反义AKT2 RNA抑制U251胶质瘤细胞生长的体内外研究

目的 研究反义AKT2RNA对U251人脑胶质瘤细胞在体内外的生长抑制效用。方法 将逆转录病毒pLXSN为载体的反义AKT2构建体转染U251人脑胶质瘤细胞系，应用蛋白印记确定基因转染前后AKT2的表达水平。流式细胞法与Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转染前后的增殖活性。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导pLXSN、pLXSN-AS-AKT2基因治疗对U251细胞生长抑制作用。在28d的观察期内定期测量皮下肿瘤体积，对肿瘤标本应用免疫组化的方法进行AKT2和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达比较。结果 脂质体介导pLXSN-AS-AKT2可显著抑制U251细胞AKT2表达。与对照组和pLXSN转染组比较，细胞周期分析结果表明AK—AKT2转染组进入S期的细胞数减少了8．5％～8．9％，而进入G0＋G1期细胞则增加了7．9％～8．6％。Matrigel基质生长实验显示对照组和pLXSN转染组细胞呈正常形态贴壁生长，而AS～AKT2转染组细胞不能贴壁生长，呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示pLXSN-AS-AKT2显著抑制皮下肿瘤生长，组织病理学分析显示AS-AKT2转染组AKT2表达下降而GFAP表达上调。结论 体内外实验证明反义AKT2方法在抗胶质瘤增殖方面作用重要，AKT2可作为基因治疗胶质瘤的优选靶标。     

加热及增加细胞内氧自由基水平对恶性胶质瘤细胞生物学特性的影响

本文就加热及同时增加细胞内氧自由基水平对恶性胶质瘤细胞存活、增殖和细胞间隙连结通讯的影响做初步观察。用Ｍ．Ｔ．Ｔ法测定胶质瘤细胞存活率；用Ｋｉ－６７抗增殖细胞核抗原单克隆抗体，通过免疫组织化学ＡＢＣ染色分析胶质瘤细胞的增殖活性；用划痕染料示踪技术观察胶质瘤细胞的细胞间隙连结通讯。结果表明，Ｈ２Ｏ２和３ＡＴ能增强加热对胶质瘤细胞存活与增殖的抑制作用，促进胶质瘤细胞间隙连结通讯的改善，存在着明显的剂量和时间效应。实验结果提示，通过内外源性增加胶质瘤细胞内的氧自由基水平，将有助于强化加热治疗胶质瘤效果，并可以减少加热的剂且，降低副作用。     

替牙(牙合)时期前牙反(牙合)矫治中弓丝弯制的探讨

目的　探讨在“2× 4”矫治技术中弓丝弯制的方法及原理。方法　替牙牙合时期前牙反牙合患者 2 4例 ,使用粗弓丝 ,在其弓丝上弯制各种曲形 ,并根据不同错牙合类型 ,处理各种曲与牙齿、带环关系 ,防止出现磨牙旋转移动等异常。结果　 2～ 6个月纠正反牙合 ,2 4例替牙牙合时期反牙合患者得以早期矫治。结论　本方法矫治时间短 ,效果明显 ,操作简单 ,能够达到较为理想的矫治效果     

腹腔镜阑尾切除术219例临床应用体会

目的：总结腹腔镜阑尾切除术的临床应用体会。方法：回顾性分析219例接受腹腔镜阑尾切除术的患者资料。结果：219例中，215例行腹腔镜阑尾切除术，4例行腹腔镜阑尾周围脓肿引流术。手术均顺利完成，无1例中转开腹，术后无1例发生切口感染、肠粘连、肠梗阻、腹腔残余脓肿形成等并发症，全部治愈出院。结论：腹腔镜阑尾切除术具有创伤小、恢复快、住院时间短、术野清晰、探查范围广、并发症少等优点，尤其在术前诊断不明确时可弥补开腹阑尾切除术的不足，值得进一步推广。     

PCR微板杂交检测生殖器疱疹病毒感染

以 PCR扩增生殖器疱疹病毒 DNA,然后用特异性 DNA探针微孔板检测疱疹病毒扩增产物 ,同时用普通 PCR检测同样的标本。结果 4 3例病例组中 ,PCR微板杂交 35 (83% )例阳性 ,8例 (17% )阴性 ;普通 PCR37(86 % )例阳性 ,6 (14 % )例阴性 ,二者无显著性差异 ;对照组 PCR微板杂交 19例 2例阳性 ,17例阴性。同时 ,普通 PCR则有 5例阳性 ,14例阴性。PCR微板杂交具有快速、灵敏度高、特异性强、抗污染能力强的优点 ,适用于检测可疑 HSV感染 ,具有临床使用价值     

