2000年上海地区儿童急性下呼吸道感染的病原学研究

目的　儿童急性下呼吸道感染 (ALRTIs)是儿科最常见疾病 ,为了降低其发病率和病死率 ,为了倡导抗生素合理使用 ,须首先探讨儿童ALRTIs的病原学分布。方法　 2 0 0 0年 1～ 1 2月对确诊的该地区ALRTIs的1 2 1 6例患儿取下呼吸道分泌物标本 ,用桥联酶标法检测病毒抗原 ,送细菌培养和肺炎支原体培养 ,用SERODIA MYCO2 凝集法作肺炎支原体抗体测定。结果　病原检测阳性者 1 0 1 9例 (83.8% ) ,其中单纯病毒感染 4 4 4例(36 .5 % ) ,单纯细菌感染 1 97例 (1 6 .2 % ) ,单纯支原体感染 4 6例 (3.8% ) ;混合感染 332例 (2 7.3% )。病毒病原依次为 :呼吸道合胞病毒 1 8.6 % ,副流感 1、3型病毒 1 2 .3% ,副流感 2型病毒 1 0 .4 % ,腺病毒 8.6 % ,甲型流感病毒7.6 % ,乙型流感病毒 6 .3%。细菌感染中流感嗜血杆菌 9.0 % ,肺炎链球菌 7.9% ,大肠杆菌 6 .3% ,金黄色葡萄球菌 4 .9% ,肺炎克雷伯菌 3.9% ,表皮葡萄球菌 1 .4 % ,卡他莫拉菌 0 .0 8% ,以及其它菌 5 .1 %。结论　病毒感染是上海地区儿童急性下呼吸道感染的最常见病原 ,细菌感染次之 ,细菌和病毒混和感染在 3岁以下尤其 1岁以下小儿明显 ,而支原体感染多见于 5岁以下儿童     

周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂和3-磷酸甘油醛脱氢酶复合基因真核表达载体的构建及免疫研究

目的 构建周期型马来丝虫(Bm)半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPI)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)重组复合基因真核表达质粒,观察其在小鼠体内的细胞免疫应答效应.方法 将重组质粒pGEM-T/BmCPI和pGEM-T/BmG APDH以及真核重组表达载体分别进行双酶切,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1 (+)-BmCPI/BmGAPDH.将纯化的pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH和含非甲基化胞嘧啶和鸟嘌呤的寡聚脱氧核苷酸(CpG ODN)免疫BALB/c小鼠,并设PBS对照组及空质粒对照组,共免疫3次,每次间隔2周.采用RT-PCR方法检测肌肉组织内的目的基因,采用四甲基偶氮唑盐( MTT)法和ELISA法分别检测免疫小鼠T淋巴细胞刺激增殖指数和血清中IFN-γ、IL-4水平.统计学分析采用t检验.结果 pcDNA3.1 (+)-BmCPI/BmGAPDH复合基因真核表达载体免疫小鼠后,从小鼠肌肉组织内扩增出目的基因.免疫6周后,pcDNA3.1(+)-BmCPI/CpG组和pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH/CpG组T淋巴细胞刺激增殖指数分别为1.466±0.635和1.610±0.112,显著高于PBS组的1.004±0.019和pcDNA3.1(+)-CpG组的1.078±0.129(t=64.438、45.318、42.749、34.314,均P＜0.05).免疫4周后,pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH/CpG组IFN-γ、IL-4水平均高于pcDNA3.1(+)-CpG组(t=288.053、76.453,均P＜0.05),其中IFN-γ水平与pcDNA3.1(+)-BmCPI/CpG组相比也有明显提高(t=129.642,P＜0.05).结论 pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH重组复合基因真核表达载体能在小鼠体内表达,并可有效诱导特异性细胞免疫应答.     

2010年某儿童医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染临床分析

目的了解2010年某儿童医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染、预后情况及特殊群体儿童与普通儿童MRSA感染的临床特点。方法按常规方法进行细菌的分离与鉴定,细菌药物敏感试验采用纸片扩散(Kirby-Baner)法。患儿分组根据其来源及卫生部颁布的《医院感染诊断标准(试行)》进行。结果该儿童医院2010年收治病史完整的MRSA感染病例66例,其中30例为来自上海市儿童福利院(护理院)的救治弃婴。社区感染组以新生儿及接触感染者为主;护理院感染组相关因素包括重度营养不良、术后切口感染、先前住院史、长期卧床/局部压迫等;医院感染组与恶性肿瘤术后化疗、长期经鼻留置胃管、近期手术、气管插管/机械通气有关。平均住院天数为40 d。预后:社区感染组全部好转,治愈出院;护理院感染组有2例死亡,病死率6.67%;医院感染组6例中有3例死亡,占50%。结论来自护理院的患儿与来自社区的普通患儿MRSA感染情况有显著差异,在综合性儿童医院中对此类特殊患者设立独立病房进行隔离治疗,是有效减少社区获得性MRSA与医院获得性MR-SA的交叉感染,降低综合性医院医院感染的有效措施。     

