5-杂氮-2''-脱氧胞苷对鼻咽癌细胞株细胞周期及14-3-3σ基因甲基化的影响

目的 探讨5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2dC)对鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、5-8F、6-10B增殖、凋亡和细胞周期分布的影响,并进一步分析5-aza-2dC处理对14-3-3σ基因甲基化状态的影响. 方法 用不同浓度5-aza-2dC处理鼻咽癌细胞,MTT实验观察细胞生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡比例,用甲基化特异性PCR(MSP)分析14-3-3σ基因甲基化状态.结果 5-aza-2dC对4株细胞均有生长抑制作用,CNE1和6-10B细胞对药物敏感性高于CNE2和5-8F.5-aza-2dC处理使4株细胞凋亡率出现剂量依赖性的增加,CNE1和6-10B细胞对药物敏感性高于CNE2和5-8F.经5-aza-2dC处理后,CNE1、CNE2、6-10B细胞出现不同程度的G,0/G,1期阻滞,而5-8F表现为G0/G,1期和G,2/M期双期阻滞.不经5-aza-2dC处理情况下4株细胞14-3-3σ基因均存在不同程度的甲基化,5-aza-2dC处理能够使14-3-3σ基因去甲基化. 结论 5-aza-2dC具有抗鼻咽癌作用,抑制作用强弱可能与鼻咽癌分化程度和转移潜能有一定关系,其机制可能与使14-3-3σ等抑瘤基因去甲基化有关.     

E1A基因下调人鼻咽癌细胞血管内皮生长因子的表达提高放疗敏感性

目的:探讨腺病毒E1A基因通过下调人鼻咽癌CNE-2Z细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达,来提高人鼻咽癌CNE-2Z细胞对放疗的敏感性。方法:选用人鼻咽癌CNE-2Z细胞为靶细胞,分别用PBS、Ad-β-gal、Ad-E1A作用48h后,用6MVX线分别给予0、2、4、6、8和10Gy剂量照射后,用MTT法和流式细胞仪检测3组细胞存活率及细胞周期变化来观察E1A基因对人鼻咽癌CNE-2Z细胞放疗敏感性的影响,同时用RT-PCR和免疫细胞化学法检测3组细胞VEGF水平的表达。结果:经照射后Ad-E1A组的细胞存活率明显低于PBS对照组和Ad-β-gal对照组。Ad-E1A组细胞的生长速度明显慢于PBS对照组和Ad-β-gal对照组。RT-PCR和免疫细胞化学结果显示Ad-E1A组比PBS对照组和Ad-β-gal对照组的人鼻咽癌CNE-2Z细胞的VEGF表达明显下降。结论:E1A基因通过下调VEGF的表达来提高人鼻咽癌细胞对放疗的敏感性。     

鼻咽癌患者四种血清自身抗体诊断价值的研究

目的 以血清蛋白质组学方法筛选到的4种鼻咽癌患者自身抗体(Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3)为对象,分析其诊断鼻咽癌的价值.方法 通过对封闭条件、抗原浓度及血清稀释度等条件进行优化,建立鼻咽癌患者血清自身抗体的ELISA检测方法,采用该方法分别检测Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3自身抗体在36例鼻咽癌患者、20例其他肿瘤患者及20名健康人血清中的浓度,采用统计学方法分析其判别鼻咽癌的敏感度和特异度.结果 鼻咽癌患者血清中4种抗体的含量明显高于健康人(鼻咽癌患者CK19、Rho-GDI-2、HSP70、LAP3的A450值分别为0.188 8±0.047 3、0.240 5±0.024 7、0.116 8±0.025 3、0.2769±0.0442;健康人A450值分别为0.010 5±0.0044、0.1053±0.016 9、0.098 6±0.014 0、0.149 8±0.033 1;F值分别为4.869、15.919、10.331、6.369;P值分别为0.010、0.000、0.000、0.003).Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3抗体判别鼻咽癌的敏感度分别为85.0%、75.0%、75.0%和75.0%,特异度分别为58.9%、80.4%、58.9%和57.1%准确性分别为76.8%、76.8%、69.6%和67.9%.以单个自身抗体作为判别鼻咽癌的指标,Rho-GDI-2抗体具有更高的敏感度,而HSP70抗体的特异度最高.4种抗体联合应用,判别鼻咽癌的敏感度和特异度可达94.4%和95.0%.结论 采用ELISA方法检测Rho-GDI-2、HSP70、CK19和LAP3自身抗体有助于鼻咽癌的筛杳和诊断.     

