富血小板血浆与地塞米松对人骨髓基质干细胞成骨分化作用的对比研究

目的 通过系统评价富血小板血浆(PRP)与地塞米松(DEX)对人骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响,为PRP临床骨组织修复应用提供更为可靠的实验依据.方法 将体外培养的BMSCs分为单纯血清培养组(FCS组)、PRP诱导组和DEX组,通过相差显微镜观察碱性磷酸酶(ALP)染色、钙盐沉积染色,RT-PCR法检测碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、Ⅰ型胶原(Coll-Ⅰ)、骨连接蛋白(ON)、中心结合因子(Cbfα1)mRNA表达系统评价PRP的成骨分化能力. 结果 PRP抑制了BMSCs向三角形、多角形细胞转变,DEX则诱导BMSCs向三角形、多角形细胞转变;PRP抑制了ALP分泌,钙盐沉积;DEX增加了ALP分泌,促进钙化结节形成.与FCS组相比,DEX促进了ALP、OCmRNA表达,PRP抑制了ALP、OC mRNA表达;PRP、DEX对Coll-Ⅰ、ON、Cbfα1 mRNA表达均无影响.结论 在本实验条件下,PRP对人BMSCs体外成骨分化的直接作用是抑制效应;在体外PRP并不能代替DEX作为人BMSCs成骨分化的诱导因子.     

转染人骨形态发生蛋白在兔骨髓间充质干细胞中的表达

目的采用基因转移技术将人骨形态发生蛋白7(hBMP-7)基因转染兔骨髓间充质干细胞(BMSc),检测外源基因的表达.方法常规分子生物学技术构建hBMP-7逆转录病毒载体,制备含目的基因的重组逆转录病毒液,感染兔骨髓间充质干细胞,使用原位杂交以及免疫组织化学的方法检测hBMP-7在BMSc中的表达.结果原位杂交和免疫组化检测经hBMP-7基因转染的BMSc中出现阳性结果,未转染的BMSc中未见阳性结果出现.结论采用逆转录病毒介导的方法可以将hBMP-7转染至BMSc中,并有外源性基因的表达.     

伤害控制骨科学--多发伤治疗最新观点

挽救生命、减少伤残仍是多发伤救治的基本观点，治疗的形式和时机却在逐渐地变化、修正，伤害控制原则是一项新的多发伤治疗策略，其在创伤骨科的应用产生了伤害控制骨科学。伤害控制骨科学包括三步，第一步：早期临时固定不稳定性骨折、止血，如果需要，作颅内减压；第二步：在ICU内复苏病人使其各项生理指标达到理想状态；第三步：病人病情稳定后进行最终的正式手术固定骨折。伤害控制骨科学适应证：血液动力学不稳定及极度危重的多发伤病人应遵循伤害控制原则；对临界病人，仍可早期手术正式固定骨折，但如果手术过程中任何时间发生病情恶化，手术应该立即改为伤害控制。伤害控制骨科学是一项正在发展、完善的技术，将来研究需要进一步验证既有观点的有效性，以减少多发伤病人ARDS和MOF的发生。     

前臂皮瓣与带旋髂深血管的髂骨联合移植再造阴茎

1987年1月以来,作者创用前臂皮瓣与带旋髂深血管的髂骨联合移植的方法,为2例外伤性阴茎缺损患者成功地进行了再造。本手术采用血管解剖恒定、口径较粗的旋髂深血管所携带的髂骨作为支撑体,术后定期X线复查示骨结构正常,较好地解决了阴茎支撑体的血供问题,克服了传统的阴茎再造采用无血运的肋软骨或假体作为支撑体之诸多弊端。     

血管铸型方法检测组织工程骨修复羊胫骨缺损的远期血管化

目的采用血管铸型方法对组织工程技术修复中国青山羊胫骨大段骨缺损的远期血管化情况进行检测。方法中国青山羊3只，制备单侧胫骨20mm的骨与骨膜缺损，缺损部位内植入组织工程骨-珊瑚羟基磷灰石／骨髓基质干细胞（coral hydroxyapatite／bone marrow stem cells，CHAP／BMSCs）。术后3年分别行双侧后肢股动脉甲基丙烯酸甲酯血管铸型灌注，灌注后采用大体解剖、未脱钙骨片、扫描电镜等方法检测组织工程骨的远期血管化，并与健侧相同部位正常骨对照，观察其血管化效果。结果血管灌注后大体解剖观察示组织工程骨血管来源于周围软组织、髓腔血管及两端正常骨皮质。灌注后未脱钙骨磨片显示组织工程骨内微血管沿哈弗管和伏克曼管分布交织形成网状。采用图像分析仪比较组织工程骨与正常骨横切面磨片上血管相对面积，分别为（763．89±47．38）U／10万U与（788．00±65．83）U／10万U，差异无统计学意义（t=0．390，P〉0．05）。结论采用CHAP／BMSCs修复山羊胫骨大段骨缺损远期观察结果表明，新生骨远期血管化效果与正常骨无异，为组织工程骨下一步的临床应用提供可靠的依据。     

灌注培养对骨髓基质干细胞在大段材料上增殖与分布的影响

目的 探讨灌注培养对骨髓基质干细胞(BMSCs)在大段材料上增殖与分布的影响.方法 在大段多孔磷酸三钙材料上种植转染了增强型绿色荧光蛋白基因的大鼠BMSCs(eGFP-BMSCs),分别采用灌注式生物反应器(实验组)和静止培养法(对照组)进行培养.培养7、28 d行扫描电镜观察;培养7、14 d行荧光显微镜观察;动态临...     

