原位RT-PCR检测骨髓塑料切片中巨细胞病毒活动性感染的组织学依据探讨

目的 寻找骨髓造血功能障碍性疾病中巨细胞病毒(CMV)活动性感染的组织学依据.方法 华中科技大学同济医学院附属协和医院2006年2月至2007年10月筛选造血系统两系或三系减少患儿37例(再生障碍性贫血26例,骨髓增生异常综合征11例).取患儿骨髓活检组织,塑料包埋制备薄切片;将切片置于Eppen.doff管反应液内进行原位逆转录并扩增,原位检测骨髓组织中CMV mRNA表达.同时取患儿骨髓液行普通液相RT-PCR检测CMV mRNA作为对照.结果 14例(37.8%)骨髓塑料切片检测到CMV mRNA表达;阳性细胞多为骨髓实质细胞,呈局灶性或片状分布,阳性信号主要位于细胞胞浆内,少量出现在部分细胞的胞核.普通液相RT-PCR检测16例(43.2%)骨髓液中有CMV mRNA表达,2种方法阳性率差异无统计学意义(P>0.05).结论 改良的原位RT-PCR方法可用于塑料包埋切片的检测,可定位诊断骨髓中CMV活动性感染,为CMV活动性感染致血液学改变提供了组织学依据,对骨髓造血功能障碍性疾病发病机制的探讨具有重要意义.     

以问题为基础学习教学中学生学习效果评估方法的研究与应用

根据评估学的基本原理，结合国内实际情况，华中科技大学同济医学院第一临床学院儿科学教研室开展了对医学生以问题为基础学习（problem—based learning，PBL）效果评估方法的研究与应用。制定了针对学生PBL效果的一系列评估项目及评分标准，包括课堂评估、阶段评估及应用PBL方法学习前后的自我评估，力求使制定的评估指标客观、公正，能够真正反映学生的学习效果；同时，将此评估项目及评分标准应用于医学生PBL过程．取得了良好的效果。     

PBL教学模式探索

基于问题式学习(Problem-Based Learning，简称PBL)，是近年来国际上受到广泛重视的一种教学模式，它强调把学习设置于复杂的、有意义的问题情境中，通过让学习者合作解决真实性(authentic)问题，来学习隐含于问题背后的科学知识，形成解决问题的技能，培养自主学习(selfdirected learning)的能力，是目前西方的主流教学模式之一。     

湖北籍8例HbE-复合β地中海贫血

本室采用血红蛋白 (Ｈｂｂ)理化性质检查 ,查出 8例ＨｂＥ-复合β地中海贫血 ,其中 4例作了β地中海贫血基因分析。临床资料一、一般资料8例ＨｂＥ -复合 β地中海贫血(先证者 ) ,男 5例 ,女 3例。儿童 6例 ,年龄为 2～ 9岁 ,成人 2例 ,年龄为 19～ 2 6岁。 8例ＨｂＥ -复合 β地中海贫血均为汉汉族 ,湖北籍。二、临床表现8例ＨｂＥ -复合β地中海贫血均有贫血貌 ,巩膜黄染 ,肝脾肿大 ,其中 6例伴有发育障碍 ,消瘦、乏力 ,易得感染 ,还时常有发热发作。 8例ＨｂＥ -复合 β地中海贫血的血红蛋白 <9ｇ/Ｌ ,红细胞属小细胞 ,低色素型。网织红…     

脆性X综合征快速基因诊断方法的研究

为建立脆性Ｘ综合征的直接基因诊断快速方法，采用毛细管聚合酶链反应（ＰＣＲ）－序列胶银染法对６８例正常个体、３个脆性Ｘ综合征家系、４０例疑诊病例进行了基因检测，同时对部分样本用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法进行检测，以与前者对比。结果：正常样本可通过ＰＣＲ－序列胶银染法准确鉴定其三核苷酸重复次数［（ＣＧＧ）ｎ］；脆性Ｘ综合征家系男性先证者未能检出ＰＣＲ扩增带，２例疑诊病例亦同，１例女性先证者仅检出一条正常的（ＣＧＧ）ｎ重复序列，结合临床表型可初步确诊为患者；２例正常男性传递者及３例女性携带者均经ＰＣＲ扩增出前突变范围的扩增带而得到诊断，１例女性携带者的前突变基因（ＣＧＧ重复１５０个拷贝）未能用ＰＣＲ方法检出。整个ＰＣＲ扩增及产物的检测在４小时内即可完成。结果表明，毛细管ＰＣＲ－序列胶银染法对正常及较小前突变基因的检出较Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法更准确，具有快速、简便、价廉、安全的特点，可作为快速筛查脆性Ｘ综合征的基因诊断方法。     

Caspase3在哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的 探讨哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡的机制。方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用；应用DNA片段分析、流式细胞术观察细胞凋亡；半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)基因表达水平；应用westernblot测定caspase3的活性亚单位；比色法检测caspase3活性。结果 哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡，在细胞凋亡过程中，caspase3活性明显升高。结论 caspase3活化参与了哇巴因诱导Jurkat细胞的凋亡过程。     

儿童免疫介导骨髓衰竭综合征研究进展

骨髓衰竭(bone marrow failure)是指由于各种病理因素使骨髓造血功能受抑制,导致外周血中一系或者全血细胞减少。骨髓衰竭综合征由一系列疾病组成,主要病因包括骨髓增生减低和(或)无效造血、造血原料不足、异常克隆细胞“占位”等。此类疾病可以是遗传性也可以是获得性,后者主要包括获得性再生障碍性贫血(AAA)、骨髓增生异常综合征(MDS)、阵发性睡眠性血红蛋白尿等(PNH)疾病。越来越多的研究表明70%以上获得性骨髓衰竭综合征的发病与免疫因素有关。本文主要对这类疾病作一介绍。一、AAAAAA是一种由多种原因引起的原发性或继发性骨髓造…