过敏性哮喘大鼠模型的建立

目的：为了探索喘息性疾病的发病机理，结合本实验室的具体条件，建立一种由卵白蛋白（OVA）诱发的支气管哮喘大鼠模型。方法：双次腹腔＋皮下注射OVA致敏、连续6次呼吸道雾化吸入OVA诱导气道变应性炎症。结果：激发后肺部出现多种炎性细胞浸润，血清产生高滴度IgE，支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞增加，外周血单个核细胞（PBMC)培养上清中白细胞介素4（IL－4）升高。结论：该方法能够诱导大鼠气道过敏性炎症，可以作为研究过敏性哮喘的动物模型。     

小儿支原体肺炎的肺外表现(附24例报告)

目的 报道小儿支原体肺炎肺外表现，旨在增强鉴别诊断意识，减低误诊率。方法 对我院1995年6月-1999年12月的小儿支原全肺炎有肺外表现临床特点的患儿进行分析。结果 54例小儿支原体肺炎中有24例存在1至多个系统器官受累，包括血液系统，心血管系统，胸膜病变，消化系统，泌尿系统，皮肤等，治疗上以大环内酯类抗生素为首选药物。经足够剂量和疗程后全部治愈。结论 小儿支原体肺炎肺外表现的多系统器官受累应引起重视。     

重庆市儿科卫生资源合理性研究

卫生资源配置是卫生事业可持续发展的基础,也是保证卫生系统绩效达标的必要条件,其配置合理性是衡量卫生资源分配是否合理的重要依据,是实现卫生服务利用合理性的前提条件,直接关系到人民群众的健康权益和卫生利益[1-2]。2009年国务院印发的《医药卫生体制改革近期重点实施方案(2009-2011年)》强调促进基本公共卫生服务逐步均等化,强化区域卫生规划。为了解重庆市儿科卫生资源配置的合理性,本文利用基尼系数(Gini coefficient)和洛伦茨曲线(Lorenz curve)对重庆市"十一五"末各区县儿科卫生人力资源的人口和地理分布进行分析,从而为重庆市儿科区域卫生规划提供科学依据。     

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在人气道上皮细胞中的表达及对MAPK信号通路的影响

目的:探讨糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在人气道上皮细胞9HTE0中的表达以及对MAPK信号通路因子Raf-1、Mek1/2、Erk1/2的影响。方法:采用RT-PCR及Western blot法检测地塞米松(Dex)作用后GILZ mRNA及蛋白的表达,同时细胞免疫荧光法检测GILZ蛋白的定位;合成三条GILZ-SiRNA分别转染人气道上皮细胞9HTE0,用Q-PCR及Western blot法筛选出沉默效果最佳的一条;Western blot法检测MAPK信号通路因子Raf-1、Mek1/2、Erk1/2磷酸化蛋白及其总蛋白的表达。结果:Dex能够明显刺激人气道上皮细胞9HTE0GILZ mRNA及蛋白的表达,GILZ蛋白主要定位在细胞浆中,Dex抑制了Raf-1、Mek1/2、Erk1/2磷酸化蛋白的表达,而GILZ-SiRNA转染后,Raf-1.Mek1/2、Erk1/2磷酸化水平有所回升。结论:糖皮质激素作为支气管哮喘一线用药,虽然能够诱导GILZ表达并发挥一定的抗炎作用,但同时GILZ却抑制了在气道上皮修复中起重要作用的MAPK信号通路的激活,这为临床上研究哮喘防治新措施提供了理论依据。     

儿童社区获得性肺炎1 613例病原学特点分析

目的 了解重庆地区儿童社区获得性肺炎(CAP)患儿病原分布及特点。方法 选取2014年1~12月住院治疗的1 613例CAP患儿为研究对象,采集患儿的鼻咽抽吸物进行细菌培养、呼吸道7种病毒及肺炎支原体检测,并对其特点进行分析。结果 1 613例患儿中,有810例细菌检出阳性,阳性率为50.22%,其中检出副流感嗜血杆菌346株(40.8%),肺炎链球菌252株(29.7%),卡他莫拉菌62株(7.3%);病毒阳性者559例,阳性率为34.66%,其中检出呼吸道合胞病毒342株(58.3%),副流感病毒3 102株(17.4%),腺病毒84株(14.3%);MP阳性者481例,阳性率为29.82%;病原体混合感染检出519例(32.18%),以细菌、病毒混合检出为主(47.4%)。结论 副流感嗜血杆菌为重庆地区CAP住院患儿感染的首位细菌病原,RSV为首位病毒病原,支原体感染亦较为普遍,混合感染以细菌、病毒混合感染为主。     

