体内血管化组织工程室内进行组织工程研究的进展

目的介绍一种利用在体血管转移入组织工程室(血管化组织工程室)进行体内组织工程研究的新方法,总结目前血管化组织工程室内进行组织工程研究的进展。方法查阅国内外近年来在血管化组织工程室内进行组织工程研究的文献,并进行综合分析。结果血管化组织工程室内能构建出具有血管网络的脂肪组织、心肌组织等,常用的血管化组织工程室模型有动静脉分流环路模型和腹壁下浅动脉模型。结论体内利用血管化组织工程室进行组织工程研究的方法有望应用于临床。     

负压封闭引流技术治疗爆炸伤致猪全层腹壁缺损的实验研究

目的：探讨负压封闭引流技术（Vacuum Sealing Drainage,VSD）对于爆炸伤导致的全层腹壁缺损后的疗效。方法：20只健康家猪制作腹部爆炸伤开放模型随机分为两组。所有创面均在伤后6～8h内清创,实验组将带孔硅胶膜覆盖于脏器表面后应用VSD敷料进行治疗,压力设定于-125mmHg,对照组将硅胶膜覆置于脏器表面,盐水纱布覆盖包扎,常规换药,比较两组修复前时间,换药次数,创面及腹腔感染率。结果：实验组修复前时间为（7.20±2.39）天,换药次数为（2.20±0.79）次,创面及腹腔感染率为10%;对照组修复前时间为（10.30±2.11）天,换药次数为（11.90±2.23）次,创面及腹腔感染率为70%。两组各项比较均有统计学意义（P〈0.05）。结论：VSD治疗对于爆炸伤导致的全层腹壁缺损能缩短治疗时间,有效控制创面及腹腔感染,减少换药次数。     

改良Halo-骨盆架分期牵引治疗重度僵硬性脊柱侧凸的疗效分析

目的：探讨改良Halo-骨盆架分期牵引联合手术治疗重度僵硬性脊柱侧凸的临床疗效。方法：自2004年1月至2010年5月治疗50例重度僵硬性脊柱侧凸患者,男23例,女27例;年龄4～16岁,平均10.8岁;先天性脊柱侧凸24例（分节不良11例,形成障碍7例,混合型6例）,特发性脊柱侧凸26例。采用改良Halo-骨盆架分期牵引联合手术治疗：Ⅰ期术前牵引,Ⅱ期松解牵引,Ⅲ期牵引矫形内固定。对治疗前后患者身高、侧凸Cobb角、后凸Cobb角及矫正率进行观察。结果：患者身高由治疗前平均（152.1±11.1）cm矫正至（158.5±10.5）cm,侧凸Cobb角由平均（91.8±14.5）°矫正至（30.8±7.9）°,后凸Cobb角由平均（69.5±14.0）°矫正至（31.6±10.1）°。Ⅰ期术前牵引后侧凸、后凸Cobb角平均矫正率分别为（30.4±6.6）%、（22.3±5.2）%;Ⅱ期松解牵引后侧凸、后凸Cobb角平均矫正率分别为（26.7±5.1）%、（21.2±6.0）%;Ⅲ期牵引矫形内固定后侧凸、后凸Cobb角平均矫正率分别为（33.7±7.2）%、（27.1±5.3）%（矫正率参照的基准Cobb角是上一期治疗的Cobb角）;分期牵引联合手术治疗的侧凸、后凸Cobb角平均矫正率分别为（66.5±7.2）%、（55.1±6.4）%。各期治疗前后患者身高、侧凸Cobb角、后凸Cobb角及矫正率差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用改良Halo-骨盆架分期牵引联合手术治疗重度僵硬性脊柱侧凸,可获得良好的畸形矫正和躯干平衡,并能减少术中、术后并发症,具有临床可操作性。     

