人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定

目的：从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2（ CDC2）,并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法：从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2 cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和 XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果：RT-PCR扩增出约894 bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论：从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。     

聚合酶链反应和免疫学方法检测乙型肝炎病毒为比较

本文应用聚合酶链反应(PCR)检测30例至少有一项免疫学指标(HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg 和 HNeAb)阳性的乙肝病人血清中的乙型肝炎病毒 DNA.结果表明,在30例血清中有18例 PCR 呈阳性反应,并且在14份 HBeAg 阳性的血清中有11份 PCR 阳性,两者呈平行关系.PCR 检测乙肝病毒 DNA有突出的敏感性和特异性;并且 PCR 检测的是乙肝病毒 DNA 本身,可反映出乙型肝炎病毒是否处于复制状态,这对临床治疗具有很重要的指导意义.     

引起急性结膜炎的7型腺病毒

为了研究长春市1988年7月流行的急性结膜炎的致病原,在10例急性结膜炎患儿的眼分泌物中有7例分离出腺病毒,采用中合试验,限制性内切酶图谱分析,确定腺病毒血清型别为7型,基因组型为7d.临床观察本型干扰素治疗效果好.     

老年人的居住地域与其营养需求

各种社会因素、经济状况及生理、心理状态均可影响老年人的饮食习惯,进而影响其规定饮食的需求。其中包括经济收入水平、身体情况(医疗与牙齿保健),与社会隔离相关的心理状态、种族、性别以及其它象文化水平、饮食习惯的专门知识、用药、饮酒和食品购买的难易等。 有资料表明,农村老年人的营养摄入量明显低     

一氧化氮与巨噬细胞的免疫调节

一氧化氮参与许多生理和病理过程，免疫系统中的巨噬细胞在一些细胞因子和内毒素的诱导下可以产生大量的一氧化氮，同时一氧化氮又可以影响其它细胞因子的合成与释放。一氧化氨的合成与发挥生物效应又与免疫调节过程中的信息传递有直接的关系。巨噬细胞在细胞内、外环境变化时可通过一氧化氮产生免疫保护、免疫损伤和免疫调节作用。     

多巴胺D1受体在视神经保护中的研究进展

多巴胺是一种中枢和外周神经系统的神经递质,在中枢神经系统中,多巴胺能神经传递功能的紊乱可以导致多种神经精神疾病,帕金森病即是其中一种典型的疾病,另外还包括精神分裂症、注意力缺陷多动综合征和药物成瘾等疾病[1-3]。多巴胺主要是与相应的受体结合而发挥生物学功能,而D1受体是多巴胺受体中研究最广泛的一类。近来实验证明,D1受体激活后,     

重组人神经肽Y融合蛋白的表达、纯化及生物信息学分析研究

目的 在大肠杆菌中表达人神经肽Y,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析.方法 取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-NPY转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni2+-NTA亲和层析纯化.然后利用相关在线软件进行生物信息学分析NPY蛋白.结果 经IPTG诱导含有pET28a-NPY重组质粒的DE3菌,表达出重组人NPY融合蛋白.重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白.经相关在线软件分析后获得了NPY的相关生物学特性.结论 重组质粒pET28a-NPY在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对NPY蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础.     

C-MYC基因与老年胃癌及直肠癌的关系研究

目的：研究老年人胃癌和直肠癌中的Ｃ－ＭＹＣ基因扩增情况,方法用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）测定８４例老年胃癌和直肠癌患者中的Ｃ－ＭＹＣ基因,通过激光密度扫描仪对琼脂糖凝胶ＥＢ染色底片进行积分光密度分析。结果正常组织无Ｃ－ＭＹＣ扩增,Ｃ－ＭＹＣ／Ｎ＋Ｌ－ＭＹＣ比值９５％可信区间为０．０８６９－０．６２５７,胃癌组织Ｃ－ＭＹＣ基因扩增阳性率为６９．２％,的癌组织的Ｃ－ＭＹＣ基因扩增阳性率为６２．５％,８４     

低剂量电离辐射对小鼠派伊氏板细胞Bcl-2转录水平的影响

目的：研究不同剂量X射线全身照射对小鼠派伊氏板细胞凋讯的影响及作用机理。方法：采用反转录PCR法检测了派伊板细胞Bcl-2转水平的变化,并用琼脂糖凝胶电泳,流式细胞术检测了不同剂量X射线全身照射后小鼠派伊氏板细胞DNA及凋亡小体的改变。结果：2GyX射线身照射使派伊氏板细胞凋亡增多,Bcl-2转录水平表达下降,而75mGyX射全身照射使派伊氏板细胞凋亡减少,同时Bcl-2转录水平表达升高,结论：Bcl-2参与了幅射诱导小鼠派伊氏板细胞凋亡的基本调控。     

重组人神经肽Y受体Y2融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究

目的 在大肠杆菌中表达人神经肽Y Y2受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析.方法 取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y2转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western 印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni~(2+)-NTA亲和层析纯化.然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y2受体蛋白.结果 经IPTG诱导含有pET28a-Y2重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y2融合蛋白.重组蛋白经Ni~(2+)-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白.经相关在线软件分析后获得了Y2受体的相关生物学特性.结论 重组质粒pET28a-Y2在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y2受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础.