HSV-TK/GCV系统体外对膀胱癌细胞的旁观杀伤作用

目的 探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV－TK）基因联合羟基无环鸟苷（GCV）对膀胱癌细胞的旁观杀作作用及其机制。方法 将转染HSV－TK基因的膀胱癌细胞（BIU 87－TK）分别与人膀胱癌细胞（BIU 87、T 24）和鼠膀胱癌细胞（T 739）混合培养。在GCV作用下,观测细胞的存活情况及BIU 87－TK条件培养液和细胞死亡裂解对共培养细胞的影响。结果 当BIU 87－TK细胞占50％时,共培养细胞对GCV的敏感性与100％ BIU 87－TK细胞一致。表明每个表达HSV－TK基因的细胞能杀死至少一个不含HSV－TK基因的膀胱癌细胞。BIU 87－TK细胞的条件培养液对BIU 87亲本细胞的生长无影响。G 418诱导的细胞裂解与对其共培养的BIU 87－TK细胞无旁观毒性作用。结论 HSV－TK／GCV对膀胱癌细胞产生的“旁观者”效应是该系统特异性的毒性作用。“旁观者”效应不仅可在人膀胱癌不同细胞株之间产生,而且不局限于某一种属的膀胱癌细胞之间。     

Ⅲ型前列腺炎患者前列腺液中纳米细菌的培养和形态学鉴定

目的 探索纳米细菌在Ⅲ型前列腺炎(CPPS)患者前列腺液中的分布情况和微生物学特性及其在Ⅲ型前列腺炎发病中的意义. 方法门诊根据病史、尿常规细菌培养、前列腺液常规镜检结果筛选出CPPS患者100例作为试验对象,年龄26～48岁,平均36岁;选择100例健康成年男性作为正常对照组,年龄21～46岁,平均32岁.按照Mearea-Stamey法收集前列腺液,细胞培养方法进行纳米细菌培养,观察其生长情况;单克隆抗体间接免疫荧光染色进行纳米细菌鉴定,并在透射电镜下观察其形态特征.结果 CPPS患者前列腺液标本中发现纳米细菌生长43例,正常对照组仅5例,2组纳米细菌阳性率比较差异有统计学意义(X2=39.58,P＜0.01);透射电镜下观察,纳米细菌呈球状或球棒状,大小100～500 nm,绝大多数聚集成簇,菌体周围有一层黑色物质包绕,并有羟基磷灰石分布.结论 纳米细菌与Ⅲ型前列腺炎发病密切相关.     

细胞周期蛋白E在瘢痕疙瘩不同区域中的表达及意义

目的探讨细胞周期蛋白E在瘢痕疙瘩形成过程中的作用及意义。方法应用免疫组织化学链霉亲和素-过氧化物酶（SP）法检测瘢痕疙瘩不同区域和正常皮肤组织成纤维细胞（fibro-blast,FB）中细胞周期蛋白E的表达。结果在瘢痕疙瘩周边部FB中存在细胞周期蛋白E的高表达;而在瘢痕疙瘩中央部阳性表达的FB数量少,8例标本FB中细胞周期蛋白E表达阴性。正常皮肤FB中细胞周期蛋白E表达阴性。经统计学处理,周边部与正常皮肤组及中央部比较,差异有统计学意义（P〈0.01及P〈0.05）;中央部与正常皮肤（NS）组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论细胞周期蛋白E在瘢痕疙瘩周边部FB中的高表达,不仅可能促进了瘢痕疙瘩的形成,并可能是瘢痕疙瘩侵犯周围正常组织,呈浸润性生长的原因之一。     

