抗人c-erbB2单克隆抗体的制备及其特异性鉴定

目的:制备小鼠抗人c-erbB2mAb,并进行特异性鉴定。方法:应用计算机软件分析人源c-erbB2抗原表位,人工合成羧基端含优势表位的13肽,与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后,免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次经HAT选择培养、间接ELISA法、克隆化和免疫组化染色法筛选出稳定分泌抗天然人源c-erbB2mAb的杂交瘤细胞株。用交叉反应试验和阻断试验检测mAb的特异性。结果:获得1株可稳定分泌抗天然人源c-erbB2抗体的杂交瘤细胞株。该mAb与已知的c erbB2抗原阳性的乳腺癌标本起反应;与其他不表达c-erbB2分子的细胞不起反应。用合成的13肽阻断后,失去与c-erbB2抗原的反应性。结论:用合成的13肽作为免疫原成功地制备出1株抗c-erbB2的mAb。     

留置尿管中尿路感染的监测、分析和对策

监测、预防和控制留置尿管致尿路感染是当今摆在医护人员面前的一项艰巨复杂而又细致的工作。随着医学科学的发展 ,医院的管理水平、业务水平、思想认识已有大幅度提高 ,对留置尿管技术的应用在消毒隔离、无菌技术及防止感染的措施上提出了更高的要求。由于这是一项侵袭性操作 ,常可导致皮肤粘膜的损伤或因护理上无菌技术不严格而引起感染。我院对内科 2 5 6例留置尿管患者进行监测 ,结果总结如下。1　临床资料1.1　一般资料 :2 5 6例患者中 ,男 16 2例 ,女 94例 ;平均年龄 72岁 ;中风昏迷 10 6例 ,前列腺肥大 32例 ,尿失禁 5 0例 ,其他病种…     

肿瘤免疫研究进展——肿瘤配型抗原研究

本文简要回顾了近期肿瘤免疫研究进展。根据免疫学理论,提出“肿瘤配型抗原”研究,并通过作者及其研究室所完成的工作,阐述该设想成立的科学依据及展望。肿瘤配型抗原研究课题的提出,可望为肿瘤学的研究开拓一个新的领域,建立起一套检测、诊断和治疗人类肿瘤新的免疫学方法。     

重症监护病房感染控制措施

重症监护病房(ICU)是集中危重症患者病情检测和治疗的单位,也是医院易感染人群和感染因素集中的场所,其感染发生的概率均比其他科室高。为了降低ICU的医院感染发生率,现提出相应控制感染的护理措施。1布局与环境ICU应设在环境清洁、相对独立的区域,建筑材料与手术室相似、便于清扫、消毒。专科ICU应设在科室最清洁、人员流动最少的位置。进入ICU先经过缓冲间,并备有更衣和更鞋柜、浴室。为了保护手的清洁和消毒,洗手的设备尤为重要,是保证洗手后不在污染的重要因素。洗手池必须数量充足,位置合理,便于使用,水龙头最好用感应或肘、脚、…     

链霉菌L-183发酵条件优化

目的 对链霉菌L-183生产链霉亲和素(streptavidin,SA)的发酵条件进行优化.方法 通过单因子和正交实验,获得SA发酵培养基的最佳配方比.结果 在优化条件下,SA的产量达到151.5 mg/L.与先前报道相比,产量提高36.5%,且成本降低,操作步骤更为简化.结论 链霉菌L-183生产链霉亲和素的发酵条件优化为规模化生产奠定了基础.     

病灶切除联合冷凝及羊膜覆盖手术治疗重症真菌性角膜溃疡

目的观察病灶切除联合冷凝及羊膜覆盖手术治疗重症真菌性角膜溃疡的效果。方法手术治疗真菌性角膜溃疡17例（17眼）,病程20d～3个月。溃疡面积〈5mm者3例,≥5mm者14例,溃疡深达角膜实质层1／3～1／2角膜厚度,有9例伴有前房积脓。所有病例均经角膜涂片或培养查到真菌。术后随访时间3～12个月。结果11例术后炎症控制,角膜创面清洁,1个月内逐渐愈合。6例炎症未被控制,前房积脓不见吸收,或吸收后复又出现,最后行穿透性角膜移植术。羊膜一般于1周后逐渐融解。溃疡愈合者大多保留了一定的视力：数指／30cm～0．2。结论对于药物治疗未能控制、病情继续恶化的重症真菌性角膜溃疡,及时联合手术治疗,可促进溃疡愈合,保存眼球完整性,为角膜移植提供机会。因各种原因暂不能行角膜移植的情况下,病灶切除联合冷凝及羊膜覆盖不失为一种较为有效的方法。     