三维重建技术在髂骨瓣临床手术中的初步应用

目的 探讨三维重建技术在髂骨瓣临床手术中的初步应用. 方法 2006年12月至2008年6月,采用旋髂深血管支髂骨瓣对1例股骨骨不连和5例胫骨骨缺损或骨不连的患者进行骨缺损修复.术前注射造影剂后采用CT扫描,应用Amira4.0软件对髂骨瓣结构进行三维重建,构建患者个性化骨瓣.根据患者骨缺损大小,进行个性化骨瓣三维构建,对患者进行髂骨瓣的点、线、面描记,用以指导手术切取. 结果三维重建患者个性化骨瓣6个,所重建个件化髂骨瓣能够清晰显示血管、骨骼及其毗邻结构的三维关系.6例患者所显示的骨瓣主要血供主干都与术中检查相符.术前测量旋髂深动脉起点距髂前上棘平均4.28 cm,旋髂深动脉主干血管外径平均为2.4 mm,穿支血管数平均为3条.术后6例患者获6个月～2年1个月(平均1年3个月)随访,髂骨瓣全部成活且Ⅰ期愈合,术后3～5个月均达到骨性愈合. 结论通过血管造影下肢CT扫描,采用数字化三维重建技术可以提供髂骨瓣的三维动态解剖,重建的组织瓣能够准确地标示术中切取范围,避免了术中血管的副损伤,保证了髂骨瓣良好的存活率.     

第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积软组织缺损

目的探讨第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积缺损的手术疗效。方法在解剖学基础上,采用第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积软组织缺损43例。结果43例皮瓣全部成活。术后随访6~10个月,移植皮瓣外形良好,质地、色泽良好,厚度适中。感觉恢复满意,两点分辨觉平均达5~8mm。结论应用以第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积软组织缺损,其血供可靠,手术简便、对供区破坏小,是一种值得推荐的方法。     

成人骨髓源成骨细胞体外培养条件下的生物学特性

背景骨髓基质干细胞作为种子细胞构建组织工程化骨组织,具有广泛的应用前景,可作为首选的骨组织工程种子细胞来源.尽管目前对于动物骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化的研究已不断深入,但对于成人骨髓基质干细胞大量诱导分化为成骨细胞的研究尚处于探索阶段.目的研究成人骨髓基质干细胞在体外培养条件下的生物学特性及成骨能力,探讨简便易行的成人成骨细胞体外培养方法,为骨组织工程选择理想的种子细胞来源.设计采用完全随机实验对照单盲设计进行横断面研究.地点和对象实验在解放军第一军医大学南方医院全军创伤骨科中心完成,对象为健康成年志愿者骨髓组织.干预抽取骨髓组织,在100 mL/L胎牛血清的DMEM培养基中,置于37℃,50 mL/L CO2湿化空气孵箱中培养,传代后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养,用倒置相差显微镜、光镜(HE染色)、扫描与透射电镜观察细胞的形态特征和增殖分化情况,并测定培养细胞的生长曲线(MTT法)、碱性磷酸酶活性和钙结节形成能力.主要观察指标形态学观察和生物学特性检测.结果原代和传代培养的细胞具有活跃的增殖能力,诱导培养2周后,细胞呈多角形或梭形,具有多个突起可互相联结,透射电镜下观察细胞核较为幼稚,细胞器丰富.诱导分化后的细胞可分泌碱性磷酸酶,改良钙钴法染色阳性率可达74.2%,并可形成钙结节,具有与典型的成骨细胞相似的形态特征及生物学功能.结论成人骨髓基质干细胞取材安全方便,易于诱导分化为成骨细胞;本实验方法可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法.     

不同直径螺钉对复合磷酸钙骨水泥强化骨质疏松股骨颈生物力学的影响

目的评价不同直径螺钉固定时添加复合磷酸钙骨水泥(CCPC)对骨质疏松股骨颈生物力学的影响。方法采用16个股骨上段标本,随机分为两组,深螺纹强化组和浅螺纹强化组。结果两组均灌注CCPC,深螺纹组和浅螺纹组的螺钉初始松动加载力分别为(329±35)N,(285±26)N;最大轴向拔出力分别为(370±22)N,(306±24)N,两组有显著性差异(P<0.01)。结论螺钉直径与骨质疏松股骨颈强化后的稳定性有关。