回肠膀胱扩大术联合髂腰肌盆底肌加强术治疗神经源性膀胱的疗效分析

目的 探讨去黏膜带蒂回肠膀胱扩大术联合髂腰肌盆底肌加强术治疗神经源性膀胱的疗效.方法 前瞻性研究去黏膜带蒂回肠膀胱扩大联合髂腰肌盆底肌加强术治疗神经源性膀胱的疗效.神经源性膀胱患者12例.男9例,女3例.年龄18 ～ 27岁,平均25岁.临床表现为不同程度的尿失禁.病程6 ～ 64个月,平均23个月.应用超声、膀胱造影、尿动力学等检查前瞻性比较术前和术后1年的尿动力学参数,上尿路形态和肾功能情况.结果 12例手术顺利.术后出现切口延迟愈合2例,肠梗阻1例,膀胱腹壁尿瘘1例,未出现黏液尿.术后1年1例因发热性泌尿系感染行自我清洁间歇导尿,11例为腹压排尿.术前膀胱输尿管反流8例,术后反流消失5例,反流程度改善3例.术前肾功能不全5例,术后血肌酐水平下降至正常范围3例.术前和术后1年最大膀胱压测定容量[( 247±27)和(412±32) ml]、膀胱顺应性[(4.4±1.2)和(26.2±4.0)ml/cm H2O,1 cm H2O =0.098 kPa]、相对安全容量[(206±24)和(368±26) ml]、最大尿流率[(11±2)和(20±3)ml/s]、残余尿量[(136±25)和(26±8)ml]、逼尿肌漏点压[(63.1±4.9)和(17.8±3.6)cm H2O]比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 去黏膜带蒂同肠浆肌层膀胱扩大联合髂腰肌盆底肌加强术可有效治疗神经源性膀胱.     

负压封闭引流技术治疗爆炸伤致猪全层腹壁缺损的实验研究

目的：探讨负压封闭引流技术（Vacuum Sealing Drainage,VSD）对于爆炸伤导致的全层腹壁缺损后的疗效。方法：20只健康家猪制作腹部爆炸伤开放模型随机分为两组。所有创面均在伤后6～8h内清创,实验组将带孔硅胶膜覆盖于脏器表面后应用VSD敷料进行治疗,压力设定于-125mmHg,对照组将硅胶膜覆置于脏器表面,盐水纱布覆盖包扎,常规换药,比较两组修复前时间,换药次数,创面及腹腔感染率。结果：实验组修复前时间为（7.20±2.39）天,换药次数为（2.20±0.79）次,创面及腹腔感染率为10%;对照组修复前时间为（10.30±2.11）天,换药次数为（11.90±2.23）次,创面及腹腔感染率为70%。两组各项比较均有统计学意义（P〈0.05）。结论：VSD治疗对于爆炸伤导致的全层腹壁缺损能缩短治疗时间,有效控制创面及腹腔感染,减少换药次数。     

BK通道对大鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞内钙离子浓度及凋亡的影响

目的 观察BK通道对脑缺血再灌注损伤神经细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和对神经元凋亡的影响。方法 将108只SD大鼠随机分为假手术组(SS组,n=36)、脑缺血再灌注组(IR组,n=36)、脑缺血再灌注且脑室内Iberiotoxin(IBTX)处理组(IBTX组,n=36),分别比较各组在不同再灌注时间后神经功能缺损评分、脑梗死面积,利用激光共聚焦显微镜技术测定各组[Ca2+]i浓度,免疫组织化学和TUNEL法分别检测BK通道表达和神经元细胞凋亡。结果 IBTX处理组在再灌注24h后神经功能缺损评分为(2.17±0.44)明显高于IR组(1.83±0.42,P＜0.05);脑梗死体积(27.97±5.84)％明显大于SS组(22.83±4.74)％(P＜0.05);激光共聚焦显微镜结果显示:IBTX处理组24h点[Ca2+]i为(914.50 ±86.57) nmol/L较SS组(732.09 ±51.30) nmol/L明显升高(P＜0.01),TUNEL细胞凋亡检测显示IBTX处理组24h神经细胞凋亡率为(15.20±6.11)％,与IR组(10.49±1.91)％比较差异有统计学意义(P＜0.05),免疫组织化学结果显示缺血再灌注损伤后BK通道的表达增加,但组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 在缺血状态下,BK通道对神经细胞具有保护作用,其机制很可能是通过降低神经细胞内钙离子浓度和减少细胞的凋亡。     

寰椎椎弓根显露置钉法的临床应用

目的 探讨寰椎椎弓根显露置钉法(pedicle exposure method,PEM)的手术可操作性和临床疗效.方法 对46例寰枢椎脱位患者应用经寰椎椎弓根螺钉内固定技术治疗.患者术前均行X线、CT和MRI等影像学检查,寰椎后弓(椎弓根)高度为2.5～4.0 mm,平均3.1 mm;术中在直视下行C1,2置钉,复位固...     

