腹水中外来体的提取及形态特征观察

目的：从卵巢癌患者的腹水中获得外来体（exosome）．方法：通过低速离心、高速离心、超滤及超高速离心等，从5例卵巢癌患者的腹水中分离外来体，用透射电子显微镜观察其形态特征、结果：5例卵巢癌患者的腹水中均存在外来体，电镜下观察呈椭圆形或圆形囊泡，直径为30～90nm，具有完整的细胞膜．结论：用离心的方法可从卵巢癌患者的腹水中提取外来体，为卵巢癌的治疗开辟了一种新的途径．     

激素替代治疗与植物雌激素治疗对围绝经期综合征患者的疗效比较

目的:探讨绝经前和绝经后患者应用激素替代治疗(HRT)和植物雌激素(PE)治疗对围绝经期综合征的疗效,以期提高围绝经期患者生活质量. 方法:采用前瞻性研究,绝经前患者102例,绝经后患者76例. 其中HRT组106例、PE组72例. 观察患者在用药前、用药3 mo后的围绝经期症状及血脂变化,并观察两种治疗方法的副作用. 结果:两组患者的围绝经期症状均有明显减轻,但PE的作用明显次于HRT (P<0.05);HRT组中患者血脂中低密度脂蛋白较用药前明显下降(P<0.05),高密度脂蛋白较用药前明显升高(P<0.05);而PE组中患者血脂波谱无明显改变;治疗过程中所引起的副作用HRT组明显高于PE组(P<0.05). 结论:HRT和PE均能明显减轻患者的围绝经期症状,HRT能改善血脂波谱状态,而PE能减少患者因服药带来的副作用.     

多囊卵巢综合征患者促排卵周期血清AMH水平的变化

月经周期2—3d及注射绒促性素（hCG）日抽取35例多囊卵巢综合征（PCOS）患者空腹静脉血,检测抗苗勒氏管激素（AMH）、雌激素（E）及雄激素（T）水平,分析促排卵周期中AMH水平的变化及与其他指标的关系。选择25例健康妇女作正常对照。发现PCOS患者注射hCG日血清AMH水平明显高于月经周期2—3d,PCOS患者AMH与T水平呈正相关,而与E无相关性。认为PCOS患者促排卵周期血清AMH水平显著增加。     

Rho和ROCK蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨上皮性卵巢癌Rho和ROCK蛋白的表达及其与上皮性卵巢癌进展之间的关系。方法应用Western blot方法,观察了66例上皮性卵巢癌和22例正常卵巢组织Rho和ROCK蛋白的表达,并分析Rho/ROCK蛋白表达与生存期的关系。结果RhoA、C和ROCK蛋白在卵巢癌组织中表达增加,且在伴有肿瘤转移的淋巴组织中表达高于没有肿瘤转移的淋巴组织(P<0.05)。RhoA、C和ROCK间的表达呈正相关(P<0.05),RhoA、C和ROCK的表达与肿瘤分化、淋巴转移和短综合生存期相关(P<0.05)。多变量分析显示,只有RhoC是影响生存的独立因素(P<0.05)。RhoA和C是影响综合生存期的因素(P<0.05)。结论在上皮性卵巢癌中,RhoA、C和ROCK蛋白高表达,Rho/ROCK通路可能参与了上皮性卵巢癌的进展。     

SDF－1α通过 p38MAPK－HIF－1α通路加强卵巢癌细胞转移的机制探讨

目的：明确缺氧诱导因子－lα（ HIF－1α）在基质细胞衍生因子－1α（ SDF－1α）调控的卵巢癌细胞迁移中的作用及其机制。方法采用免疫组化分析HIF－1α在卵巢癌组织中的表达水平;将HIF－1αsiRNA转染SKOV3卵巢癌细胞,分别用SDF－1α和SDF－1α＋SB203580处理,用RT－PCR及western blotting分析HIF－1α、p38MAPK的表达水平。结果免疫组化分析表明,HIF－1α在卵巢癌组织中高表达,同时SDF－1α可明显诱导HIF－1α的mRNA及蛋白水平的表达;当用HIF－1αsiRNA转染后,细胞中HIF－1α的表达水平明显下降。当用通路抑制剂SB203580处理后,SDF－1α诱导的HIF－1α水平明显降低。结论 SDF－1α可通过p38MAPK－HIF－1α通路来调控卵巢癌细胞的迁移。因此,该研究将为卵巢癌的防治提供新的研究方向。     

卵巢癌患者exosomes来源初探

目的:同一晚期卵巢癌患者,对组织来源和腹水来源的exosomes进行方法和数量的比较,探讨获得卵巢癌患者exosomes的最佳途径.方法:收集晚期卵巢癌患者卵巢癌组织,分离癌细胞进行培养,留上清液,取同一患者的腹水,通过超速离心和超滤等方法提取上清液及腹水中的exosomes,电镜下检测;Western Blot测定exosomes 上HSP70, HSP90, MHCⅠ类分子和MHCⅡ类分子的表达;用BCA蛋白测定法测定exosomes的蛋白浓度,计算蛋白总含量.结果:腹水离心时间比上清液离心时间长,所有细胞培养上清液和癌细胞阳性的腹水均能分离出exosomes,癌细胞阴性的腹水中未分离出exosomes;两种来源的exosomes共同表达MHCⅠ类分子、HSP70和HSP90,均不表达MHCⅡ类分子,腹水中分离出来的exosomes蛋白含量比细胞培养上清液的含量高(P＜0.05).结论:腹水中癌细胞阳性的患者,腹水是exosomes的比较理想的来源;无腹水或腹水中癌细胞阴性的患者,exosomes可来源于卵巢癌组织.     

