H5N1甲型流感病毒H5血凝素蛋白的分子特征分析

通过比较不同来源的H5N1甲型流感病毒H5血凝素蛋白生物信息学,分析H5N1甲型流感病毒H5血凝素蛋白的分子特征。方法 从Gene Bank基因数据库中获取15株H5N1甲型流感病毒H5血凝素蛋白的核苷酸和氨基酸序列,采用在线软件SignalP4.1预测信号肽,运用Clustal X,Bioedit等国际通用软件进行氨基酸和核苷酸的序列比对,计算核苷酸及氨基酸的同源性。在线软件Antheprot分析二级结构。结果 15株H5血凝素蛋白编码框架长约1707bp(8株)/1704bp(7株),编码含568个/567个氨基酸组成的多肽。H5血凝素氨基酸同源性为86.7%~99.2%,核苷酸同源性为85.6%~99.5%,H5血凝素蛋白富含潜在α螺旋(29%~35%)、β折叠(22%~25%)和卷曲结构(22%~25%)等二级结构。H5血凝素蛋白aa1-aa16区域为潜在信号肽,血凝素蛋白A1和A2裂解序列为aa323-aa333之间的RERRRKKR↓GLF序列,切割位点位于R330和G331之间;H5血凝素蛋白A1亚单位存在4个高变区,分别是aa115-aa140(52.0%)、aa151-aa170(57.9%)、aa183-aa200(64.7%)和aa263-aa280(47.4%)。但参与二硫键形成的10个半胱氨酸位点均未发生变异;构成受体结合域的E186、K212、S217-K218、G221-Q222-S223-G224等位点较保守;构成T细胞和B细胞表位aa141-155、aa206-223和aa302-316等区域较保守。结论 H5N1甲型流感病毒H5血凝素蛋白的受体结合域和免疫表位等重要功能结构域的序列比较保守稳定,在A1和A2裂解位点含高致病禽流感病毒分子特征相关的连续6个碱性氨基酸(R/K)序列。     

血清碱性磷酸酶水平与急性轻型缺血性脑卒中患者住院期间神经功能恶化的关系研究

背景 轻型缺血性脑卒中(MIS)症状轻微,但可严重影响患者生活质量或引发不良预后.血清碱性磷酸酶(ALP)与脑卒中患者早期神经功能缺损相关,但既往研究多侧重于探讨脑卒中后72 h神经功能恶化,血清ALP水平与MIS患者住院期间神经功能恶化的关系尚不明确.目的 探讨血清ALP水平与急性MIS患者住院期间神经功能恶化的关系...     

癌症患者配偶照护负担的研究进展

我国每年新增癌症患者近200万,并且发病率有逐年上升趋势,癌症已经成为严重威胁人类健康的多发病和常见病.随着医学科学的发展,治疗手段不断进步,患者的生存时间延长.癌症患者从诊断到治疗的漫长过程,给患者带来痛苦的同时,其家庭主要成员--配偶同样承受着心理应激[1].他们照顾并陪伴患者诊治,获取治疗信息、参与治疗计划,同时还要支付医疗费用、维持家庭生活,又不能放弃工作与学习,在身体、心理、经济等方面承受着巨大的压力负担[2].     

多维度认知教育对慢性乙型肝炎患者自我管理及家属心理负担的影响

目的：探讨多维度认知教育对慢性乙型肝炎患者自我管理及家属心理负担的影响。方法：以随机抽样法选取2020年1月1日～2021年1月31日收治的100例慢性乙型肝炎患者及家属为研究对象,根据抽签法分为对照组和研究组各50例,两组均给予常规护理干预,对照组采用常规健康教育,研究组采用多维度认知教育;比较两组干预前后患者自我管理能力、遵医行为,家属心理负担[采用症状自评量表(SCL-90)]。结果：干预后,两组患者自我管理能力评分高于干预前(P<0.05),且研究组高于对照组(P<0.01);研究组患者遵医依从率高于对照组(P<0.01);干预后,两组家属SCL-90评分低于干预前(P<0.05),且研究组高于对照组(P<0.01)。结论：多维度认知教育可提高慢性乙型肝炎患者自我管理能力及遵医行为,减轻家属心理负担。     

肠道病毒71型微复制子的构建

目的 构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系,研究微复制子的复制及表达情况。方法 聚合酶链式反应扩增绿色荧光蛋白(EGFP),利用特定酶切位点及连接酶,将目的基因片段连接至pMD19-T载体,分别构建EV71非结构蛋白及EV71 3C蛋白酶微复制子体系。荧光显微镜下观察微复制子表达情况,实时荧光定量PCR观察微复制子复制情况。结果 EV71非结构蛋白微复制子及EV71 3C蛋白酶微复制子表达后,均可观察到特异性绿色荧光,荧光强度有明显差异;转染后12~72 h取样所测RNA含量几乎不变。结论 非结构蛋白全长及3C蛋白酶启动微复制子转录强度不同,所构建微复制子不具备复制功能,提示结构蛋白编码区对病毒RNA复制有重要意义。     