创伤性急性肺损伤时兔肺微血管内皮细胞Cx40调控内皮细胞通透性的研究

目的 观察创伤性急性肺损伤(ALI)兔血清对肺微血管内皮细胞连接蛋白40(Cx40)表达和间隙连接通道(GJC)功能的影响,及后者与内皮细胞单层通透性的关系.方法 组织块贴壁法分离、培养兔肺微血管内皮细胞.细胞分为3组,对照组、创伤血清处理组和阻滞剂组.在阻滞剂组,细胞GJC阻滞剂1-庚醇(0.5 mmol/L)加入到培养液中.1 h后,阻滞剂组和创伤血清组的20%胎牛血清的培养液均被更换为含有20%创伤血清的培养液.对照组则只更换培养液.3组细胞继续孵育6 h后,进入实验观察.分别行划痕实验、Cx40蛋白免疫印迹、单层细胞通透性和细胞内Ca2+钙浓度检测.结果 Cx40蛋白印迹见创伤血清组与阻滞剂组蛋白表达水平较对照组有明显降低,且2组之间亦不同,阻滞剂组蛋白水平较创伤血清组低,吸光度和值减少(对照组726293.2±83 684.1,创伤血清组397 798.1±87 145.7,阻滞剂组316977.6±76 325.9,n=4,P＜0.05).3组细胞划痕边缘的细胞均被染料荧光黄(LY)染色,LY在对照组细胞扩散得最远,显色的周边细胞的数量最多,创伤血清组次之,阻滞剂组显色的细胞数量最少,相邻细胞与边缘细胞比值的差异有统计学意义(23±5、11±3比7±2,n=4,P＜0.05).3组细胞伊文思蓝清除率均随着时间的延长而增加,且3组细胞间亦有不同,阻滞剂组清除率高于创伤血清组和对照组.组间差异和时间点差异均有统计学意义(P＜0.05).通过共聚焦显微镜的观察,3组细胞荧光强度不相同,阻滞剂组荧光最强,对照组最弱.创伤血清组和阻滞剂组细胞内Ca2+浓度均显著高于对照组[(494.80±41.94)、(569.80±6.70)nmol/L比(158.80±13.09)nmol/L,P＜0.05].结论 创伤性ALI动物血清抑制肺微血管内皮细胞Cx40表达,进而引起GJC功能下降,导致肺血管内皮细胞单层通透性增加,该机制可能参与了胸部创伤后肺血管通透性增加的形成,促进了伤后急性肺损伤的发病.

Abstract：

Objective To investigate the influence of traumatic acute lung injury (ALI) rabbit serum on gap junction channel ( GJC ) function and connexin40 ( Cx40) expression, and the correlation of GJC and Cx40 with rabbit pulmonary microvascular endothelial cells permeability. Methods Cultured pulmonary microvessel endothelial cells were divided into three groups, control ( Gcontrol) , injured serum (Gserum) , and blocker agent ( Gblocker). GJC function was assessed by scrape-loading and dye transfer techniques. Pulmonary microvessel endothelial cells permeability was measured by Evans blue-labeled albumin transfer, and the expression of Cx40 was measured by Western blotting. Intracellular free calcium concentration was measured by fluo-3am. Results Injured serum decreased GJC function and the level of Cx40,which was aggravated by the GJC blocker (control 726 293. 2 ± 83 684. 1, serum 397 798. 1 ± 87 145. 7, blocker 316 977. 6 ±76 325. 9,n=4,P ＜0. 05). Similarly, pulmonary microvascular endothelial cells permeability was increased significantly in Gserum and Gblocker as compared with Gcontrol (P ＜0. 05). After treatment with injured serum in combination with gap junction blocker in vitro, intracellular free calcium concentration was increased [control (494. 80 ±41.94) nmol/L, serum (569. 80 ±6. 70) nmol/L, blocker (158. 80 ±13. 09) nmol/L, P＜ 0.05]. Conclusion Traumatic ALI rabbit serum inhibits the Cx40 expression and down-regulates GJC function, which contributes to the increase of pulmonary microvascular endothelial cells permeability after ALI This mechanism may participate in the increase of pulmonary vascular permeability and promote the morbidity of ALI after trauma.     