动脉粥样硬化性肾动脉狭窄中医证候初探

目的：通过对动脉粥样硬化性肾动脉狭窄（ARAS）患者中医证候调查,探讨ARAS患者证候分布特点其与临床指标之间的关系。方法：采用横断面调查,对符合纳入标准的60例ARAS患者进行中医虚损和邪实证候评分;所有病例采集人口学、病史及各种临床资料,包括：一般资料、血压、生化指标、超声、肾小球滤过率等临床指标;分析各项临床指标与虚损证和邪实证积分之间的关系。资料相关分析采用Spearman Correlation,组间比较采用秩和检验。结果：（1）ARAS患者虚损证以脾肾气虚最为多见,邪实则为多湿多瘀;（2）ARAS患者虚损证积分与邪实证积分之间呈正相关关系;（3）病变累及单侧肾动脉与双侧者中医证候方面差异无统计学意义。结论：ARAS患者其病机特点为本虚标实,多见脾肾气虚,挟湿挟瘀证。     

医原性输尿管膀胱损伤诊治分析

目的 探讨医原性输尿管膀胱损伤发生原因及防治方法.方法 医原性输尿管膀胱损伤患者47例,男7例,女40例.其中妇产科手术损伤38例、泌尿外科5例、普外科4例. 结果 术中发现输尿管损伤16例,其中断裂14例,输尿管壁部分撕裂伤2例;行输尿管断端吻合术13例,肾盂输尿管吻合术1例,1例输尿管镜手术引起输尿管穿孔者予终止手术并留置双J管,1例被迫切除肾脏;术后3～7 d发现输尿管损伤7例,其中输尿管下段被结扎4例.输尿管阴道瘘3例,均于术后2周内行输尿管下段膀胱再植术.术中发现膀胱损伤19例,膀胱壁不规则撕裂长约1～3 cm;行膀胱修补术17例,由腔镜和TVT手术引起膀胱穿孔2例予留置导尿1周;术后1周～1个月发现膀胱阴道瘘5例,均于3个月后行瘘管切除修补术.术后47例随访5个月～11年,平均47个月,患者均治愈,无并发症. 结论 医原性损伤重在预防,术中及时发现、正确处理可避免二次手术;术后出现尿瘘者选择合理治疗方案可提高治愈率.     

腺苷后处理对大鼠心肌缺血再灌注时血清IL-10和TNF-α浓度的影响

目的 探讨腺苷后处理对大鼠心肌缺血再灌注时血清IL-10和TNF-α浓度的影响.方法 雄性SD大鼠24只,体重180～250 g,随机分为4组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IP组)和腺苷后处理组(AP组).IR组、IP组和AP组结扎冠状动脉左前降支30 min后恢复再灌注.IP组缺血30 min时进行再灌注30 s缺血30 s,循环3次,然后再灌注120 min;AP组缺血30 min时静脉输注腺苷40 μg·kg-1·min-1,剂量1.5 mg/kg,然后再灌注120 min.于缺血前(基础状态)、缺血30 min、再灌注30、120 min时记录HR、SP和DP.再灌注120 min时采集动脉血样,测定血清IL-10和TNF-α的浓度.采集血样后,取心肌组织,测定MDA含量及心肌梗死面积,光镜下观察心肌病理学结果.结果 与S组比较,IR组HR、SP和DP降低,IP组和AP组SP降低,IR组、IP组和AP组血清IL-10、TNF-α浓度和心肌MDA含量升高,心肌梗死面积增加(P<0.05);与IR组比较,IP组和AP组HR、SP和DP升高,血清TNF-α浓度和心肌MDA含量降低,心肌梗死面积减小,血清IL-10浓度升高(P<0.05);IP组和AP组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).IP组和AP组心肌病理学损伤程度轻于IR组.结论 腺苷后处理可促进IL-10生成,抑制TNF-α生成,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

噬菌体基因组PaP1的鸟枪法测序及其生物信息学分析

目的对分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP1进行全基因组测序，并进行初步的生物信息学分析，为噬菌体的改造及其治疗奠定基础。方法采用鸟枪法随机测序和重叠群组装的策略对PaP1进行基因组测序，并通过EditSeq、开放读码框架（ORF）finder、GeneMark^TM、BPROM、FindTerm、Palindromes、Equicktandem及FAStRNA等软件对所获得的基因组序列的一般特征、蛋白质同源性序列及tRNA基因等进行分析和预测。结果PaP1基因组约为90000bp，其中最大重叠群为28249bp。在已获得序列中预测出120个ORFs、41个推定基因及9个簇集在5’末端的tRNA基因。在41个推定基因中，预测出编码DNA末端酶大亚单位、DNA解旋酶B亚单位、肽聚糖结合蛋白及3个尾丝蛋白等6个基因的功能。结论鸟枪法只能测出噬菌体基因组PaP1的部分序列，重复序列的存在是该基因组测序困难的原因。     

