治疗提供科学依据。     

英文医学专业网络资源在组织学与胚胎学教学中的应用

正医学教育尤其是专业课程的双语或全英文教学一直是医学教育专家们所倡导的,教育部早在2001年就颁发了《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的若干意见》,明确提出要在高校积极推动英语等外语进行教学,以培养具有国际竞争力的专业人才。但医学院专业课程无论是全英文还是双语课程教学都长期面临着教学资源、师资、学生能力与意识、语言环境都多方面问题的困扰,实施效果离期望值有较大差距~([1-2])。笔者从2008年起从事南京医科大学留学生全英文组织学胚胎学全英文教育,经历了语言能力不足、国外教材与教学资源短缺、驾驭英文专业课     

无精子症配偶宫颈粘液内的抗精子抗体分析

目的：研究无精子症男子配偶宫颈粘液内的抗精子抗体。方法：应用ELISA方法检测宫颈粘液中的抗精子抗体。结果：400例有精子男子配偶中92例为抗精子抗体阳性（23％），200例无精子症男子配偶中42例为抗精子抗体阳性（21％），两组比较差异不显著。结论：无精子症病人配偶中抗精子抗体的产生可能是精浆中的精子吸附抗原的结果。     

小鼠精子发生过程中差异表达基因LTBP-3的克隆

目的 :筛选与精子发生相关的基因。　方法 :应用改良的mRNA差异显示技术 ,对不同发育期小鼠 (1周龄至 4周龄 )睾丸精曲小管进行差异表达的研究 ,对其中一个在 1周龄小鼠中高表达的cDNA片段进行了克隆和测序分析 ,并与基因文库中的己知序列进行比较。　结果 :发现该片段与小鼠潜在转化生长因子 β结合蛋白 (LTBP 3)基因的部分序列 95 .4%同源。　结论 :LTBP 3基因在小鼠精子发生过程中可能起着重要的调控作用