经肛门先天性巨结肠Ⅰ期根治术麻醉方法的临床研究

目的探讨罗哌卡因骶管阻滞辅以氯胺酮用于小儿经肛门先天性巨结肠I期根治术的麻醉效果及对患儿应激反应的影响。方法48例先天性巨结肠根治术随机分为两组,A组:罗哌卡因骶管阻滞辅以氯胺酮;B组:用羟丁酸钠慢诱导气管插管辅以氯胺酮和维库溴胺。观察麻醉效果,连续监测HR、RR、SpO_2、ECG、有创血压,并分别于基础麻醉后(T_0)、手术开始5分钟(T_1)、1小时(T_2)、2小时(T_3)、术毕(T_4)抽取左侧挠动脉血测定血气、血糖和血浆皮质醇含量。结果A、B两组循环、呼吸均平稳,A组血糖各时点与基础值T_0无明显差异,而明显低于B组各时点(P<0.05),A组皮质醇T_2 T_3高于T_0、T_1和T_4(P<0.05),而明显低于B组各时点(P<0.05)。结论 罗哌卡因骶管阻滞辅以氯胺酮用于经肛门先天性巨结肠I期根治术是比较适宜的麻醉方法,并能较好抑制患儿应激反应。     

人胚胎发育中p75NTR免疫阳性肠神经元的时空分布研究

目的 通过定位和半定量分析胚胎各期肠神经嵴干细胞特异性标记p75NTR（p75）的表达水平，了解p75免疫阳性肠神经元在人类胚胎整个发育过程中的空间和时间的分布变化，为进一步阐明先天性巨结肠的发病机制和初步确定神经干细胞移植治疗先天性巨结肠获取供体细胞来源部位提供研究基础。方法 流产胎儿标本20例，根据胎龄分为早期组（3个月，n=6）和中晚期组（4～9个月，n=14）。全消化道从口端到尾端分为3组：前肠、中肠和后肠。链霉亲合素一过氧化酶法免疫组织化学染色分析各期各部位p75NTR的表达水平。结果 胚胎发育各期（3～9个月）全消化道各部位肌间丛和黏膜下丛均可见肠神经元胞浆和神经纤维内有p75阳性表达，胶质细胞和平滑肌细胞未见有p75阳性表达。肌间丛强阳性表达率早期为44．4％（8／18），中晚期为57．1％（24／42），均高于黏膜下丛相应各期（11．1％，19．0％，P〈0．05）。中晚期肌间丛强阳性表达率在前肠（36／42，85．7％）高于中肠（18／42，42．9％）和后肠（15／42，35．7％）（P〈0．05）。结论 p75阳性肠神经嵴干细胞可能稳定地存在于各期前肠、中肠和后肠的肌间丛和黏膜下丛，而且肌间丛p75NTR表达水平高于黏膜下丛。而在胚胎发育中晚期，前肠肌间丛p75NTR表达水平高于中后肠肌间丛。     

八味锡类散治疗糜烂性直肠炎的疗效观察

目的观察八味锡类散治疗糜烂性直肠炎的临床疗效。方法选取我院诊治的糜烂性直肠炎患者80例,按照完全随机化设计将其分为2组,观察组40例,每日以八味锡类散敷于凡士林纱布上塞肛覆盖直肠糜烂面;对照组40例,对其进行柳氮磺吡啶栓每日1粒塞肛治疗。4周后观察两组患者的临床疗效。结果观察组患者治疗总有效率为95.0%,明显高于对照组患(80.0%),两组差异显著(P0.05)。结论八味锡类散治疗糜烂性直肠炎能够起到标本兼治的作用,其疗效显著优于单纯用柳氮磺吡啶栓治疗的疗效,值得在临床上推广应用。     

基于网络药理学和分子对接的四妙散治疗糖尿病周围神经病变机制研究

目的:利用网络药理学和分子对接技术对四妙散治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)作用机制进行研究，为后续研究提供依据与参考。方法:在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP, http://tcmspw.com/tcmsp.php)筛选四妙散的有效成分和作用靶点。在GeneCards(https://www.genecards.org)和OMIM(https://www.omim.org/)数据库筛选DPN发病相关靶基因。在R软件中计算出四妙散有效成分治疗DPN的潜在作用靶点，并构建药理作用网络。构建潜在作用靶基因蛋白互作网络(PPI),分析其基因本体功能(GO)和京都基因与基因组百科全书通路(KEGG)富集情况，筛选并对接关键活性成分与靶基因。结果:从TCMSP数据库筛选出9个苍术的有效成分，37个黄柏的有效成分，20个牛膝的有效成分，9个薏苡仁的有效成分，去重后共41个有效化学成分。筛选出DPN疾病相关靶基因1839个，发现四妙散治疗DNP共对应71个潜在作用靶蛋白。根据PPI、GO和KEGG富集结果，发现靶基因AKT1和...     