采用血清蛋白质组学方法筛选能诱发自身抗体的鼻咽癌相关抗原

目的 采用血清蛋白质组学方法筛选能诱发机体产生自身抗体的鼻咽癌(NPC)相关抗原,以便为NPC诊断和治疗提供候选标志.方法 收集19份NPC组织,采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离组织总蛋白质,每份组织样本同时做3块2-DE胶,其中将1块2-DE胶作为制备胶进行考马斯亮蓝染色,另2块2-DE胶采用半干式电转法将胶中的蛋白转至PVDF膜上,并分别与NPC患者自身的血清和健康人血清进行2-DE免疫印迹分析,识别能与多数NPC患者血清反应而不与或很少与健康人血清反应的蛋白质点,再从制备2-DE胶中切取相应蛋白质点,进行基质辅助激光解吸电离飞行时问质谱(MOLDI-TOF MS)和电喷雾电离四级杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)分析,获取肽质量指纹图和肽序列标签,数据库搜索鉴定蛋白质.结果 鉴定了13个能诱发机体产生自身抗体的NPC相关抗原:热休克蛋白70(HSP70)、人血清白蛋白(HAS)、热休克蛋白60(HSP60)、细胞角蛋白15(CK 15)、亮氨酸氨基肽酶(LAP 3)、α-烯醇化酶(α-enolase)、ErbB3结合蛋白(EBP1)、细胞角蛋白19(CK 19)、核糖体蛋白P0(RPP 0)、丙酮酸脱氢酶E1(PDE 1)、GTP结合调节蛋白(GNBP)、抗增殖蛋白(prohibitin)和Rho GDP解离抑制因子2(Rho-GDI 2),13种蛋白质点在21%的鼻咽癌患者中可见,而健康人中缺乏或出现频率较低.结论 本研究筛选到13个NPC相关抗原,这些抗原能诱导患者产生自身抗体,这些抗体有可能成为NPC诊断标志和治疗靶标.     

神经外科术后颅内感染的临床分析

目的 探讨神经外科术后颅内感染的危险因素、预防和治疗方法.方法 回顾分析我院2009年4月至2012年4月1 432例神经外科手术患者中89例发生颅内感染的临床资料,对影响感染率的各项因素进行分析,并观察其治疗效果.结果 患者术后颅内感染与手术部位、手术时间≥4 h、脑室外引流、留置引流管时间、脑脊液漏有关（P ＜0.05或P＜0.01）,与年龄、性别、术前是否应用抗生物无关（P均＞0.05）.89例颅内感染患者治愈73例（82.02％）,显效7例（7.87％）,进步8例（8.99％）,无效1例（1.12％）.结论 神经外科手术时,可以通过采用恰当的手术方式、减少手术时间、加强引流管护理、防止脑脊液漏等方式预防和减少颅内感染的发生;合理治疗可以有效治疗颅内感染.     

马来酸桂哌齐特佐治稳定型心绞痛疗效观察

稳定型心绞痛是在一定条件下心肌需氧与冠脉供血、供氧失去平衡而发生心肌缺血的临床症候,所以增加冠脉供血是治疗心绞痛发作的关键。采用马来酸桂哌齐特佐治稳定型心绞痛疗效满意,现报告如下。     

浅析抗糖尿病药物发展现状

糖尿病是一种由胰岛素缺乏引起的糖、蛋白质和脂肪代谢障碍性疾病,发病机制复杂。目前糖尿病用药研究已突破传统的磺酰脲类和双胍类等化学结构,新类别的药物相继涌现。本文根据不同的作用机制介绍了几个主要类别的代表药物开发及应用情况,并展望了糖尿病药物的发展趋势。     

高效毛细管区带电泳测定内毒素

目的 :应用高效毛细管区带电泳 (CZE)测定脆弱类杆菌中的内毒素 (LPS) ,且对制备流程进行监控和对产品 (LPS)纯度进行检测 ,以便快速、高质量地提供科研用的内毒素。方法 :在样品中加入茶碱作内标 ,运用CZE在 30mmol·L-1的硼酸盐缓冲液 (pH 8.0 )里分离测定LPS。毛细管柱内径 75 μm ,长 5 7cm。电压 2 5kV ,电流 16 2 μA ,检测波长 2 30nm。结果 :首次在国内运用CZE分离和测定了从细菌中提取的内毒素 ,LPS浓度在 1～ 5 0mg·L-1范围内具有良好的线性关系 (r =0 .996 ) ,方法平均回收率为 99 0 7%～ 10 1 0 0 % ,日内及日间变动系数 (CV)均小于 5 % ,最低检测限为 1 0mg·L-1。结论 :与鲎试剂法或凝胶电泳法相比 ,本法不受热源干扰 ,方法简便、快速、定量可靠 ,能即时监控纯化流程 ,是目前最先进的检测LPS的方法     

心肺复苏后血清脑钠肽水平预测脑损伤程度临床分析

目的探讨心肺复苏后血清脑钠肽水平对预测脑损伤程度的价值。方法将接受心肺复苏的75例患者分为轻度脑损伤组、中度脑损伤组和重度脑损伤组,各25例。选取同期健康体检的人群25例作为对照组。对比各组自主循环恢复后各个时间血清脑钠肽水平。结果脑损伤组自主循环恢复后2 h、4 h、8 h、12 h、48 h血清脑钠肽水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);且轻度、中度、重度脑损伤组伴随脑损伤程度越重,血清脑钠肽水平越高,差异有统计学意义(P0.05)。各时间段血清脑钠肽水平与GCS评分相比差异均有统计学意义(P0.05)。血清脑钠肽水平与GCS评分存在负相关关系。结论心肺复苏后血清脑钠肽水平可有效预测患者脑损伤程度,血清脑钠肽水平越高则表明脑损伤程度越重。