东部马脑炎病毒E2基因与GM-CSF共表达质粒的构建及其免疫原性初步研究

目的:利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作为基因佐剂,提高东部马脑炎病毒E2基因重组质粒的免疫效果.方法:分别扩增E2基因与GM-CSF基因,连接进入含有内部核糖体插入位点(IRES)的真核表达载体中,构建共表达质粒.Lipofectamine2000介导转染真核细胞BHK-21,反转录PCR检测E2和GM-CSF两个基因的转录,Western印迹法和间接免疫荧光法(IFA)检测细胞内E2基因表达产物的抗原性.通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,IFA法测定血清抗体效价,FACS测定免疫小鼠脾细胞中CD4 /CD8 淋巴细胞构成比,初步观察共表达质粒的免疫原性.结果:经酶切鉴定与序列测定证明重组共表达质粒中含有E2和GM-CSF两个基因且序列正确.转染细胞的反转录PCR可见E2和GM-CSF两个基因的转录.Western印迹结果可见转染细胞的裂解液在相对分子质量50 000位置有特异性条带.将转染细胞制成荧光抗原片,经IFA检测可见胞浆中出现特异荧光.免疫小鼠的最高血清抗体效价为1:160,但细胞免疫未观察到明显的提高.结论:构建的共表达质粒pE2-IRES-mGM-CSF具有良好的免疫原性,能有效刺激小鼠特异性体液免疫应答,提高了E2基因重组质粒诱导的血清抗体效价.     

以问题为中心的病案教学法在临床核医学中的实践

目的 设计以问题为中心的病案小组讨论教学法，在临床核医学核素治疗见习的教学实践中进行验证和评价。方法 总结近几年在临床核医学见习带教中的问题与缺陷；以病案引入问题，教师引导，进行小组讨论；评价教学效果。结果 临床核医学及其教学具有不同于其它临床学科的鲜明特点和规律；经改革的教案，收到学生和教师的良好反馈。结论 以问题为中心的病案小组讨论教学法，切合临床核医学见习实际，有效可行。     

癌基因c-fos、c-jun蛋白在鳞状细胞癌皮损中的表达及意义

目的　探讨癌基因c fos、c jun的表达与皮肤鳞癌发生和发展的关系。　方法　采用免疫组化法对 6 0例皮肤鳞癌的c fos、c jun的表达情况进行检测 ,并与正常皮肤组织进行对照。　结果　c fos、c jun在正常皮肤组织不表达 ,在皮肤鳞癌中的表达阳性率分别为 6 1.7%和 4 8.3% ,其表达水平与癌组织的分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,肿瘤的分化程度越高其表达水平越高。　结论　c fos、c jun的表达水平可作为判定皮肤鳞癌分化的指标。     

新生儿肠旋转不良的诊治分析

目的 分析新生儿期先天性肠旋转不良的临床特点及诊治方法。方法 回顾分析1996～2003年12例新生儿期先天性肠旋转不良，男10例，女2例，就诊时出生7～75d，平均45d，术前均经泛影葡胺口服及灌肠造影确诊后行Ladd术，附加阑尾切除术。结果本组1例术后并发粘连性肠梗阻二次手术行粘连松解术，其余11例无并发症，全部治愈出院。结论 本病的发病机制是由于并发急性肠扭转所致高位十二指肠的梗阻，主要临床特点是反复间断性胆汁性呕吐，口服和灌肠的消化道造影是诊断本病的最可靠依据。Ladd式手术是本病手术治疗的最佳选择，且效果满意。     

胆红素对新生豚鼠蜗核损伤的动态研究

目的　探讨听性脑干反应 (ABR)在胆红素所致听力损伤中的监测价值。方法　 2 0只新生 5日豚鼠随机分为胆红素组和对照组 ,胆红素组腹腔注射胆红素 (2 0 0 μg/ g) ,对照组腹腔注射相应体积的生理盐水 (0 1ml/g) ,于腹腔注射前和后 4h、 8h分别记录ABR并观察神经行为状况 ,每组各取 5只于腹腔注射后 4h、 8h分别行蜗核形态学观察。结果　注射胆红素后 ,ABR波潜伏期、波间期呈逐渐延长趋势 ,振幅呈逐渐下降趋势 ,其中波Ⅱ改变出现最早且最明显。用药后 4h ,无明显神经系统症状和形态学改变时 ,Ⅰ -Ⅱ波间期延长及波Ⅱ振幅下降与对照组及用药前比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;用药后 8hABR改变更明显 ,同时伴有神经症状和镜下形态学改变 ,蜗核体积及大椭圆细胞截面积显著性减小 (P <0 0 1)。结论　ABR是监测胆红素所致听力损害早期的敏感指标 ,优于耳蜗电图和耳声发射等主要反映周围听觉系统功能状态的电生理技术 ,加强高胆红素血症新生儿的ABR动态监测有非常重要的临床意义     

