两株B型流感病毒的基因组序列分析

目的 了解两株B型流感病毒的基因组序列特征。方法 对两株B型流感病毒进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析。结果 成功扩增出两株B型流感病毒的全基因组序列,并且两毒株的基因组均属于Yamagata系类似株Ⅱ系。两株病毒的基因组序列与疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)以及Victoria系代表株B/Brisbane/60/2008、B/Malaysia/2506/2004相比,HA基因同源性为89.7%～97.3%,NB基因同源性则为95.4%～98.4%。两株病毒的HA蛋白与WHO推荐的疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)相比,存在11处氨基酸突变,其中HA的N131K氨基酸位点突变,可能对抗原性产生影响。NB的S198N氨基酸位点突变可能影响神经氨酸酶抑制剂的灵敏度。结论 两株B型流感病毒的遗传进化状态稳定,但是与同分支中的毒株基因序列部分位点存在差异。     

N-乙酰半胱氨酸对高尿酸血症大鼠氧化应激和血管内皮功能的影响及其机制

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对高尿酸血症(HUA)大鼠氧化应激和血管内皮功能的影响,并阐明其作用机制.方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量NAC组和高剂量NAC组,每组15只.除对照组外,其他各组均采用氧嗪酸钾灌胃法建立HUA大鼠模型.低和高剂量NAC组大鼠分别给予75和300 mg·kg-1 ...     

中东呼吸综合征冠状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,用于中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的检测。方法根据中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白基因的保守序列设计并合成一对引物及一条特异性TaqMan探针。通过条件优化,以10倍系列稀释重组质粒为标准品,进行Real-time PCR扩增,绘制标准曲线,并进行重复性、准确性、特异性及敏感性检测。结果建立的Real-time PCR方法检测中东呼吸综合征冠状病毒所绘制标准曲线的相关系数0.99,灵敏度为1.00×101拷贝,高于常规PCR方法(1.00×102拷贝);用该方法检测中东呼吸综合征冠状病毒基因为阳性,其他6种对照呼吸道病原体及冠状病毒基因检测均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均1%。结论建立的中东呼吸综合征冠状病毒Real-time PCR检测方法灵敏、特异、重复性好,可用于中东呼吸综合征冠状病毒感染的快速诊断和流行病学调查。     

豚鼠TNF、IFN-γ、IL-1荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立测定豚鼠肺脏中TNF、IFN-γ、IL-1的荧光定量PCR方法。方法根据已有序列设计TNF、IFN-γ、IL-1基因检测引物,建立荧光定量PCR检测方法。结果用建立的荧光定量PCR检测豚鼠TNF、IFN-γ、IL-1基因的溶解曲线峰值单一,扩增水平稳定。结论成功建立了检测豚鼠TNF、IFN-γ、IL-1基因的荧光定量PCR方法,为豚鼠先天免疫方面研究提供技术支持。     

尼帕病毒侵入宿主细胞机制的研究进展

尼帕病毒属于副粘病毒科病毒,可以引起人和猪等多种动物中枢神经系统、呼吸系统病变的急性、高度致死性传染性病毒性疾病,首次报道于1999年的马来群岛,再次暴发于东南亚,病死率高达40%,并且怀疑可以在人与人之间进行传播。本文综述了尼帕病毒侵入宿主细胞及其F蛋白介导的细胞融合机制的研究进展。     

中东呼吸综合征冠状病毒量子点免疫层析试纸的制备北大核心CSCD

目的制备一种能快速检测中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的量子点免疫层析试纸,以期用于MERSCoV感染检测。方法采用EDC偶联法将羧基化CdTe/ZnSe量子点与抗MERS-CoV RBD的单克隆抗体(mAb/MERS-CoV)共价偶联,通过斑点免疫印迹检验偶联物的活性。以CdTe/ZnSe量子点标记的mAb/MERS-CoV作为荧光标记物,采用免疫层析技术制备量子点免疫层析试纸,用于MERS-CoV检测。并对该方法进行特异性、敏感性评价。结果 CdTe/ZnSe量子点可偶联mAb/MERS-CoV,且偶联物具有良好的生物活性。以其作为荧光标记物建立的量子点免疫层析试纸可特异性检测MERS-CoV假病毒,最低检测限为2×53 TCID50/ml,其他对照病毒检测均阴性。结论制备的MERS-CoV量子点免疫层析试纸具有简便、快速、特异等优点,可用于MERS-CoV感染快速诊断和流行病学调查。     