单孔腹腔镜在上尿路手术中的应用与体会（附45例报告）

目的总结单孔腹腔镜在上尿路手术中的应用与体会。方法采用单孔五通道,经后腹腔入路肾上腺腺瘤切除术20例、肾囊肿去顶减压术10例、肾癌根治术10例、输尿管切开取石术5例。记录围手术期并发症、手术时间、出血情况、引流管拔除时间、住院时间等。结果患者手术均取得成功,术中、术后均无明显并发症的发生。结论单孔腹腔镜在泌尿外科上尿路手术中的应用是安全和可行的,随着更多的临床实践、器械改进,单孔腹腔镜手术将有更完善和广阔的应用前景。     

环氧合酶-2、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因在肝胆管结石合并胆管癌组织中的表达及意义

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)在肝胆管结石合并胆管癌(hepatobiliary calculus with cholangiocarcinoma,HCWC)中的表达及其意义,研究COX-2、PTEN与HCWC发生、发展的关系,为HCWC的临床防治提供依据.方法 研究分三组:正常胆管组(肝血管瘤或肝外伤切除标本)10例(A组),肝内结石所在胆管组30例(B组),HCWC组37例(C组).应用免疫组织化学SP法,通用二步法检测各组COX-2、PTEN的表达情况,并对检测结果进行分析.结果 COX-2在A、B、C三组中的表达阳性率分别为10.0%、33.3%和70.3%,癌组织中的表达阳性率明显高于对照组胆管组织(P＜0.01).PTEN在A、B和C三组中的表达阳性率分别为90.0%、80.0%和35.1%,癌组织中的表达阳性率明显低于对照组胆管组织(P＜0.01).在COX-2阳性表达的HCWC组织中,PTEN有较低表达.Kendall相关分析表明HCWC组织中COX-2与PTEN表达呈显著负相关(r=-0.323,P＜0.05).结论 COX-2高表达可能与HCWC形成有关.在HCWC中,COX-2和PTEN表达呈负相关.COX-2高表达、PTEN低表达可能提示HCWC更易发生淋巴转移或肝外转移.

Abstract：

Objective To explore the expressions of cyclooxygenase-2 (COX-2), phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN) in hepatobiliary calculus associated with cholangiocarcinoma (HCWC) and their clinical significance. The relationship between the expressions of COX-2, PTEN and the onset and progression of HCWC was investigated to form an experimental base for the prevention and treatment of HCWC. Methods Thirty seven patients with tumor tissues of HCWC (group C), thirty patients with tissues of bile duct surrounding intrahepatic calculus (group B), and ten patients with normal tissues of bile duct from operations of hemangiomas of liver or liver trauma as the control (group A) were sampled and collected. A two-step immunohistochemistry (SP method) was employed to detect and statistically analyze the expressions of COX-2 and PTEN in each of the 3 groups. Results In groups A, B, C, the positive rate of the expression of COX-2 was 10%,33.3%, and 70.3%, respectively. The positive rates of expression of COX-2 in the carcinoma tissues of HCWC was significantly higher compared with the control group (P＜0. 01). In groups A, B, C the positive rates of the expression of PTEN was 90. 0%, 80. 0%, and 35.0%, respectively. The positive rate of expression of PTEN in the carcinoma tissues of HCWC was significantly lower than the control group (P＜0. 01). The expression of COX-2 was followed by a low expression of PTEN in the tissues of HCWC. Kendall's related analysis showed a strong negative correlation between the expression of COX-2 and PTEN in HCWC (r=-0. 323, P＜0. 05). Conclusions A high expression of COX-2 was related to HCWC. There was a negative correlation between the expressions of COX-2 and PTEN in HCWC. A high expression of COX-2 and a low expression of PTEN suggested a high chance of HCWC in extrahepatic or lymphatic metastasis.