人巨细胞病毒UL135蛋白结合蛋白的酵母双杂交筛选

目的 利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选与人巨细胞病毒(HCMV)UL135编码蛋白相互作用的蛋白.方法 将成功构建的酵母诱饵表达载体pGBKT7-UL135转化到酵母菌AH109中,再将人胎脑文库DNA转化到含有pGBKT7-UL135的酵母细胞中,筛选与HCMV UL135编码蛋白相互作用的细胞蛋白,并对阳性克隆进行测序和生物信息学分析.结果 最终确认60个克隆与HCMV UL135编码蛋白相互作用,其中2个克隆与Thy-1高度同源.结论 成功应用酵母双杂交系统筛选出与HCMV UL135编码蛋白相互作用的蛋白,其中Thy-1在HCMV感染致病过程中可能起重要作用.     

理化因素对旋毛虫感染性的研究进展

旋毛形线虫(Trichinella spiralis)简称旋毛虫,通过幼虫在肌细胞中寄生致病,是一种严重危害人体健康的寄生虫病[1]。目前全世界198个国家(或地区)中66个有旋毛虫病[2],1964—2003年在我国     

动脉化疗栓塞联合射频消融与手术切除对早期HCC患者生存率影响的Meta分析

目的 评价动脉化疗栓塞(TACE)联合射频消融(RFA)与手术切除(SR)治疗早期肝细胞性肝癌(HCC)的有效性与安全性.方法 计算机检索PubMed、Medline、Embase、中国生物医学数据库、万方数据库、维普数据库和中国期刊全文数据库.收集2000年1月至2016年3月TACE联合RFA(TACE-RFA组)与SR(SR组)治疗早期HCC的前瞻性或回顾性研究.结果 纳入4个随机或非随机同期对照试验共697例患者,TACE-RFA组患者的1、3年总体生存率(OS)为94.40％ (337/357)、59.94％(214/357),SR组为92.35％ (314/340)、68.24％ (232/340),两组比较差异无统计学意义(OR=1.43,95％CI:0.79～2.60,P=0.24,I2=0％;OR=0.77,95％CI:0.56～1.07,P=0.12,I2=45％).TACE-RFA组患者与SR组的1年无复发生存率(RFS)比较差异无统计学意义(81.51％ vs.80.29％,OR=1.07,95％CI:0.73～1.57,P=0.74,I2=0％);但TACE-RFA组患者的3年RFS明显低于SR组(29.97％ vs.44.41％,OR=0.56,95 ％CI:0.40～0.77,P=0.000 5,I2=0％).TACE-RFA组患者的严重并发症发生率明显低于SR组(1.43％ vs.5.07％,OR=0.23,95 ％CI:0.10～0.54,P=0.000 7,I2=10％).结论 外科手术较TACE-RFA能明显降低早期HCC的远期复发率,且严重并发症发生率较手术科手术低.     

黄疸患儿感染的人巨细胞病毒UL149基因编码产物结合多肽的氨基酸序列分析

目的: 初步确定能够与黄疸患儿感染的人巨细胞病毒UL149基因编码产物具有较强结合能力的多肽,并分析这些多肽氨基酸序列的特点.方法: 应用多肽文库展示技术筛选与来源黄疸患儿的人巨细胞病毒临床低传代分离株UL/b'区基因中的UL149基因编码产物结合的多肽克隆,对相应的多肽氨基酸序列进行同源性比较,并与蛋白数据库中已知的蛋白序列进行比较.结果: 与黄疸患儿感染的人巨细胞病毒UL149基因编码产物具有结合能力的多肽序列之间具有较高的同源性,氨基酸序列中存在较为集中的区域,即D/E-D/E-G-W/F/I/L;与已知蛋白数据库进行比较,发现与人免疫球蛋白重链可变区关系密切,亦与丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、人巨细胞病毒的立刻早期基因UL37、gpB等存在结合关系.结论: 在黄疸患儿感染的人巨细胞病毒UL149基因编码产物可能与人巨细胞病毒的gpB、立刻早期基因UL37等具有联合作用,并且可能参与HCMV的免疫逃避机制.     

