金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药机制的研究进展

万古霉素是治疗耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的首选药物，随着临床万占霉素用量增加而产生的万古霉素敏感性降低的金黄色葡萄球菌感染使治疗变得十分困难，引起医学界的广泛关注。现就金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药机制作一综述。     

脑膜炎奈瑟菌的候选蛋白质疫苗

脑膜炎奈瑟菌是引起脑膜炎、菌血症等侵袭性疾病的重要病原菌，也可以无症状的鼻咽部带菌状态存在。分为13个血清群，但只有6个群（A，B，C，W-135，Y和X）与其致病性有关。目前应用的疫苗主要是荚膜多糖疫苗和多糖蛋白结合疫苗。两者本质上都属荚膜多糖抗原，覆盖的血清群有限，无法做到对B群脑膜炎奈瑟菌的预防，因此发展通用蛋白质疫苗势在必行。能作为候选疫苗的具有免疫原性的蛋白质需具备以下特点：在大多数菌株中都表达且结构保守；可诱生杀菌抗体或保护性抗体     

某院近3年金黄色葡萄球菌分布特征与耐药性分析

目的分析近3年本院住院患者金黄色葡萄球菌分离株的临床分布及耐药性特点。方法对2004-2006年住院患者各类标本中分离到的金黄色葡萄球菌,采用Vitek-32全自动微生物分析仪进行鉴定和药敏试验,并用WHONET5.3软件对药敏结果进行统计分析。结果3年共分离金黄色葡萄球菌373株,主要分布于ICU、呼吸内科、肿瘤科等临床科室;主要来源于痰、脓液、伤口分泌物、血液等标本;其中共分离出249株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,MRSA菌株除对万古霉素、利奈唑烷、利福平敏感性较高外,对其他种类抗生素耐药率均大于65%以上,且耐药率均高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）。尚未发现耐万古霉素金黄色葡萄球菌。结论金黄色葡萄球菌中MRSA检出率呈逐年上升趋势,且多为多重耐药,有明显的临床分布特征,临床医生应根据药敏结果合理选择抗生素,延缓金黄色葡萄球菌耐药性的产生。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性分析

目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株（10.7%）,SCCmecⅢ型70株（83.3%）,SCCmecⅣ型5株（6.0%）.所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异（P＞0.05）,对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型（P＜0.05）.结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.     

合肥地区耐多药结核分枝杆菌异烟肼、链霉素及 乙胺丁醇耐药相关基因位点表达研究

目的研究耐多药结核分枝杆菌异烟肼(INH)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)耐药相关基因位点的表达情况。方法选取该院2013年1月至2017年12月临床分离的101株耐多药结核分枝杆菌,利用测序法和基因芯片法分别检测INH、SM和EMB耐药相关基因及突变位点。结果 101株耐多药结核分枝杆菌中对SM耐药率69.3%;对EMB耐药率51.4%;对SM和EMB二者均耐药的耐药率44.5%。基因芯片法检出95例INH耐药相关基因突变,其中katG基因315M位点突变率为77.8%;inhA基因-15M位点突变率为89.4%。检出64例rpsL SM耐药相关基因,其中43M位点突变率为89.0%;88M位点突变率为11.0%。检出47例embB EMB耐药相关基因,以306M2位点突变为主,突变率为68.0%。测序法检出98例INH耐药相关基因突变,katG基因突变以315位点为主突变率为73.4%;inhA基因突变以-15位点为主突变率为87.7%;oxyR-ahpC基因-12和-10位点突变率分别为10.2%和8.2%。检出68例SM耐药相关基因突变,rpsL基因以43位点为主突变率为86.8%;rrs基因512、513、516位点突变率分别为5.9%、8.8%、8.8%。检出50例EMB耐药相关基因embB以306位点为主突变率为88.0%。结论耐多药结核分枝杆菌INH、SM及EMB耐药基因位点表达可作为结核分枝杆菌临床检测耐药性的有效依据,为提高耐多药结核分枝杆菌耐药性检测的敏感度,应将INH耐药相关oxyR-ahpC基因和SM耐药相关rrs基因纳入我国快速分子诊断产品中。     

MRSA在ICU分布情况调查与随机扩增多态性DNA同源性分析

目的:监测ICU医护人员、住院患者,及环境中MRSA的携带及分布情况,以提出针对性预防与控制措施。方法:对本院ICU的20位医护人员、8例住院患者的手、咽和鼻前庭等部位,及ICU环境中的物体表面和空气同时进行采样,采用免疫富集-显色培养基分离MRSA,应用VITEK 32全自动微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验;对MRSA进行随机引物扩增多态DNA检测并进行同源性分析;比较MRSA的耐药谱分型和随机扩增多态性DNA基因分型之间的差异,判断医护人员、住院患者及环境中分离的MRSA的相关性。结果:共检出31株MRSA,20位医护人员11位检出15株MRSA,8位患者5位检出9株MRSA,分离于同一个体不同部位的重复分离株经随机扩增多态性DNA同源性分析均为同一克隆菌株。52份环境物体表面检出7株MRSA。根据随机扩增多态DNA聚类分析可以将检出的MRSA分为3个类型。结论:医护人员MRSA带菌率较高,部分医务人员、住院患者和环境中分离的MRSA有较高的同源性,ICU存在人与人和人与环境之间的MRSA传播。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的快速检测方法

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）具有对多种抗生素耐药的广谱耐约特征，是临床常见的、致病性强的耐药性细菌。传统敏感性检测MRSA的方法程序多、繁杂费时，且结果滞后，因此快速有效的MRSA检测显得尤为重要。随着免疫学和分子生物学等多学科理论技术的不断渗人，MRSA的快速检测技术取得了新的进展。现就MRSA的快速检测方法作一综述。     

产超广谱β-内酰胺酶菌株感染特点及优化抗生素给药方案

随着超广谱β-内酰胺酶类抗生素在临床上广泛使用,抗生素的选择压力日益增加,产超广谱β-内酰胺酶（extended—spectrumβ-lacta2mases,ESBLs）细菌的感染已呈世界性流行。产ESBLs细菌的出现给临床抗感染治疗带来众多问题：死亡率增高、住院时间延长、治疗经费上升、医生的治疗选择越来越少等,产ESBLs细菌感染已成为一个全球性问题。     

Tumstatin-EGFP真核表达载体构建及稳定转染CHO细胞系的建立

目的 构建重组tumstatin-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的分泌型真核表达载体质粒,建立稳定转染的中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1).方法 利用重叠多聚酶链反应(PCR)技术从pGEM-T/STL质粒和pEGFP-C2质粒中扩增出STL-EGFP,用DNA重组技术将片段定向插入pIRESneo3质粒中,经酶切和序列验证正确后,用lipofectamine 2000转染CHO-K1细胞,通过G418筛选建立稳定转染的CHO细胞系,用逆转录-PCR、Western blot检测tumstatin-EGFP的表达,用倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达.结果 重组真核表达载体正确构建并在CHO细胞获得稳定表达,tumstatin-EGFP基因整合入细胞基因组DNA,培养液上清有融合蛋白tumstatin-EGFP的分泌,绿色荧光蛋白的表达高达95%以上.结论 成功构建了质粒PIRESneo3-STL-EGFP,获得稳定表达tumstatin-EGFP的细胞系.