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51.
目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)参与凝血因子Ⅶa依赖组织因子(TF)激活蛋白酶激活受体2(PAR2),从而促进SW620细胞迁移以及可能的作用机制。方法用蛋白酶激活受体2激动剂(PAR2-AP)、Ⅶa、PKC激动剂佛波醇酯(PMA)等刺激物处理SW620细胞,并用抑制抗体(抗TF、抗PAR2)、同型对照抗体(mopc-21)进行抑制试验。用western blot检测其PKCα与p-PKCα的表达,免疫荧光试验观察PKCα的分布情况;分别用PMA(100 nmol/L)、Ⅶa(10 nmol/L)及PKCα抑制剂(safingol,10μmol/L)处理SW620细胞,Transwell试验观察细胞迁移情况,定量PCR法检测其MMP-9 mRNA表达水平。结果PMA(100 nmol/L),因子Ⅶa(10 nmol/L)及PAR2-AP(100μmol/L)能明显促进PKCα的磷酸化(F=289.9,P<0.05),而对PKCα的表达没有显著性影响(F=2.02,P>0.05);免疫荧光实验结果表明,PKCα自胞浆向核膜与核内发生转位;加入抗TF及抗PAR2抗体能够显著抑制因子Ⅶa对PKCα的激活,而同型对照抗体(mopc-21)没有此作用;Transwell试验与定量PCR结果表明,PKCα抑制剂明显阻断因子Ⅶa对细胞迁移及MMP-9表达的促进作用。结论因子Ⅶa依赖TF活化PAR2,经信号分子PKCα介导,上调SW620细胞MMP-9表达,促进细胞的迁移。 相似文献
52.
54.
目的 检测人胰腺癌组织中DNA甲基化转移酶3b( DNMT3b)的表达,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性.方法 应用蛋白质印迹法检测12例配对人胰腺癌和癌旁组织中DNMT3b的表达;免疫组织化学法检测59例胰腺癌组织中DNMT3b的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的相关性结果 蛋白质印迹法结果显示,胰腺癌及癌旁组织DNMT3b蛋白表达量分别为0.69 ±0.13和0.14 ±0.03,癌组织的表达量明显高于癌旁组织(t=4.464,P<0.05).免疫组化结果显示,胰腺癌组织DNMT3b阳性高表达率为59%,癌旁组织阴性表达.肿瘤组织DNMT3b表达强度与TNM分期和淋巴结转移相关.结论 DNMT3b在胰腺癌组织中高表达,其表达与肿瘤的恶性生物行为有关. 相似文献
55.
56.
57.
58.
目的 探讨TDGF-1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1侵袭力的影响.方法 设计并合成3个(S1、S2、S3)靶向TDGF-1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出沉默效果最好的siRNA.以该siRNA的不同浓度(3.125、6.25、12.5 nmol/L)转染PANC1细胞,并设对照组和脂质体组.采用实时定量PCR和Western blotting检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达,以软琼脂集落培养试验和Boyden小室检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,并将转染48 h的细胞接种裸鼠,观察癌细胞的体内侵袭.结果 siRNA转染组细胞的TDGF-1 mRNA和蛋白表达水平呈浓度和时间依赖性下降,且较脂质体组明显降低(P值均<0.01).对照组细胞集落形成数和穿膜细胞数分别为19.8±2.2和49.8±2.6;siRNA组呈浓度依赖性明显减少,12.5 nmol/L转染组分别为5.6±1.2和8.1±1.1.对照组、脂质体组和12.5 nmol/L转染组接种4周后裸鼠种植瘤体积分别为(2.228±0.026)cm3、(2.186±0.028)cm3和(0.728±0.023)cm3.对照组和脂质体组种植瘤侵犯周围肌层组织,转染细胞组未见侵犯.结论 采用RNA干扰技术沉默PANC 1细胞的TDGF-1基因表达可抑制癌细胞的侵袭力. 相似文献
59.
目的 评价异长春花碱单药化疗对高龄晚期非小细胞肺癌患者生活质量的影响及其耐受性。方法 治疗 75岁以上高龄晚期非小细胞肺癌 38例。治疗组 2 0例予以异长春花碱 (NVB) 2 5mg/m2 第 1,8天 ,2 8天为一疗程 ;对照组 18例辅以最佳的支持治疗(BSC)。结果 治疗组有效率 2 0 %,对照组有效率 0。结论 对高龄晚期非小细胞肺癌患者 ,异长春花碱单药化疗较支持治疗有更好的疗效和生活质量 ,更长的生存期 ,且毒副作用轻微 ,可以耐受。 相似文献
60.
双氯酚酸钠抑制环氧化酶-2对角膜新生血管调控作用的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨双氯酚酸钠抑制环氧化酶-2从而调控角膜新生血管的作用。方法建立化学伤后角膜新生血管动物模型,随机分为双氧酚酸钠组和生理盐水组,计算两组各个阶段新生血管面积;应用免疫组织化学染色方法检测COX-2在角膜各层中的分布,测定积分光密度确定表达的蛋白量。结果正常SD大鼠角膜中表达极低的COX-2蛋白;各个时段实验组的血管生长速度和面积均小于对照组(P<0.05);各个时段实验组COX-2表达低于对照组(P<0.01),差异均具有统计学意义;各组内COX-2表达和角膜新生血管生成呈显著正相关(P<0.05)。结论双氯酚酸钠可以抑制碱烧伤后角膜COX-2的表达,从而调控角膜修复和炎症性新生血管生成过程。 相似文献