柴胡总皂苷提取物体外溶血作用

目的:考察柴胡总皂苷提取物的溶血作用和抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响。方法:通过肉眼观察和分光光度法考察不同浓度柴胡皂苷的溶血作用及抗氧化剂对柴胡总皂苷溶血的影响。结果:柴胡总皂苷质量浓度为在0.01,0.02 g.L-1时,其溶血曲线呈S形,溶血当量为0.01 mg,溶血指数为1∶10万,抗氧化剂与柴胡总皂苷组溶血率低于同浓度柴胡总皂苷组。结论:柴胡总皂苷具有一定的溶血作用,且溶血强度与浓度呈剂量依赖性,抗氧化剂的加入能减轻柴胡总皂苷的溶血作用。     

早期乳腺癌保乳手术疗效评价

目的探讨早期乳腺癌保乳手术治疗的适应证及方法.方法回顾性分析28例Ⅰ、Ⅱa期乳腺癌实施保乳手术及综合治疗的临床资料.结果保乳术后病侧乳房外形均较好,两侧乳房基本对称,术后5年复发率5%,5年生存率95%.结论早期乳腺癌的保乳手术治疗疗效确切,但必须正确掌握手术指征及合理的切除范围,同时要保证术后的综合治疗及严格的随访制度.     

人工股骨头置换术108例疗效观察

采用钛合金，钴铬钼材料制作的单、双极人工股骨头、对１０８例股骨颈骨折患者进行了人贡股骨头置换术，手术后进行随访，并根据“髓关节人工置换术效果等级评定标准”进行疗铲评估。结果１０８例中４￣６级９７例，治疗满意率为８９．６％，术后各类并发症３２例，占２９．６％，因此认为，人工股骨头置换术仍是目前治疗老年股骨颈肌折较理想的方法之一。     

缺血预处理对兔肺缺血再灌注性损伤的蛋白质组学研究

目的观察缺血预处理对兔肺缺血再灌注性损伤的蛋白质变化，探讨其可能的肺保护机制。方法12只家兔，随机分为预处理组和对照组，每组6只。对照组经历单纯的缺血再灌注损伤，预处理组在缺血再灌注前予以缺血预处理。以二维电泳分离肺组织中的全部蛋白质，应用PDQuest软件寻找差异表达的蛋白质点并以MALDI-TOF质谱仪和Mascot软件对其鉴定。结果研究发现了35个明显差异表达的蛋白质，包括磷酸肌醇3激酶△催化亚单位在内的17个蛋白质达到了鉴定。结论通过磷酸肌醇3激酶信号传导通路抑制炎性反应可能是缺血预处理的保护机制。     

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目的探讨肥胖是否会引起儿童体内的氧化应激加剧以及可能的机制.方法浙江大学医学院附属第二医院等单位于2004年10月至2005年3月,采用病例对照研究设计,用分光光度分析法检测浙江大学附属第二医院确诊的80例肥胖儿童(OCs)和浙江大学附属儿童医院80例健康儿童(HCs)的血浆维生素C(VC)、维生素E(VE)、β-胡萝卜素(β-CAR)水平以及红细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和红细胞丙二醛(MDA)水平.结果与HCs组VC、VE、β-CAR、SOD、CAT和MDA均值比较,OCs的VC、VE、β-CAR、SOD和CAT均值均显著降低(P<0.001),MDA均值显著增高(P<0.001);对80例肥胖儿童控制年龄和肥胖病程的偏相关分析提示,随着BMI升高,VC、VE、β-CAR、SOD和CAT值逐渐降低(P<0.05～0.01),MDA值逐渐增高(P<0.001);对反映肥胖儿童氧化应激加剧的可靠性分析表明,6项生化指标的可靠性系数为0.7152,P<0.001,标化可靠性系数为0.9018,P<0.001.结论肥胖儿童体内存在着氧化应激加剧,此氧化应激加剧与体重指数(BMI)密切相关.     

纤维支气管镜与顺行引导气管插管技术在困难气道的应用

目的 观察纤维支气管镜与顺行引导气管插管技术联合运用的临床效果.方法 择期预计困难气道手术患者64例随机分为两组,给氧吸入七氟烷8％（6 L/min）,患者入睡后,扣紧面罩,用呼吸机压力支持通气继续吸入恒定浓度,直至睫毛反射消失,患者下颌松弛、心率减慢后：Ⅰ组采用纤维支气管镜与顺行引导气管插管技术联合运用进行气管插管,Ⅱ组采用纤维支气管镜引导气管插管.记录插管时长,入室后5 min（基础值,T1）、气管导管过鼻腔（T2）、纤维支气管镜过咽喉（T3）、纤维支气管镜过声门进气管确认气管隆突位置（T4）、气管导管进入气管（T5）时点患者HR、MAP、SpO2的参数值.结果 与T1时比较,T4～T5时两组患者HR均增快,MAP均增高,但Ⅰ组比Ⅱ组轻;T4～T5时Ⅱ组SpO2明显降低（P＜0.05）;T4～T5时Ⅱ组恶心、呛咳、体动比例高.Ⅰ组患者对所接受的麻醉方法评价为（8.63 ±1.37）分,明显高于Ⅱ组（7.84±1.26）分（P＜0.05）.结论 纤维支气管镜与顺行引导气管插管技术联合运用的患者生命体征平稳,插入成功率高,患者评价高,值得在择期手术困难气道中应用推广.     