妊娠对大鼠吸入性全麻药血/气分配系数和组织/气分配系数的影响

目的 观察妊娠对大鼠吸人性全麻药血，气分配系数及组织，气分配系数的影响。方法 健康成年（3月龄）雌性妊娠（妊娠18—22d）和非妊娠SD大鼠各10只，分别为妊娠组和非妊娠组。腹腔注射戊巴比妥钠40mg／kg麻醉，经腹主动脉抽血用于测血，气分配系数，放血处死后，分别取心、肝、肾及脑组织并制成匀浆，采用注射器顶空二次平衡法经气相色谱仪测定七氟醚、异氟醚和氟烷的血，气分配系数及组织，气分配系数。结果与非妊娠组相比，妊娠组氟烷的血，气分配系数和脑，气分配系数降低（P〈0．05），七氟醚、异氟醚的血，气分配系数、肝，气分配系数、肾，气分配系数、心，气分配系数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 妊娠降低大鼠氟烷的血，气配系数和脑，气分配系数，但不影响七氟醚和异氟醚的血，气分配系数和组织，气分配系数。     

三磷酸腺苷结合盒转运体成员2在人脑胶质瘤中的表达及其与神经巢蛋白表达的关系

目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运体成员2(ABCG2)在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤分级和神经巢蛋白(nestin)表达的关系.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测ABCG2在52例不同病理级别胶质瘤中的mRNA表达;免疫组织化学SABC法检测ABCG2和nestin的蛋白表达.结果 ABCG2在脑胶质瘤中的mRNA表达与正常脑组织比较呈过表达(P<0.05),且随着病理级别的升高而增加(P<0.05);免疫组织化学显示ABCG2在52例胶质瘤中的阳性表达率为32.7%(17/52),并与病理级别明显相关(x2=4.62,P<0.05),主要呈亲血管分布;ABCG2的表达与nestin的表达明显相关(x2=7.60,P<0.05).结论 ABCG2在人脑胶质瘤中的表达随着病理级别的升高而逐渐增加,且与nestin的表达呈正相关;脑肿瘤干细胞可能与神经干细胞具有一定的同源性.     

CO2气腹对胃癌细胞周期及细胞周期蛋白的影响

目的 通过检测不同压力CO2气腹环境下胃癌细胞周期及其相关蛋白表达的变化,探讨CO2气腹对胃癌细胞生长增殖的影响.方法 将胃癌MKN-45细胞置于0、10、12和15 mm Hg CO2气腹环境下培养4 h,然后用流式细胞法检测胃癌细胞周期的变化,再用Western blot方法检测细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4、Rb和pRb的表达,最后用免疫沉淀法检测细胞Cyclin D1/CDK4结合力.结果 0、10、12 mm Hg CO2气腹组胃癌细胞增殖指数与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),15 mm Hg CO2气腹组胃癌细胞增殖指数(27.4%4±3.7%)与对照组(36.4%±3.3%)比较显著下降(P<0.05).0、10、12 mm Hg CO2气腹组CDK4、Cyclin D1、pRb蛋白表达以及Cyclin D1和CDK4的结合能力与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),15 mm Hg CO2气腹组CDK4、Cyclin D1、pRb蛋白表达以及Cyclin D1和CDK4的结合能力(0.71%±0.12%、0.93%±0.21%、0.54%±0.11%、0.18%±0.02%)与对照组(1.05%±0.16%、1.40%±0.24%、0.75%±0.14%、0.31%±0.02%)比较显著下降(P<0.05).0、10、12、15 mm Hg CO2气腹组Rb蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 临床常用压力的CO2气腹对胃癌细胞周期无显著影响,15 mm Hg CO2气腹抑制细胞增殖,其原因可能与Cyclin D1和CDK4的表达下调有关.