Z成形术在面部直线瘢痕美容修复中的应用

【目的】探讨Z成形术在面部直线型瘢痕修复中应用的可行性和合理性。【方法】选择2009年7月-2011年7月我院整形科接受Z成形术修复的50例面部瘢痕患者作为治疗组,另选取2007年7月一2009年7月我院整形科接受单纯面部瘢痕切除缝合的47例患者作为对照组。采用OSAS瘢痕评价量表,由两位观察者对瘢痕的颜色、平整度、弹性、宽度进行评判打分,术前和术后、治疗组和对照组进行对比。【结果】术前治疗组和对照组的比较无明显统计学差异（P〉0．05）。对照组术后瘢痕的颜色、平整度、弹性和宽度均有很大改善,与术前相比具有显著统计学差异（P〈0．05）。治疗组术前、术后相比无论从瘢痕的颜色、平整度还是弹性和宽度均有明显的改善,两者相比具有显著统计学差异（P〈0．05）。治疗组术后和对照组术后相比,癜痕颜色更淡、瘢痕更平整、弹性更好、宽度明显缩窄,两者相比具有显著统计学差异（P〈0．05）。【结论】Z成形术应用于面部直线型瘢痕的修复可以明显改善瘢痕的术后效果,是一种操作简便,值得临床推广的手术方法。     

2株欧亚与北美谱系重排H6N8亚型禽流感病毒的遗传进化及分子特征分析北大核心CSCD

目的解析监测中发现的欧亚与北美谱系重组H6N8亚型禽流感病毒的遗传进化及分子特征,为禽流感病毒跨洲际传播及基因重排研究提供支持。方法2019年秋季在图牧吉地区采集雁鸭类粪便样品,分离H6N8亚型禽流感病毒并进行全基因序列测定,分析其遗传进化及分子特征。结果共采集雁鸭类粪便及拭子样品5062份,分离到2株H6N8LPAIV(TMJ43、TMJ120)。遗传进化分析显示,分离株病毒NA与北美的阿拉斯加地区所分离的H3N8亚型AIV的NA节片聚集在同一进化分支,HA和其它6个内部基因节片均属于欧亚进化分支,且两株禽流感病毒分别有不同的重配发生。2株H6N8亚型禽流感病毒为欧亚谱系与北美谱系基因重排毒株,其中N8基因最近一次欧亚与北美基因节片重排发生在2016年。分子特征分析显示,HA蛋白的碱性裂解位点为PQIETR↓GLF,符合低致病性禽流感病毒的特征。在NP蛋白,发生了具有增强鸡禽流感毒力的A184K突变。在TMJ43,NS1蛋白发生了能增强哺乳动物毒力的A/P42S突变。结论在我国内蒙古地区分离的2株H6N8亚型禽流感病毒为欧亚谱系和北美谱系的重排毒株,两毒株均发生了增强家禽和哺乳动物感染能力的突变。表明北美毒株通过候鸟迁徙进入我国,与欧亚谱系毒株发生重配并在野鸟中频繁出现,可为禽流感病毒的跨洲际传播研究提供信息支持。     

荧光定量RT—PCR方法检测感染小鼠不同组织中的HSN1禽流感病毒

目的测定H5N1禽流感病毒感染小鼠各脏器组织中的病毒核酸含量，了解病毒复制与疾病进程的关系，为H5N1禽流感病毒致病机理与防治研究提供技术支持。方法利用建立的荧光定量RT-PCR法对H5N1禽流感病毒感染BALB／c小鼠的不同脏器组织中病毒核酸进行定量检测，观察H5N1禽流感病毒在不同组织中的复制情况。结果利用荧光定量RT-PCR法可从H5N1禽流感病毒感染小鼠后第3d的肺脏、脑、脾脏、肾脏和肝脏组织中检测到不同含量的病毒核酸；而在感染后4d的肺脏、脑和脾脏等组织中的病毒核酸含量开始下降；在感染后第6d，H5N1禽流感病毒核酸在肺脏和脑组织中大量存在外．其余组织中均有少量病毒核酸。结论H5N1流感病毒感染小鼠肺脏和脑组织中病毒核酸含量较高，说明病毒主要在小鼠的肺脏和脑组织中复制。由于荧光定量RT-PCR法可对感染小鼠不同脏器组织中的病毒核酸进行准确定量，可为H5N1禽流感病毒所致疾病的早期诊断、流行病学和致病机理研究提供技术支持。     

立体定向放射治疗肝癌临床研究

目的：探讨立体定向放射治疗（SRT）肝癌的临床疗效。方法：采用立体定向伽玛射线体部治疗系统治疗82例肝癌患者。根据肿瘤的位置、临床靶体积、病人的身体状况与治疗目的，制定放射治疗计划及调整剂量分布。等剂量曲线50-90%，周边照射剂量2500-4800cGy，中位剂量3286.2cGy，分割处方剂量300-800cGy，重复治疗4-12次，隔日治疗。结果：治疗结束后3至12个月　，肝区疼痛症状缓解率为91.7%，生存质量明显提高。65例复查CT或MRI,肿瘤消失10例（15.4%），缩小33例（50.8%）,无变化16例（24.6%），增大6例（9.2%），有效率为90.8%.无放射性肝炎等严重治疗反应发生。结论：SRT使肿瘤局部得到准确的高剂量照射，周围正常组织损伤较小，近期治疗效果较为理想，为肝癌患者提供了一种新的治疗方法。