人脑胶质瘤中β-catenin的表达与细胞增殖相关性研究

目的:探讨人脑胶质瘤中βcatenin的表达及与细胞增殖的相关性。方法:用免疫组化法观察了47例胶质瘤标本βcatenin、cyclinD1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并分析其相关性。结果:在胶质瘤中βcatenin、cyclinD1、PCNA均随肿瘤恶性程度增高而增高(P分别为0.017、0.017、0.027),相关分析发现βcatenin、cyclinD1、PCNA的表达两两相关(P<0.001,P<0.001和P=0.005)。结论:βcatenin表达水平的异常与胶质瘤细胞周期调节紊乱、增殖指数上升有关,因此可能是控制肿瘤细胞增殖活性的候选基因之一。     

脱细胞异体皮肤细胞外基质——医用组织补片在美容外科的应用

目的介绍脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片在美容外科中的临床应用经验。方法自2002年3月至2005年10月,应用脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片,对患者不同部位进行填充的美容手术,其中头面部填充于皮下浅筋膜层,唇部、颏部、唇裂合并牙槽裂部填充于皮下深筋膜层或肌肉浅层,隆乳术中用于胸大肌减张。结果本组115例患者经1~27个月随访,1例唇裂合并牙槽裂者因补片填充量不足凹陷未完全矫正;1例鼻唇沟填充者其左侧出现血肿、局部出现硬结,于2个月后将左侧假体取出重新填充,但术后6个月仍有不平整,其余患者均获得良好的美容效果。结论脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片可以广泛地应用于美容外科的临床填充术。     

High incidence of and risk factors for metachronous bilateral upper tract urothelial carcinoma in Taiwan

AIM: Urothelial carcinoma (UC) can occur multifocally in the whole urothelium. A higher rate of bilateral metachronous upper tract (UT) UC was noted in Taiwan. The incidence and risk factors were largely unknown and hence were explored in the study. METHODS: From January 1977 through June 2003, 462 patients with unilateral UT-UC were studied retrospectively. The cumulative incidence of contralateral recurrence was analysed with the Kaplan-Meier analysis. Potential risk factors for contralateral recurrence including age, smoking, bladder cancer, renal function, diagnostic year etc. were evaluated with the log-rank test. Independent risk factors were identified by using the Cox regression analysis. RESULTS: The median follow-up time was 34 months (6-337). Among the 462 patients, 52 (11.3%) developed metachronous contralateral UC. The 2, 5, and 10-year contralateral disease-free survivals were 93.5%, 84.0%, and 75.7%, respectively. The median time to contralateral recurrence was 31.0 months. With the univariate analysis, only poor renal function (serum creatinine < or > OR =2.0 mg/dL, P < 0.001) and late diagnostic year (before or after 1990, P < 0.001) were risk factors for contralateral recurrence. In the multivariate analysis, poor renal function (hazard ratio: 2.98; 95% confidence interval: 1.67-5.33; P < 0.001) and late diagnostic year (hazard ratio: 4.27; 95% confidence interval: 1.71-10.65; P = 0.002) remained independent risk factors. CONCLUSIONS: The incidence of metachronous UT-UC is high in Taiwan. Patients who had either chronic renal insufficiency or a disease diagnosed after 1990 had a higher risk of contralateral recurrence.     

异搏定区域动脉灌注在阻止急性胰腺炎重症化治疗中的作用

目的探讨钙拮抗剂异搏定区域动脉灌注在阻止急性胰腺炎重症化治疗中的作用。方法45例轻型急性胰腺炎患者被随机分为3组常规治疗组、静脉治疗组及动脉灌注组。入院后,常规治疗组采取常规保守治疗;静脉治疗组行合理液体治疗,静脉注射异搏定;动脉灌注组液体补充同时采用持续动脉灌注异搏定1~2周。测定治疗后1、4及7d血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、黏附分子-1(ICAM-1)及P-选择素(P-selectin)水平。结果治疗后4、7d,血清TNF-α和P-selectin水平动脉灌注组较静脉治疗组及常规治疗组明显降低(P<0.05);血清IL-1β水平动脉灌注组和静脉治疗组均较常规治疗组明显降低(P<0.05);血清ICAM-1水平动脉灌注组明显低于常规治疗组(P<0.05)。结论持续区域动脉灌注异搏定可能通过减少细胞因子的产生,抑制黏附分子P-selectin和ICAM-1的上调,阻止急性胰腺炎重症化发展。