受体拮抗剂在哮喘治疗中的研究进展及临床应用

随着细胞因子和炎症介质在哮喘发病机制中的作用越来越受到重视,研制开发其受体拮抗剂作为哮喘治疗的辅助用药已成为重要的研究方向,部分受体拮抗剂还显示出了巨大的临床应用前景。该文以目前较关注的几种受体拮抗剂,如白三烯受体拮抗剂、组胺受体拮抗剂、血栓素受体拮抗剂、血小板活化因子受体拮抗剂、白介素受体拮抗剂为例,介绍其在哮喘治疗中的研究进展及临床应用,另外,对目前尚处于动物实验阶段的另一些受体拮抗剂,如速激肽受体拮抗剂、内皮素受体拮抗剂及双受体拮抗剂也作了简要介绍。     

抗白细胞介素-4在哮喘中的研究进展

白细胞介素4(IL-4)在哮喘等变应性炎症反应中起着关键作用,IL-4受体是其结构功能的重要单位,阻断IL-4受体可能将在哮喘的防治中发挥重要作用。该文就可溶性IL-4受体、IL-4受体拮抗体和IL-4单克隆抗体三种阻断IL-4生物学活性的方法及可能的应用前景作一简要综述。     

哮喘儿童诱导痰液安全性分析

目的:探讨高渗盐水诱导哮喘儿童痰液的安全性.方法:52例哮喘儿童(急性发作期37例,缓解期15例)及10例正常健康儿童进行高渗盐水痰液诱导,测定诱导前、诱导后20min最大呼气流量(PEF)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、心率(HR)、呼吸频率(RR)的变化,观察患儿出现的不适反应.结果:各组儿童诱导前后PEF、FEV1、HR、RR值无显著性变化(P＞0.05),不适反应发生率低,仅为6.5%.结论:对哮喘儿童进行高渗盐水痰液诱导是一种安全的方法.     

脂多糖、转化生长因子-β1对小鼠骨髓来源树突状细胞的生物学作用

目的:探讨加入LPS、TGF-β1体外刺激小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的方法及其对生物学特性的作用.方法:GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠BMDC 6 d后,分别用培养基(对照组)、LPS、TGF-β1、LPS+TGF-β1,刺激BMDC48 h后进行形态学观察,流式细胞术检测细胞表型CD11C、CD80、CD86、MHC Ⅱ,混合淋巴细胞反应检测其抗原提呈功能,收集上清液用ELISA检测IL-6,IL-12 p70.结果:LPS组具有最典型的成熟样DC形态,CD80、CD86及MHC Ⅱ的表达水平显著升高,混合淋巴细胞反应和分泌IL-4、IL-12 p70能力最强,与对照组,TGF-β1组,LPS+TGF-β1组比较差异具有统计学意义(P<0.05),TGF-β1组成熟样DC形态最不典型,CD80、CD86和MHC Ⅱ的表达水平最低,混合淋巴细胞反应和分泌IL-4、IL-12 p70能力最弱,与对照组,LPS组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:LPS在DC的分化晚期可以刺激其成熟,并且具有更高的生物学特性,TGF-β1不抑制DC的分化,但可以抑制DC的成熟,从而降低其生物学特性.     

小鼠CCR7基因重组腺病毒的构建及其在DC2.4的表达

目的构建含有小鼠趋化因子受体-7(CCR7)基因的重组腺病毒(AdCCR7),观察其体外感染DC2.4细胞效率。方法将小鼠CCR7基因克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV,在BJ5l83菌内和骨架质粒pAdeasy-1同源重组,筛选阳性克隆;经线性化后转染HEK293细胞,获得含小鼠CCR7基因的重组腺病毒AdCCR7;TCID50方法检测病毒滴度,PCR法鉴定病毒DNA。带绿色荧光蛋白腺病毒(AdGFP)和AdCCR7分别感染DC2.4(GFP-DC2.4和CCR7-DC2.4),同时设未处理DC2.4为空白对照。流式细胞术(FCM)检测各组细胞表面分子CD11c,MHCⅡ,CD86及CCR7表达,趋化实验检测CCR7的功能。结果获得滴度约为l.4×1010pfu/ml重组腺病毒AdCCR7。AdCCR7感染DC2.4后,CCR7-DC2.4组与另外两组细胞比较CD11c、MHCⅡ及CD86的表达均无明显差异,但CCR7表达升高;其对趋化因子CCL19的趋化率可达44.7%~60.0%,明显高于其它两组。结论成功构建含小鼠CCR7基因的重组腺病毒AdCCR7,该病毒可感染细胞株DC2.4,增加细胞表面CCR7表达以及细胞对CCL19的趋化性,为进一步体内实验研究携带CCR7基因的未成熟DCs功能提供了工作基础。