人黑色素瘤抗原MAGE-3 肿瘤疫苗的构建及其诱导HLA-A *0201 转基因小鼠CTL活性的观察

 目的 通过基因工程的方法获得人黑色素瘤抗原MAGE-3的DNA和蛋白疫苗，并观察其对HLA-A＊0201转基因小鼠的CTL活性的影响。方法 用RT-PCR的方法，从人黑色素瘤细胞株A375中扩增MAGE-3的cDNA片段，分别将其插入到pcDNA3．1／v5-His真核扣pET32a原核表达载体。将pcDNA-MAGE-3转染B16肿瘤细胞观察其是否能在真核细胞中表达；将pET32a-MAGE-3转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导，SDS-PAGE观察融合蛋白表达情况。并用镍柱亲和层析的方法纯化融合蛋白。然后，采用DNA疫苗初次免疫和蛋白疫苗加强的策略免疫HL-A＊0201转基因小鼠，LDH方法检测CTL活性。结果 酶切结果证实，成功地构建了pcDNA-MAGE-3真核表达载体和pET32a-MAGE-3原核表达载体，并在真核细胞B16和原核细胞大肠杆菌中获稳定表达，原核表达产物为融合蛋白且分布于包涵体。用DNA疫苗进行初次免疫，镍柱纯化的融合蛋白加强免疫后，可成功地诱导HL-A＊0201转基因小鼠CTL活性。结论 成功地获得了MAGE-3肿瘤抗原，为进一步完善MAGE-3肿瘤疫苗打下了基础。     

学会用拐杖

人到了老年有时要用三条腿走路．意思是要用拐杖支撑才能完成日常行走。这一斯芬克斯之谜虽然有了答案,但如何正确地使用拐杖还有层层的谜底。     

大豆低聚糖对高脂大鼠脂质过氧化的影响

大豆低聚糖对实验性大鼠高脂血症的防治研究结果证明：能降低血清总胆固醇（ＴＣ）（Ｐ＜０．０５），提高血清高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）（Ｐ＜０．００１），提高ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ比值（Ｐ＜０．００１），降低血清甘油三酯（ＴＧ）水平（Ｐ＜０．００１）；降低心肌组织过氧化脂质（ＬＰＯ）水平（Ｐ＜０．０１），提高心肌组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性（Ｐ＜０．０１），有抑制脑组织过氧化损伤的趋势。结果提示：大豆低聚糖具有降低高脂大鼠血脂水平，拮抗过氧化损伤的作用。     

pAFP-P53-EGFP靶向诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡

目的研究pAFP-P53-EGFP对AFP阳性肝癌细胞的靶向促凋亡作用。方法将SD大鼠AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2kb的AFP基因调控序列,导入pEGFP-N1质粒的启动子处,构建pAFP-EGFP同时引入P53基因片段,构建pAFP-P53-EGFP重组质粒。转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,流式细胞术分析各细胞凋亡情况。分别将质粒pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP转染HepG2细胞进行DNA ladder分析及电镜观察细胞超微结构。结果 pAFP-P53-EGFP重组质粒转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,各组细胞凋亡率分别为:HepG2组%gate=2.65±0.08;HeLa组%gate=0.42±0.025;SMMC7721组%gate=0.39±0.018。AFP阳性的HepG2细胞凋亡率明显高于SMMC7721、HeLa细胞(P<0.05)。且转染pAFP-P53-EGFP质粒的HepG2细胞出现明显的DNA ladder,细胞超微结构亦显示出现凋亡。结论 pAFP-P53-EGFP可以在AFP阳性细胞中相对专一表达,且pAFP-P53-EGFP可通过诱导细胞凋亡从而达到抑制肿瘤作用。