Fas/FasL系统在人子宫内膜增生过长和子宫内膜癌中的表达

目的：探讨Fas和Fas配体（FasL）在人子宫内膜增生过长和子宫内膜癌发病中的作用．方法：采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶染色法（SP法）检测加例子宫内膜增生过长的异位内膜与18例子宫内膜癌内膜中Fas和FasL蛋白的表达;采用原位杂交方法检测FasLmRNA水平．设正常子宫内膜25例为对照组．结果：Fas蛋白在正常子宫内膜的阳性表达率为68％,在子宫内膜增生过长与子宫内膜癌组的阳性表达率分别为58％和22％,差异具有统计学意义（P〈0．05）．FasL蛋白在子宫内膜增生过长与子宫内膜癌组中的阳性表达率分别为68％和94％,明显高于对照组32％,差异具有统计学意义（P〈0．05）．FasLmRNA的表达强度在子宫内膜增生过长与子宫内膜癌组亦明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）．结论：Fas与FasL蛋白表达失调,可能是子宫内膜增生过长的发病机制之一,对子宫内膜癌组织逃避免疫系统监视具有重要作用．     

E-钙黏附素及β-连环蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的: 研究上皮性卵巢癌组织中E-钙黏附素(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)表达情况,探讨其表达与上皮性卵巢癌生物学行为的关系. 方法: 应用免疫组化方法,检测38例正常卵巢组织和80例上皮性卵巢癌组织中E-cadherin及β-catenin蛋白表达的情况,并结合卵巢癌的病理分级、淋巴结转移情况和临床分期对其表达进行分类和统计分析. 结果: 相对于正常卵巢组织,E-cadherin在上皮性卵巢癌组织中表达明显降低(P<0.05),且随细胞分化程度降低而减少(P<0.05),随临床分期的增加而降低(P<0.05),伴有区域性淋巴结转移者,E-cadherin表达明显降低(P<0.05);β-catenin在上皮性卵巢癌组织中表达明显增高(P<0.05),其表达量随临床分期的增加而增加(P<0.05),伴有区域性淋巴结转移者其表达增高(P<0.05),与细胞分化程度无关(P>0.05). 结论: E-cadherin的表达降低及β-catenin的表达增高与上皮性卵巢癌的生物学行为密切相关;两者在上皮性卵巢癌组织中的表达呈负相关;E-cadherin及β-catenin表达水平的高低可作为判断上皮性卵巢恶性肿瘤患者预后的指标.     

腹水中外来体的提取及形态特征观察

目的:从卵巢癌患者的腹水中获得外来体(exosome)。方法:通过低速离心、高速离心、超滤及超高速离心等,从5例卵巢癌患者的腹水中分离外来体,用透射电子显微镜观察其形态特征。结果:5例卵巢癌患者的腹水中均存在外来体,电镜下观察呈椭圆形或圆形囊泡,直径为30~90nm,具有完整的细胞膜。结论:用离心的方法可从卵巢癌患者的腹水中提取外来体,为卵巢癌的治疗开辟了一种新的途径。     

人工流产术对患者心理健康的影响及其防护

目的: 研究人工流产术患者的心理健康状况及咨询的作用. 方法: 采用症状自评量表(SCL-90)及自编问卷等测评了门诊人工流产患者100例,分为对照组和咨询组,每组50人,且两组中已婚和未婚各25人. 咨询组在术前、术中给以咨询、心理安慰. 结果: ①与中国正常人SCL-90常模比较, 人工流产患者躯体化、恐怖、抑郁因子分明显高于常模(P<0.01),焦虑因子分也高于常模(P<0.05);②除躯体化因子外,其他因子未婚人工流产者均明显高于已婚流产者,具有显著统计学差异(P<0.05);③自编问卷调查显示,对照组人工流产心理创伤较重,精神压力较大,明显高于咨询组(P<0.05);④咨询组已婚者较未婚者疼痛程度明显减轻(P<0.05) ,其中未婚者家人的指责是导致其严重心理创伤的重要原因之一. 结论: 切实做好人工流产者的术前、术后咨询安慰工作,尤其是减轻未婚怀孕者心理压力问题,可以有效地减轻患者的痛苦,预防术后不良心理反应及心理健康问题.