前哨淋巴结活检术应用于外阴癌的初步研究

目的 探讨前哨淋巴结活检术(SLNB)应用于外阴癌的可行性.方法 选择2004年10月-2008年4月间于中国医学科学院肿瘤医院接受手术治疗、术中采用SLNB的外阴癌患者21例,其中处于研究前期(即2005年5月前)的11例患者采用染料法识别前哨淋巴结(SLN)、处于研究后期的10例患者采用核素-染料联合法识别SLN,术后行常规病理检查.以病理检查结果为金标准,观察SLNB的检测效果;并观察与SLNB相关的并发症的发生情况.结果 21例患者中,20例(95%)检出SLN,其中8例为单侧腹股沟、12例为双侧腹股沟.20例SLN阳性患者共检出83枚SLN,每例患者平均检出4.2枚(1～9枚),每侧腹股沟平均2.6枚(1～6枚).其中,染料法每例患者平均检出4.4枚、每侧腹股沟平均2.5枚,核素-染料联合法每例患者平均检出3.9枚、每侧腹股沟平均2.7枚,分别比较,差异均无统计学意义(t=0.459,P=0.652;t=-0.421,P=0.717).20例SLN阳性患者腹股沟浅组淋巴结中均检出SLN,其中1例双侧腹股沟深组淋巴结中也检出SLN.20例SLN阳性的患者中,8例(10侧腹股沟)术后病理检查显示腹股沟淋巴结转移,其中7例患者(9侧腹股沟)的转移淋巴结中均包括有SLN、1例(1侧腹股沟)出现假阴性.以SLN识别预测同侧腹股沟淋巴结转移的假阴性率为10%(1/10),阴性预测值为96%(22/23).未发现与SLNB相关的损伤及不良反应.结论 SLNB应用于外阴癌安全、可行,以SLN预测同侧腹股沟淋巴结转移具有较高准确性.     

非小细胞肺癌转移预测指标的研究

目的 :研究非小细胞肺癌 (NSCLC)淋巴结和远处转移的预测指标 ,并建立Logistic回归模型。　 方法 :通过免疫组化、ELISA、酶谱电泳等方法 ,对NSCLC肿瘤病理标本、血清、尿液和骨髓等进行检查 ,并通过Logistic回归分析建立预测概率模型。　结果 :免疫组化指标肿瘤组织内微血管密度 (IMVD)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)、白细胞分化抗原变异型 (CD4 4v6 )、基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )与NSCLC淋巴结转移危险有关 (P <0 .0 5 ) ,组织金属蛋白酶抑制物 (TIMP 2 )、上皮型钙粘素 (E cad)与NSCLC淋巴结转移危险下降有关 (P <0 .0 5 )。血清MMP 2、MMP 9,尿液MMP 2、MMP 9及骨髓上皮膜抗原 (EMA)阳性细胞与NSCLC远处转移危险有关 (P <0 .0 5 )。其中免疫组化指标CD4 4v6、IMVD、E cad及尿液MMP 2、骨髓EMA阳性细胞对NSCLC转移有显著回归效果而分别被选入概率模型 1和 2 ,其预测准确率分别为 81.1%和 72 .7%。　结论 :组织标本中CD4 4v6、IMVD、E cad以及尿液中MMP 2及骨髓EMA阳性细胞检查 ,可预测绝大多数NSCLC的淋巴结转移和远处转移状况 ,为NSCLC转移的早期诊断提供重要信息 ,有助于NSCLC的个体化治疗和改善预后     

切开复位内固定治疗股骨髁间骨折

目的探讨股骨髁间骨折的切开复位内固定临床价值。方法自1995年7月～2001年12月,采用切开复位,普通钢板、95°角钢板、DCS或髁部支撑钢板等内固定治疗股骨髁间骨折32例。根据AO/ASIF分类,C1型13例,C2型10例,C3型9例。根据术前术后X线片及术后膝关节功能恢复情况评价内固定效果。结果27例获得随访,随访时间9个月～7年,根据Sanders评分标准,优14例,良9例,差4例。结论切开复位内固定是治疗股骨髁间骨折的理想选择。     

胰岛素抵抗与高血压病冠心病糖尿病的关系

目的探讨中老年人高血压、冠心病、糖尿病胰岛素抵抗的状况及相关因素。方法按中老年高血压病、冠心病、糖尿病、高血压合并冠心病等类别分组、并设对照组，计体重指数、测血脂、血糖、胰岛素及胰岛素抗体浓度，并根据血糖、血胰岛素浓度计算胰岛素敏感性．结果胰岛素抵抗在冠心病、高血压病、高血压合并冠心病及糖尿病中依次递增．设对照组胰岛素相对敏感性为１，则上述各病分别为０８３、０．７９、０６１、０．３２．与之相伴随的是糖及脂质代谢紊乱及体重指数的增加。结论高血压、冠心病、糖尿病多存在胰岛素抵抗，并可能是心血管疾病的危险因子。     

曲米帕明与米帕明治疗抑郁症的对比

曲米帕明（男性２０例，女性１２例；年龄３６±５１２ａ）和米帕明（男性１９例，女性１３例；年龄３８±１１ａ）治疗６４例抑郁症。开始剂量均为５０ｍｇ／ｄ，１ｗｋ内加至１５０－３００ｍｇ／ｄ，共４ｗｋ。用ＨＡＭＤ量表评定。结果显示２组抗抑郁疗效相仿。ＨＡＭＤ总分及各因子分的减分２组间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。２组的主要不良反应为抗胆碱能症状，对心脏的影响曲米帕明似较米帕明为轻。