甘露醇脱水疗法与速尿脱水疗法对晚期恶性肿瘤病人止痛效果的比较

目的:分析和比较甘露醇脱水疗法和速尿脱水疗法缓解晚期恶性肿瘤病人疼痛的疗效。方法:回顾性比较因疼痛住院的晚期恶性肿瘤病人甘露醇脱水治疗(37例)和速尿脱水治疗(32例)的止痛效果。结果:甘露醇对疼痛的有效缓解率为86.1%,速尿为62.5%,两组间差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:甘露醇比速尿止痛效果更为明显,甘露醇脱水治疗对缓解临终病人的疼痛是一种安全、有效、经济、操作便捷的治疗方法,尤其适合基层医疗单位运用。     

马来丝虫肌球蛋白部分编码基因Bm-M55的克隆与真核表达

根据马来丝虫肌球蛋白部分编码基因（Bm-M55）序列设计引物,以其微丝蚴总RNA为模板,反转录PCR扩增目的基因。用TA克隆方法将目的基因克隆至载体pGEM?鄄T Easy中,经PCR和双酶切鉴定并测序后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1（+）,构建真核表达载体pcDNA3.1（+）/Bm-M55,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳（SDS-PAGE）对获得重组蛋白Bm?鄄M55进行分析和鉴定。RT-PCR鉴定结果显示, 转染的COS-7细胞表达了Bm-M55基因,根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank（登录号为AAA27858）中的一致,重组蛋白Bm-M55相对分子质量（Mr）约为 55 000。     

临终病人病情评估表的初步编制

目的编制临终病人病情评估表。方法采用“得尔菲（Delphi）”专家咨询方法，筛选13个指标，再行定量各自的权重，审定极差内容和警示指标，进行临床试用56例后，进行信度和效度分析。结果全量表的Cronbach’s alpha系数为0．87；采用主成分分析法，方差最大正交旋转后，共提取公共因子j个，累计贡献率为61．997％。临床评估试用效果满意。结论临终病人病情评估体系表格化评估直观、容易操作；评估结果和病情转归相近；极差内容界限分明意见分歧度小；数据化处理形式便于行内统一标准化。     

周期型马来丝虫GAPDH部分编码基因原核及真核表达载体的构建

[目的]构建我国流行的周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)部分编码基因原核和真核表达质粒以及基因序列分析,为进一步的研究奠定基础。[方法]根据GeneBank中马来丝虫GAPDH基因的已知序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因。扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-BmGAPDH,经测序验证,并进行同源性比较。亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-BmGAPDH,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证。[结果]RT-PCR扩增出一条约877 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为99%。转染的COS-7细胞高水平表达BmGAPDH的mRNA,根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的一致。[结论]成功构建了周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶部分编码基因原核及真核表达载体,为进一步功能研究提供了条件。     

小儿肺动脉发育异常影像学诊断价值探讨

单侧肺动脉缺如(unilateral absence of pulmonary artery,UAPA)或发育不良是小儿时期罕见的先天性肺血管畸形,因临床缺乏特异性表现,常导致误诊。诊断的主要依据为影像学检查,为提高对本病的认识,现将我院5例肺动脉发育异常患儿的临床及影像学资料并结合有关文献予以分析,兹报道如下。     

广泛全子宫切除术后尿潴留的护理干预

目的：探讨广泛全子宫切除术后尿潴留的护理干预效果。方法：将2012年4月-2014年4月在昆山市第一人民医院行广泛全子宫切除的患者60例随机分成甲乙2组,甲组30例为对照组,护理模式为常规护理,乙组30例为观察组,采用全面的护理干预措施。结果：甲组术后7例发生尿潴留,乙组患者中无尿潴留发生。很明显,通过有效的干预后乙组尿潴留的发生率低,P〈0.01。结论：通过恰当的围手术期护理干预,子宫广泛切除术患者尿潴留发生率将大大较少,术后患者将会更快的回复。     

重症支原体肺炎56例治疗分析

目的：通过分析56例儿童重症支原体肺炎的临床特点,提高其诊断和治疗水平。方法：共56例重症支原体肺炎确诊患儿,其中男31例,女25例,年龄34d~16岁。所有患儿均进行血常规、血生化、痰支原体培养、痰病毒分离等检测,并通过ELISA法检测血清中的MP-IgM,并作胸X线片、CT和心超、心电图等检查。治疗应用阿奇霉素,合并细菌感染加用头孢类抗生素,症状严重者用激素和丙种球蛋白治疗。结果：所有患儿中出现胸腔积液34例（60.7%）,呼吸衰竭17例（30.4%）;共34例（60.7%）患儿出现肺外表现,以消化系统和血液系统受累最常见。MP-IgM阳性率高达94.6%,为有效的特异性诊断指标,辅以CT使诊断更加完善、具体化。治疗以阿奇霉素为首选,合并细菌感染加用头孢类抗生素（18例）,严重或肺外病变者加用皮质激素（20例）,包括琥珀氢考（9例）、甲基强的松龙（4例）、强的松（7例）,加用丙种球蛋白7例。53例患儿好转出院,死亡3例（其中2例为放弃治疗）,7例机械通气患儿均获治愈。结论：重症支原体肺炎患儿病情较重、病程长,部分伴胸腔积液和呼吸衰竭,肺外并发症中以消化系统和血液系统受累最为多见;选用特异有效的早期诊断方法、早期正确的联合治疗和适时地应用机械通气将有助于改善重症支原体肺炎患儿的预后、减少并发症的发生。