阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶eDNA克隆和序列分析

目的 近年研究表明Rab11鸟苷三磷酸酶在调节各种真核细胞的膜转运通道中发挥着重要作用。但是，对于原生动物毛滴虫膜转运系统的研究仍甚少。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫Rabll鸟苷三磷酸酶基因，以便进一步探讨其功能。方法 使用SMART cDNA文库构建试剂盒构建阴道毛滴虫cDNA表达文库，用生物信息学进行TvRab11同源分析，鉴定TvRab11基因，用PCR方法扩增基因组DNA，TA克隆TvRab11 cDNA、测序及序列分析。结果 在分离出的cDNA克隆中发现一个Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因。该cDNA序列长710bp，读码框含636bp，推测蛋白质序列具211个氨基酸。序列分析表明该基因系Rab11亚家族的同源基因，其推测肽链与拟南芥Rab11c的同源性晟高（一致性60％，相似性79％），与人类Rab11b次之（一致性58％，相似性78％）。该氨基酸序列拥有Rab鸟苷三磷酸酶家族的所有保守结构域和特异性Rab结构域（RabF1-5）。进化树分析也表明该基因系Rab11的同源基因。序列分析还显示该基因的基因组DNA序列与cDNA序列完全一致．提示该基因无内含子。结论分析表明该基因是阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因，其功能有待进一步研究。     

重症肌无力胸腺切除术后呼吸道管理与并发症的防治

目的 探讨重症肌无力胸腺切除术后呼吸道管理与并发症的防治.方法 32例ICU收治的重症肌无力胸腺切除术后的患者,根据危象预测积分,分为普通组(积分＜12分,n=21)和高危组 (积分＞12分,n=11),对两组患者术后呼吸机支持时间、拔管前后肌力恢复情况、自主呼吸情况、动脉血气分析情况以及两组患者术后体温、胸片和痰培养结果进行统计分析.结果 高危组患者术后呼吸支持时间(18 ～ 30 h,平均26 h)大于普通组患者(4 ～ 28 h,平均14 h),两组有显著性差异(P＜0.01),同时术后发热、胸片渗出影以及阳性痰培养结果的发生率也高于普通组.结论 术后给予高危患者严密的监测和充分的呼吸支持,有助于降低重症肌无力危象的发生率和死亡率,同时应充分重视气道护理和感染的防治.     

脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制真核表达载体构建及最佳短发夹样RNA分子筛选

目的构建并筛选大鼠胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达抑制短发夹样RNA（shRNA）真核表达载体。方法针对GFAP基因全编码序列设计并合成三对9bp茎环结构、19bp干扰序列特异性shRNA模板，体外定向克隆构建特异性重组质粒真核表达载体；通过体外大鼠脊髓源星形胶质细胞GFAP表达抑制模型，脂质体介导RNA干扰分子转染，实时荧光定量RT—PCR及Wesem blot技术观察RNA干扰后原代星形胶质细胞GFAP表达抑制效果．筛选最佳GFAP表达干扰抑制真核表达载体。结果序列测定证实GFAP—shRNA重组质粒真核表达载体构建成功，三对shRNA模板在mRNA及蛋白表达水平抑制靶基因表达效率分别为81％、63％、56％。结论高效率的GFAP—shRNA真核表达载体在大鼠原代星形胶质细胞GFAP表达抑制模型中能高效抑制GFAP基因表达，为后续多靶点RNA干扰技术在脊髓损伤胶质瘢痕抑制基因治疗中的应用奠定了前期基础。     

Study on Bone Mineral Density and its Influencing Factors among 1 214 Older Adults in Xuhui District, Shanghai

Osteoporosis is a common disease in older adults. The basic evidence for the diagnosisof osteoporosis is the decrease of bone mineral density (BMD) [1]. Studies showed that the risk of fractures would rise as the bone mineral density decreased, and the me…     

K562／ADM耐药细胞株的建立及其生物学特性的初步观察

我们建立的K562/ADM耐药细胞株,在ADM浓度为2.4μg/m1(4.46μM)中已稳定培养3.5个月,传了30—35代,K562/ADM亦具有多药耐受件(Multidrug Resistance,MDR)的特点,对ADM、VCR、AT—1258和DDP的耐受性分别为K562的114.7、94.0、13.3和7.4倍,但对5—FU不产生交叉耐药。K562和K562/ADM的倍增时间分别为19.2h和52.8h,集落生成率分别为37.5％和11.1％,K562染色体数为34—68,中位数为56;K562/MDM染色体数为32—90,中位数为50,K562/ADM可做为耐药机理和克服耐药措施研究的极好模型。     

腹茧症16例诊治体会

目的 探讨腹茧症的诊断及治疗方法。方法 回顾性分析l6例腹茧症的临床资料及随访结果。结果 16例腹茧症均经手术治疗并确诊。术前11例误诊为机械性肠梗阻2～l0年，4例为误诊慢性阑尾炎，l例误诊为腹部肿块。术后并发症2例，全部患者均临床治愈。并获随访1～l0年，2例分别因反复发作肠梗阻于1年和5年死亡，2例反复发作不完全性肠梗阻合并营养不良，12例情况良好。结论 腹茧症术前诊断困难，上消化道造影和B超及CT对诊断可能有帮助；包膜切除，肠粘连松解是治疗本病的有效方法。     

误诊为脑梗塞的老年人脑肿瘤

目的 探讨将中老年人脑肿瘤误诊为脑血管病的原因及二者之间的一些内在联系。方法 回顾性分析18例老年中脑肿瘤患者的临床表现,诊断与治疗结果。结果 18例患者神经手术、化疗、放疗及对症处理,全组无严重并发症,好转出院。结论老年中脑肿瘤病史、症状及体征不典型。常呈卒中样发病,临床上极易误疹,应高度重视。     

神经反射检查在脑出血急性期康复护理中的应用

出血性脑血管疾病在急性期病情凶险,病死率、致残率高。过去,我们对这些认识不足,只重视抢救生命,而忽视患者的功能恢复[1],以至于侧重早期的急救而错过了最佳的康复时机。为降低急性脑出血患者的病死率和致残率,提高生活质量,2003年6月-2005年6月,本研究对60例脑出血急性期的患者,在常规治疗护理的同时应用神经反射检查的方法给予神经系统反射刺激,经观察比较神经功能缺损评分,治疗组显著优于对照组,现报道如下。资料与方法1.一般资料。本组均为2003年6月-2005年6月我院收住院的脑出血患者,均符合1995年全国第4次脑血管病学术会议提出的诊…     

根管细菌渗漏体外模型的建立

目的：建立检测微细菌培养模型，以用于评价根管充填封闭情况。方法：牙根的冠根两端各连接一细菌培养储室，冠方储室置1mL无菌培养基并接种0．1mL菌液，根方储室起始为无菌培养基。每隔3d将冠方储室中菌液吸出1mL，并注入1mL新鲜BHI培养基，共90d。当根尖储室中培养基发生浑浊即为细菌渗漏发生，记录细菌渗漏发生时的天数。选择18个直根管前牙，其中牙胶充填组6个，用冷牙胶侧方加压充填技术充填；空管组6个，根管只预备不充填；根管密封组6个，根管充填并严密封闭根管口和根尖孔。用设计的模型检测密封状况。结果：全部空管组6个样本在1d内根方储室中出现浑浊；根管密封组6个样本的根方储室在90d内均未发生浑浊。牙胶充填组有2个样本分别在44d和46d发生浑浊。结论：此模型方法简单易行且实用有效，具有一定的临床相关性和可行性。