多重探针连接依赖式扩增技术检测矮小儿童生长激素受体基因分析

目的:探讨矮小儿童生长激素受体(GHR)基因的变异情况。方法:选择矮小儿童96例,其中生长激素缺乏症(GHD)67例、特发性矮小(ISS)29例,另选择生长发育正常儿童23例,采集外周血,应用多重探针连接依赖式扩增(MLPA)技术检测GHR基因10个外显子,并分析比较GHR外显子的基因型及等位基因频率分布情况。结果:GHR基因外显子1~10均未发现信号升高,外显子1、2和4~10也未发现信号降低或缺失等异常情况;GHR外显子3信号降低和缺失的发生率在GHD组分别为34.3%、1.5%,在ISS组为17.2%、3.4%,在正常对照组为26.1%、8.7%;3组儿童GHR外显子3的3种基因型及等位基因频率的差异均具有统计学意义。结论 GHR基因外显子3在矮小及正常儿童中均存在多态性,GHR基因对身高的影响及其生物学功能有待进一步探讨。     

深圳市神经管畸形的流行病学研究

目的对深圳市2003年-2012年神经管畸形(简称NTDs)的发生情况进行流行病学分析。方法基于深圳市出生缺陷监测数据,计算2003-2012年无脑畸形、脊柱裂、脑膨出逐年围生期发生率,单因素分析危险因素;计算2010-2012年包括28周前NTDs终止妊娠病例的总发生率。结果深圳市NTDs围生期发生率从2003年的5.91/万下降到2012年的2.20/万,呈显著性下降趋势,单因素分析:母亲低龄(20岁)、流动人口、女孩、多胎、居住地区等是围生期NTDs的危险因素。孕母各年龄组(高龄组除外)、流动人口NTDs发生率10年间呈显著性下降趋势,计算2010-2012年包括28周前终止妊娠病例的NTDs总发生率为9.90/万,仅低龄孕母、流动人口、多胎是NTDs发生的高危因素。结论 2003-2012年深圳市围生期NTDs发生率呈显著下降趋势,产前筛查、产前诊断是主要影响因素。包括28周前终止妊娠病例使NTDs总发生率上升,预防重点人群是流动人口、低龄孕母。     

家族性和散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变比较

目的比较家族性和散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变发生率。方法收集176例经病理组织学检查明确诊断为乳腺癌女性患者,依据乳腺癌家族史将患者分为家族性乳腺癌(92例)和散发性乳腺癌(84例)。采用PCR/DNA方法比较两组患者BRCA1基因突变发生率,同时比较发病年龄及病理类型的差别。结果 (1)家族性乳腺癌患者发病年龄较散发性明显提早;(2)家族性乳腺癌患者以乳腺黏液癌为主,而散发性乳腺癌则以导管原位癌为主;(3)家族性乳腺癌患者BRCA1基因突变发生率为58.7%,而散发性患者为14.3%,差异具有统计学意义(P=0.001)。结论家族性乳腺癌和散发性乳腺癌患者发病年龄及病理类型存在一定程度的差别,这可能与两组患者携带BRCA1基因突变发生率不同有关。     

子宫颈感染人乳头瘤病毒基因亚型分析

目的 了解深圳地区妇女人群子宫颈感染HPV 基因亚型流行特征.方法 应用PCR结合反向寡核苷酸探针斑点杂交技术对1455例HPV阳性感染者进行基因亚型检测.结果 1455例阳性感染者,单一型感染1277例,占87.8%,混合型感染178例,占12.2%;前5位HPV高危基因亚型分别是HPV 16、52、58、18、33...     

MLPA技术在22q11.2微缺失综合征产前诊断中的应用

目的:采用多重连接探针扩增技术(MLPA)与荧光原位杂交技术(FISH)对22q11.2微缺失综合征(22q11.2DS)胎儿进行检测。方法:采集22q11.2DS胎儿羊水及其父母外周血,提取DNA后采用MLPA进行检测;同时取胎儿羊水、父母外周血进行常规染色体核型分析;使用FISH探针(TUPLE1/ARSA)对羊水细胞进行杂交检测。结果:MLPA检测结果显示22q11.2DS胎儿22q11.21区域196、208、371信号均降低,胎儿父母检测均为正常;常规染色体核型分析均未见异常;应用FISH技术可检测到胎儿TUPLE1基因缺失。结论:MLPA技术在诊断22q11.2DS中较FISH技术可提供更多的信息。     

不良孕产史夫妇男性精子染色体畸变情况研究

目的 研究男性精子染色体畸变状况以及生育情况。方法 采用三色荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法,利用DNA染色体计数探针(chromesome enumeration DNA probes,CEP)X、Y、18与二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)处理过的有不良孕产史夫妇(研究组)的男性(15例)精子核杂交,计数杂交信号,与对照组(生育过健康子女符合二胎生育指标想再生育的8名男性)进行比较。结果 研究组精子染色体X、Y、18二体率、X+Y缺体比率高于对照组(P<0.05),研究组精子的非整倍体染色体异常率高于对照组;研究组在避免接触有害物质和补充叶酸片剂等3～6个月后再行检查精子染色体X、Y、18的二体率和二倍体率,显示有所降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FISH技术是一种快速、准确、简单、实用性强的检测精子染色体畸变的方法。     

人乳头瘤病毒基因型与宫颈病变关系的研究

目的:了解人乳头瘤病毒(HPV)感染基因型分布,探讨不同HPV基因型感染与宫颈病变的关系。方法:收集门诊就诊者宫颈脱落细胞行液基薄层细胞检测并按照TBS分类标准进行细胞学诊断,同时应用低密度基因芯片技术进行HPV检测和基因型分析(15种高危基因型、5种低危基因型和Cp8304基因)。结果:862例标本中,共检出19种HPV基因型。宫颈细胞学正常(NILM)组前3位HPV基因型是HPV11、6和42,HPV单一与多重感染分别占75.86%和24.14%;细胞学异常组居前3位的HPV基因型是HPV16、52和58,HPV单一与多重感染分别占71.11%和28.89%,该组以高危型HPV感染为主(88.71%)。细胞学正常组和异常组HPV感染率分别是11.28%和64.66%(χ2=299.33,P<0.05)。随宫颈病变级别递增,HPV感染率呈增高趋势。结论:不同的HPV基因型具有不同的致病力,HPV多重感染与宫颈病变的发生、发展密切相关,HPV感染率随宫颈病变程度增加而增加。     

不良妊娠结局孕妇血清学指标的判别分析

目的:通过孕妇血清学指标建立不良妊娠结局的预测模型。方法:采用回顾性调查的方法,对2008年～2010年深圳地区唐氏综合征筛查神经管缺陷高风险118例孕妇不良妊娠结局的血清学指标进行逐步判别,建立相应的判别模型。结果:118例中,随访确诊61例不良妊娠。逐步判别分析将孕妇年龄及甲胎蛋白水平纳入判别模型后判别效果最好;回顾性误判分析显示有17例发生误判,总误判率为14.4%,总准确率为85.6%;而交叉核实法显示有18例发生误判,总误判率为15.3%,总准确率为84.7%。判别模型的灵敏度为83.3%,特异性为90.0%。结论:利用孕妇血清学指标建立判别模型,有利于提高高风险孕妇不良妊娠结局预测的准确性,有助于指导临床诊断。