MTT试验检测EV71 2A蛋白对宿主细胞损伤作用

目的在Vero细胞、RD细胞和U87细胞3种细胞系中,研究EV71的2A蛋白对宿主细胞增殖能力的影响及对细胞的损伤作用,揭示2A蛋白在EV71的致病机制中所起的作用。方法将野毒株EV71SDLY 107株(强毒株)、EV71SDLY 1株(弱毒株)和嵌合毒株EV71SDLY 107-2A-1感染Vero细胞、RD细胞、U87细胞后,利用MTT试验测定3种细胞在感染病毒后不同时间点的存活情况,绘制细胞生长曲线,比较细胞增殖程度,并利用单因素方差分析法分析3种细胞在感染不同病毒48h后的存活率;结果 EV71SDLY 107株感染Vero细胞和RD细胞后细胞增殖程度和存活率均低于EV71SDLY 1株(t=41.64,P0.001;t=33.28,P0.001);EV71SDLY 107-2A-1嵌合株感染Vero细胞和RD细胞后,细胞增殖程度和存活率均高于亲本病毒EV71SDLY 107株,低于EV71SDLY 1株(t=17.97,P0.001;t=42.09,P0.01);EV71SDLY 107-2A-1株感染U87细胞后细胞存活率低于EV71SDLY 1株(t=8.85,P0.001),但与EV71SDLY 107株感染后细胞存活率无统计学差异(t=0.74,P=0.603);不同细胞感染同株病毒48h后,U87细胞存活率均为最低,Vero细胞存活率均为最高。结论 EV71强毒株的2A蛋白对细胞产生的损伤作用大于弱毒株的2A蛋白,提示2A蛋白在EV71对宿主细胞的作用中发挥功能。     

不同时期H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白的特征比较

目的比较2007—2014年分离的H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白与分离于1934年的H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白的差异性,以了解近几年流行的H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白的变异特征。方法从Genebank的基因数据库中获取16株H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白的核苷酸和氨基酸序列,采用在线软件SignalP4.1预测信号肽,运用Clustal X,Bioedit等国际通用软件进行氨基酸和核苷酸的序列比对,计算核苷酸及氨基酸的同源性。在线软件Antheprot分析二级结构。结果 H1血凝素蛋白编码框架长约1701bp,编码含566个氨基酸组成的多肽。16株H1N1甲型流感病毒H1血凝素氨基酸同源性为92.4%~99.8%,核苷酸同源性为91.8%~99.6%。H1血凝素蛋白aa1-aa17区域为潜在信号肽,血凝素蛋白A1和A2裂解序列为位于aa324-aa330序列IQSR↓GLF。H1血凝素蛋白富含潜在α螺旋(25%~32%)、β折叠(27%~28%)和卷曲结构(23%~26%)等二级结构。2007—2014年的15株病毒的血凝素蛋白A1高变区位于羧基端aa278-aa321,有11个位点变异,变异率高达25%。参与二硫键形成的10个半胱氨酸位点未发生变异,3个受体结合区的氨基酸序列(PKTS、VLVLWAIHH和SRYSKKFK)比较保守,有2个序列出现毒力相关位点D222G突变。结论与1934年的H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白比较,2007—2014年间分离H1N1甲型流感病毒H1血凝素蛋白的重要功能结构域的序列仍保守稳定,但在某些位点出现较高频率的替代变异。     

应用随机森林模型和Logistic回归模型分析COVID-19的影响因素

目的 应用随机森林模型和Logistic回归模型分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)发病的影响因素,为COVID-19防治提供依据.方法 选择2020年1月17日—2月17日浙江省6家医院收治的COVID-19疑似病例为研究对象,通过问卷收集人口学资料、既往基础疾病、流行病学史、临床表现、实验室检测指标和肺部影像学...     

中国卒中报告2019(中文版)(1)

  目的  了解陕西省西安市急性缺血性脑卒中（AIS）患者早期脑卒中相关死亡发生情况及其危险因素,为降低AIS患者发生早期死亡风险提供参考依据。  方法  收集西安市脑卒中数据库平台中西安市4所三级甲等医院2015年1 — 12月连续入院2340例AIS患者的相关临床资料和从入院确诊起90 d随访中发生死亡情况,分析AIS患者早期脑卒中相关死亡发生情况及其相关危险因素。  结果  西安市2340例AIS患者中,发生早期脑卒中相关死亡78例,早期脑卒中相关死亡比例为3.3 %;多因素非条件logistic回归分析结果显示,年龄 ≥ 80岁（OR = 4.487,95 % CI = 1.436～14.011）、神经功能重度损伤（OR = 5.038,95 % CI =1.781～14.244）、合并肺炎（OR = 3.358,95 % CI = 1.679～6.713）、碱性磷酸酶水平较高（OR = 1.007,95 % CI = 1.002～1.012）和白细胞计数水平较高（OR = 1.128,95 % CI = 1.041～1.223）是西安市AIS患者发生早期脑卒中相关死亡的主要危险因素。  结论  西安市AIS患者发生早期脑卒中相关死亡的比例相对较低,高龄、神经功能重度损伤、合并肺炎、碱性磷酸酶和白细胞计数水平较高的AIS患者更易发生早期脑卒中相关死亡。