罗比卡因骶管阻滞用于新型Ⅰ期先天性巨结肠根治术的临床研究

新型Ⅰ期先天性巨结肠根治术是经肛门行巨结肠切除术 ,要求肛门松弛良好。以前采用气管插管配合肌松药 ,呼吸易于管理 ,但肛门松弛不理想且易发生插管并发症。我们应用罗比卡因骶管阻滞辅以肌注氯胺酮的麻醉方法进行了临床研究 ,目的是为此类手术寻找一个比较理想的麻醉方法。资料与方法一般资料　ＡＳＡⅠ～Ⅱ级 ,先天性巨结肠患者 2 4例 ,均行新型Ⅰ期先天性巨结肠根治术 ,男 15例 ,女 9例 ,平均年龄 (12 8± 11 3)月 ,体重 (7 6± 3 7)ｋｇ。随机分为两组 ,各12例。Ａ组 :罗比卡因骶管阻滞辅以氯胺酮 ;Ｂ组 :用羟丁酸钠慢诱导气管插管辅…     

硅油防治肠粘连100例临床观察

目的：报告１００例硅油防治腹部手术后肠粘连的临床观察。方法：采用１０００厘沲硅油涂抹的方法用于腹膜损伤面。结果：术后效果良好 ９５例，粘连性不全肠梗阻 ３例，死亡２例。结论：１０００厘沲硅油采用涂抹法有良好的防治术后肠粘连作用。     

一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞的分化

目的建立一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化。方法使用鸡胚在体电转染的方法导入绿色荧光蛋白示踪或核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)特异性吗啉基反义寡聚核苷酸(morpholino)干扰其基因表达。通过分析鸡胚的成活率及转染率确定在体转染的设备参数,之后将胚胎固定、包埋、冰冻切片并进行免疫组织化学染色,在荧光显微镜下观察神经嵴细胞的标记、迁徙及向平滑肌细胞的分化。结果转染电压为7.5V时胚胎成活率和转染率均较高,因此在本实验中作为标准电压。电转后6小时,右侧神经嵴细胞成功表达绿色荧光蛋白。第2天,神经嵴细胞开始向腮弓迁徙并达到第2、3鳃弓。hnRNPA2/B1特异性morpholino可以抑制hnRNPA2/B1的表达从而影响神经嵴细胞的迁徙和分化,导致鳃弓动脉平滑肌层形成障碍,最终破裂。结论鸡胚在体基因干扰技术被成功建立并可用来研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化。     

先天性巨结肠患儿切除肠管肠黏膜ENS干细胞的初步鉴定

目的 我们已经证实p75NTR阳性细胞在HD(Hirschsprung's disease)患儿切除肠管的移形段和扩张段肌间丛及黏膜下丛存在,本研究拟对肠黏膜层进行研究.另外,为了明确Metzger等在肠黏膜活检标本中分离体外培养出的肠黏膜ENS干细胞是胚胎残留还是其他肠黏膜干细胞在诱导分化过程中转化而来,本研究选用了不同时期肠神经干细胞标记物(早期:SOX10和Nestin中晚期:TUJ1;晚期:GFAP),对病理已证实的婴儿组(年龄≤1岁)和幼儿组(年龄＞1岁)HD患儿的切除肠管标本连续切片后进行研究.同时对黏膜层、黏膜下丛及肌间丛的SOX10、Nestin、TUJ1及GFAP强阳性表达率进行综合分析,明确GNCSCs在三层间的存在差异及其与年龄间的关系,以指导临床取材.方法 收集临床诊断及病理确诊的HD患儿手术切除标本15例,分为婴儿组(8例)及幼儿组(7例),长段型(2例)及常见型(13例).沿肠管纵轴各取材一处并将其分为3组:第一组为狭窄段肠管,第二组为移行段肠管,第三组为扩张段肠管.对照组选用切除扩张段肠管的近端肠管,阴性对照应用TBS缓冲液作为一抗.应用S-P法分析四个指标在各标本、各部位的表达情况.结果 SOX10、Nestin和TUJ1在移行段和扩张段黏膜层均有强阳性表达,且在黏膜固有层呈散在分布,但主要位于近黏膜肌层,GFAP在移行段和扩张段黏膜层未见阳性表达.肌间丛SOX10、Nestin、TUJ1和GFAP免疫阳性细胞的强阳性表达率高于黏膜下丛,黏膜下丛强阳性表达率高于黏膜层.婴儿组患儿在扩张段肌间丛SOX10和Nestin强阳性表达率较幼儿组高.婴儿组扩张段黏膜层SOX10和Nestin强阳性表达率较幼儿组高.结论 在HD患儿有神经节段肠管肠黏膜可能存在ENS干细胞或前体细胞,且在肠黏膜固有层呈散在分布,但主要定位于近黏膜肌层.SOX10、Nestin、TUJ1和GFAP在HD患儿肌间丛表达水平较黏膜下丛高,而黏膜下丛表达水平较黏膜层高.婴儿组扩张段黏膜层SOX10和Nestin表达水平可能较幼儿组高,随年龄增长可能逐渐降低.初步判定存在于肠黏膜的ENS干细胞或前体细胞可能来源于肠神经嵴细胞.