鼻咽癌成纤维细胞分泌性蛋白质的变化分析

目的 建立细胞分泌性蛋白质组学研究方法,分析鼻咽癌形成过程中成纤维细胞分泌蛋白的变化特征.方法 分别收集5份鼻咽癌和正常鼻咽组织标本,无血清培养成纤维细胞,收集细胞上清液,超滤法脱盐并浓缩上清液中分泌性蛋白,运用双向凝胶电泳(2-DE)技术建立分泌性蛋白表达图谱;并用比较蛋白质组学方法分析2组成纤维细胞分泌蛋白的差异,基质辅助激光解析飞行时间质谱分析鉴定差异蛋白;ELISA分析2组细胞上清液中半乳糖凝集素1的表达.结果 用自建细胞分泌性蛋白2-DE图谱,从2组细胞上清液中筛查出表达差异大于2倍的蛋白质点18个,质谱分析鉴定出11个分泌性蛋白;其中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、补体组分Cls前体、不均一性核糖核蛋白Al在鼻咽癌间质成纤维细胞(CAFs)上清液中表达下调,而其余8个包括半乳糖凝集素1、14-3-3sigma蛋白、组织蛋白酶L等分泌性蛋白在CAFs上清液中表达上调;2组细胞上清液中半乳糖凝集索1分别为(4.95±0.76)ng/ml、(9.90±0.36)ng//ml(CAFs组),二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 鼻咽癌形成过程中成纤维细胞分泌性蛋白的变化涉及细胞信号转导、蛋白合成与降解等途径,CAFs可能通过上述途径调控肿瘤微环境,影响鼻咽癌的发生、发展、侵袭转移;这为今后分泌组学研究奠定了实验基础.     

毛细管区带电泳激光诱导荧光测定内毒素

内毒素为脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)由脂质(类脂A)、核心寡聚糖和O-特异性多糖组成,是革兰阴性菌细胞壁外膜的重要成分之一,在细菌感染的发病机制中起重要作用[1,2].为了对LPS的制备流程进行即时监控,我们建立了毛细管区带电泳-激光诱导荧光(CZE–LIF)测定脆弱类杆菌提取液中LPS含量的新方法.本法LPS浓度在0.015～0.200 mg/L(内具有良好的线性关系(r=0.996),平均回收率为96.15%～99.01%,日内及日间变动系数(CV)均<5%,最低检测限为0.005 mg/L.与鲎试剂法、ELISA法或凝胶电运法相比[2-4],本法不受热源干扰,方法简便、快速且定量可靠,能对LPS的制备流程进行即时监控,是目前国内外最新的LPS检测方法.     

吲哚美辛抗人结肠癌细胞系HCT116的功能蛋白质组研究

目的　探讨吲哚美辛 (IN)对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响及其抗结肠癌的作用机制。方法　应用固相 pH梯度双向凝胶电泳 (2 DE)技术分离IN治疗组和对照组HCT116细胞的总蛋白 ,银染显色 ,采用ImageScan扫描获取电子图像 ,ImageMaster 2D图像分析软件分析 2组的2 DE图谱并识别差异表达的蛋白质。应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)得到相应的肽质量指纹图谱 ,分析并鉴定差异蛋白质。结果　获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系 2 DE图谱 ,对照组蛋白质点数为 12 99± 5 5 ,其匹配率为 94 .2 % ;IN治疗组蛋白质点数为 12 0 8± 4 7,其匹配率为 91.0 %。两组共有 4 5个差异蛋白质点 ,其中 ,治疗组有 9个蛋白质点表达上调 ,34个蛋白质点表达下调 ,2个蛋白质点仅在对照组表达。对差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析发现 ,IN可通过BfL 1蛋白诱导HCT116细胞凋亡 ,并鉴定出一些与细胞凋亡、细胞周期及信号转导相关的蛋白质。结论　IN可通过BfL 1等多种途径诱导HCT116细胞的凋亡并抑制其增殖。     

RKIP在鼻咽癌侵袭转移中的作用及机制研究

目的:研究Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitory protein,RKIP)在鼻咽癌(nasopharyngeal c a r c i n o m a,N P C)侵袭转移中的作用及其机制。方法:采用免疫组织化学染色检测R K I P在转移潜能不同的NPC组织中的表达,分析其表达水平与NPC临床病理特征和患者预后的关系;采用脂质体转染技术建立RKIP表达改变的稳定转染NPC细胞系,采用刮痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测细胞的体外运动和侵袭能力,采用Western blot检测NF-κB信号分子磷酸化水平。结果:RKIP在NPC组织中的表达显著低于正常鼻咽粘膜组织,在有转移NPC组织中的表达明显低于无转移NPC组织,在颈淋巴结转移癌组织中的表达明显低于原发癌;RKIP表达水平与NPC的淋巴结转移、远处转移、临床分期以及NPC患者的总生存期负相关;RKIP表达上调降低5-8F NPC细胞的体外运动和侵袭能力,而RKIP表达下调增强6-10B NPC细胞的体外运动和侵袭能力;RKIP表达水平与NPC细胞NF-κB信号通路的活性负相关,NF-κB抑制剂Bay11-7082能抑制RKIP下调的6-10B细胞的体外运动和侵袭。结论:RKIP可能是NPC的一个转移抑制蛋白,RKIP低表达的NPC患者预后差,RKIP表达下调通过活化NF-κB通路促进NPC的侵袭和转移。