23921例唐氏综合征产前血清学筛查结果分析

目的:探讨唐氏综合征(Down's syndrome,DS)产前血清学筛查的临床应用价值。方法:用全自动时间荧光免疫分辨仪对23921例妊娠14～21周的孕妇进行血清甲胎蛋白(AFP)、游离绒毛膜促性腺激素β亚基(Free-β-HCG)、游离雌三醇(uE3)检测,结合软件进行风险评估,对筛查阳性孕妇进行羊水细胞染色体检查以确诊。结果:23921例孕妇中,DS高风险1494例,其中1048例作了羊水细胞染色体核型分析。检出异常核型66例,异常率为6.30%。确诊21-三体11例,确诊阳性率为1.05%。非高龄孕妇胎儿的异常率(56/776,7.22%)明显高于高龄(≥35岁)孕妇胎儿的异常率(10/272,3.68%),P=0.04。结论:产前血清学筛查是预防唐氏综合征等染色体异常患儿出生的有效方法,同时结合其它检查方法可提高产前筛查效果。     

人类巨细胞病毒UL147基因在临床低传代分离株中的多态性

目的: 探讨人类巨细胞病毒(HCMV)UL147序列在临床患儿低传代分离株中的多态性及其与临床疾病的关系.方法: 对23株HCMV临床低传代分离株及2例同年龄组健康儿尿液HCMV-DNA采用PCR方法检测, 阳性健康儿尿液进行HCMV-UL147基因全序列测定及分析.结果: 25株分离株147 ORF长度为464-480 bp,序列呈现较高的多态性, 所有研究的标本中没有序列与Toledo完全一致.序列差异多位于序列的5'端, 二级结构预测表现为2种类型, 在重要的蛋白质功能区氨基酸序列高度保守.未发现黄疸、小头畸形、先天性巨结肠等不同疾病类型的序列之间的差异.结论: UL147基因可能在HCMV致病中起一定的作用.     

针刺“外风府”穴对椎-基底动脉血流速度的影响

椎-基底动脉系统血流速度异常会导致患者出现头晕等症状,脑血流图检测能较客观地反映其供血状况,不仅是该病的常用检查诊断方法,还可作为疗效评价的客观指标.2007年3月～2008年2月,笔者采用针刺"外风府"穴的新方法(简称针刺法)治疗该病30例取得满意疗效,现报告如下.     

人巨细胞病毒UL/b'区基因多态性

人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）在人群中普遍感染,在新生儿中,HCMV先天感染可引起黄疸性肝炎、先天性巨结肠、小头畸形等各种消化系统和神经系统畸形。导致HCMV不同致病性的发病机制还不十分清楚,一方面与宿主免疫功能,即有效的细胞及体液免疫应答有关;另一方面与病毒的数量、入侵部位及病毒自身的基因结构相关,尤其是与病毒毒力、组织嗜性和病毒逃避机体免疫攻击能力密切相关的基因关系密切。对于HCMV基因多态性的研究可以在基因层面揭示不同来源临床株的结构特点,对全面认识HCMV基因组和进一步深入研究基因组功能具有重要意义,成为HCMV研究的热点领域之一。近年来,国际多个研究小组对HCMV临床株广泛存在而旧有实验室株缺失的UL/b’区基因进行了较系统的研究,取得了较快的进展。此专题对这方面的研究进展进行概要介绍,以供同行了解与深入研究。     

人巨细胞病毒UL135基因在临床低传代分离株中的多态性研究

目的：研究人巨细胞病毒（HCMV）UL135基因编码序列在临床低传代分离株中的多态性，探讨HCMV基因多态性与其感染引起不同临床疾病之间的关系。方法：对29株经荧光定量PCR方法检测HCMV．DNA为阳性的临床低传代分离株的细胞培养上清液进行HCMVUL135全序列PCR扩增，并对PCR扩增阳性的25例标本进行序列测定及分析。结果：29株临床低传代分离株有25株PCR扩增阳性。25株分离株UL135开放读码框架（0RF）长度均与Toledo株相同，其核苷酸的变异率为0．1％-2．6％。与Toledo株相比，部分分离株具有氨基酸翻译后修饰位点的新增或缺失。25株临床分离株UL135蛋白质二级结构预测结果显示了第28位、313—317位、161—163位、171位氨基酸均有蛋白质结构二级的改变。结论：25株HCMV临床低传代分离株UL135基因及其编码产物的氨基酸序列比较保守，但仍存在一定程度的多态性，未发现UL135基因的变化与HCMV先天感染导致的不同疾病存在着相关联系。     

基因重组人巨细胞病毒PPUL32蛋白在诊断中的应用

为组建可在诊断中应用的高纯度、高效价基因工程抗原,我们在同一克隆中同时表达了人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus HCMV)PPUL32蛋白的两个抗原决定簇基因,在诊断中取得满意的结果。 材料和方法 1.克隆 A:表达HCMV PPUL32蛋白位于UL32区第1783～1842核苷酸的抗原决定簇基因。 2.克隆 B:表达HCMV PPUL32蛋白位于UL32区第3070～3144核苷酸的抗原决定族基因;克隆C和D分别表达此基因的二个和三个拷贝。