Abstract：

Objective To identify the enteric nervous system (ENS) stem cells in intestinal mucosa of the patients with Hirschsprung's disease (HD). Methods Fifteen patients were pathologically diagnosed with Hirschsprung's disease. They underwent surgery to remove the aganglionic intestines.The removed intestines were collected for this study. Of the 15 patients, 8 were infants (age≤1 year)and 7 were toddlers (age＞ 1year). Two were long-segment HD, and 13 were short-segment HD.Three pieces of tissues were collected from the stenotic segment, transitional zone and dilated segment of the removed intestines. The intestines proximate to the dilated segment were selected as controls.Immunohistochemical staining of stem cell markers including SOX10, Nestin, TuJ1 and GFAP was performed to indentify the ENS stem cells in intestinal mucosa. The TBS buffer was used as the negative control of the primary antibody. The S-P method was applied to analyze the expressions of the 4stem cell markers through the intestine. Results The expressions of SOX10, Nestin, and TUJ1 in the mucosa of the transitional zone and dilated segment were strong. And scattered SOX10, Nestin, and TUJ1 positive cells were observed in the lamina propria. But most of the SOX10, Nestin, and TUJ1 positive cells located in mucosa closed to the muscularis mucosa. The expression of GFAP in the mucosa of the transitional zone and dilated segment was negative. The expressions of SOX10, Nestin,TUJ1 and GFAP in myenteric plexus were stronger than those of submucosal plexus (SOX10 expression, infant 50% vs 31.3%, toddler 35. 7% vs 21.4%; Nestin expression, infant 43. 8% vs 37. 5%,toddler 28. 6% vs 14. 2%; TUJ1 expression, infant 37. 5% vs 18. 5%; toddler 28. 6% vs 28. 6%;GFAP expression 25.0 % vs 18. 5 % ; toddler 57. 1% vs 35. 7 % ; P ＜ 0. 05 ). The expressions of SOX10, Nestin and TUJ1 were stronger in submucosal plexus than those in mucosa (SOX10 expression, infant 31.3% vs 25. 0%, toddler 21.4% vs 7. 1% ; Nestin expression, infant 25. 0% vs 18. 8%,toddler 14. 3% vs 14. 3%; TUJ1 expression, infant 18. 5% vs 12. 5 %, toddler 28. 6% vs 7. 1%; P＜0. 05). The expressions of SOX10 and Nestin in myenteric plexus of the dilated segment in infants were stronger than thoset in toddler (SOX10, 75. 0% vs 42. 8% ; Nestin, 62. 5% vs 42. 8%, P＜0. 05). The expressions SOX10 and Nestin in mucosa of the the dilated segment in infants were stronger than those in toddler (SOX10, 37. 5% vs 14. 3%; Nestin, 25. 0% vs 14. 3%, P＜0. 05). Conclusions The ENS stem cells may exist in the mucosa of the ganglionic intestines of HD patients, whichare scattered and mostly located in the mucosa near muscularis mucosa. In HD patients, the expressions of SOX10, Nestin, TUJ1 and GFAP in myenteric plexus are higher than those in submucosal plexus. However, the expressions of SOX10, Nestin, TUJ1 and GFAP in the submucosal plexus are higher than those in the mucous layer. The expressions of SOX10 and Nestin in mucosa of the dilated segment in infants are higher than those in toddlers, and it decreases with age. These observations suggest the ENS stem cells or precursor cells in the gut mucosa may be derived from the gut neural crest cells.     

Welch法超低位切除直肠癌的临床应用

目的:探讨中下段直肠癌保留肛门括约肌功能手术的安全性及效果。方法:20例中下段直肠癌患者实施拖出式Welch法超低位切除术,即肿瘤切除后使直肠远端外翻,近端结肠经外翻的直肠拖出,于肛门外行结肠直肠一期吻合,待吻合确实后还纳入肛门内。结果:肿瘤局部复发2例(10%)均为DukesC期。术后1年排便次数、控便机能正常及良好者17例(85%),较差者3例(15%)。5年生存率70%(14/20)。结论:选择合适的病例,拖出式吻合术可满足根治性肿瘤切除,提高保肛率,获得较高的生存率及生活质量。     

先天性十二指肠闭锁及狭窄19例诊断治疗分析

十二指肠闭锁及狭窄是先天性十二指肠梗阻最主要的病因 ,1978年 4月至 1999年 10月我院共收治新生儿及婴幼儿患者 19例 ,均经手术证实 ,现报告如下。一般资料 :19例患儿均系足月产 ,女 6例 ,男 13例 ,出生体重 <2 0 0 0 ｇ 8例 ,～ 2 5 0 0 ｇ 9例 ,2例出生体重不详。其中 12例