金振口服液氨基酸特征指纹图谱及29种氨基酸同时定量的质量控制方法研究

目的 氨基酸自动分析仪建立金振口服液（JOL）氨基酸特征指纹图谱及29种氨基酸（磷酸丝氨酸、牛磺酸、天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、肌氨酸、甘氨酸、丙氨酸、瓜氨酸、α-氨基丁酸、缬氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、β-丙氨酸、β-氨基丁酸、γ-氨基丁酸、鸟氨酸、赖氨酸、组氨酸、3-甲基组氨酸、精氨酸、羟脯氨酸、脯氨酸）同时定量的分析方法。方法 采用日立855-4507型离子交换色谱柱（60 mm×4.6 mm, 3 μm）;检测波长分别为570、440 nm;流动洗脱泵体积流量0.35 mL/min;衍生泵体积流量0.30 mL/min;反应柱温135℃;以柠檬酸缓冲溶液为流动相进行梯度洗脱,建立JOL氨基酸特征指纹图谱,对29个主要特征峰进行化学成分指认,运用中药指纹图谱相似度软件对16批市售制剂进行相似度评价,同时对29种氨基酸进行含量测定。结果 建立了JOL氨基酸特征指纹图谱结合29种氨基酸同时定量的方法;16批市售制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.989～1.000;29种定量成分线性关系良好（R²＝1.000）,且平均回收率为95.71%～101.87%;16批市售制剂29种氨基酸的质量浓度分别为磷酸丝氨酸15.457 2～29.362 4 μg/mL、牛磺酸64.423 4～114.238 6 μg/mL、天冬氨酸19.056 4～32.549 0 μg/mL、苏氨酸6.704 8～7.841 8 μg/mL、丝氨酸22.609 4～39.382 8 μg/mL、天冬酰胺61.134 0～115.456 0 μg/mL、谷氨酸32.254 6～63.127 2 μg/mL、谷氨酰胺5.223 8～8.953 2 μg/mL、肌氨酸4.081 0～44.007 6 μg/mL、甘氨酸12.403 0～23.516 4 μg/mL、丙氨酸33.876 8～44.257 4 μg/mL、瓜氨酸3.514 2～9.881 0 μg/mL、α-氨基丁酸1.126 4～2.287 8 μg/mL、缬氨酸11.584 6～15.469 0 μg/mL、胱氨酸1.660 2～4.041 8 μg/mL、异亮氨酸4.087 8～5.469 2 μg/mL、亮氨酸8.295 2～11.724 0 μg/mL、酪氨酸7.492 6～10.761 2 μg/mL、苯丙氨酸4.856 4～9.248 0 μg/mL、β-丙氨酸2.309 4～6.782 6 μg/mL、β-氨基丁酸0.175 0～14.790 6 μg/mL、γ-氨基丁酸17.654 4～26.621 8 μg/mL、鸟氨酸42.338 4～58.172 6 μg/mL、赖氨酸12.994 9～28.498 0 μg/mL、组氨酸1.802 6～4.067 4 μg/mL、3-甲基组氨酸2.608 4～4.384 0 μg/mL、精氨酸107.141 6～301.649 8 μg/mL、羟脯氨酸15.811 6～37.807 6 μg/mL、脯氨酸143.714 6～243.956 6 μg/mL。结论 氨基酸自动分析仪法测定JOL中氨基酸具有重现性好、结果可靠的优点;且JOL中氨基酸类成分定性定量研究在一定程度上明确了君药山羊角对制剂组方的成分贡献,为构建JOL全方位质量评价体系提供了有益补充。     

散寒化湿颗粒HPLC特征图谱研究

目的 建立散寒化湿颗粒（Sanhan Huashi Granules,SHG）的HPLC特征图谱,并对全部特征峰进行化学成分指认和药材来源归属,为其整体质量评价提供科学依据。方法 采用Waters Atlantis T3 C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30 ℃;检测波长为250 nm,建立SHG的HPLC特征图谱。采用UHPLC-QTOF MS、NMR、对照品比对及定向分离技术对10个特征峰进行了准确的化学成分指认并归属处方药味来源,并对20批制剂进行一致性评价。结果 建立了SHG的HPLC特征图谱,10个特征峰得到明确化学成分指认,分别为腺嘌呤（1号峰）、尿苷（2号峰）、鸟苷（3号峰）、肌苷（4号峰）、5-羟甲基糠醛（5号峰）、木兰苷A（6号峰）、佛手酚-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷峰（7号峰）、紫花前胡苷（8号峰）、6''-O-(反式阿魏酰基)-紫花前胡苷（9号峰）、茴香酸对羟基苯乙酯（10号峰）,并归属了特征峰处方药味来源,分别为1号峰归属于麻黄、苦杏仁、羌活、广藿香、苍术、白术、焦六神曲、焦麦芽、地龙、徐长卿、葶苈子,2号峰归属于厚朴、羌活、广藿香、佩兰、苍术、白术、地龙、徐长卿、葶苈子,3号峰归属于羌活、广藿香、地龙、徐长卿、葶苈子,4号峰归属于地龙,5号峰归属于焦三仙（焦山楂、焦麦芽、焦六神曲）,6号峰归属于厚朴,7～10号峰归属于羌活。20批制剂均符合特征图谱的规定,批间一致性良好。结论 所建立的SHG的HPLC特征图谱方法简便,稳定性、重复性好,初步描绘了SHG的整体化学成分特征,为进一步提升其质量标准奠定了基础,同时也可为其他经典名方质量标准研究提供参考。     

基于系统药理学的厚朴药理作用机制探究

目的 运用系统药理学的方法探究中药厚朴的药理作用机制。方法 以中药成分数据库和大量文献检索，建立厚朴成分数据库。运用ADME筛选厚朴的活性成分，并利用数据库和内部软件进行靶点的识别。最后通过网络分析和通路分析等系统药理学方法对厚朴药理作用机制进行分析。结果 建立厚朴成分数据库，共包含144种厚朴活性成分。经过活性成分的筛选，得到7个满足筛选条件的厚朴活性成分，并且识别出54个相互作用靶点。经过网络分析，发现这些靶点主要与肠动力、炎症、糖尿病和血栓疾病相关。通过通路分析，发现厚朴的靶点共涉及152条生物通路，且这些通路涉及除了上述疾病外，还参与到癌症的相关机制。结论 本研究不仅运用系统药理学的方法揭示了厚朴对肠动力、炎症、糖尿病、血栓和癌症的药理机制，还体现出厚朴"多成分-多靶点-多通路"的典型中药特点，更为今后探究中药药理作用机制供了一个新的思路。     

没药不同提取物对小鼠痛经模型的影响

目的 探讨没药提取物对原发性痛经小鼠模型的影响及其效应物质基础和可能的作用机理.方法 采用原发性痛经小鼠模型,观察没药不同提取物对原发性痛经小鼠的扭体反应以及对子宫匀浆中Ca2+含量、NO含量的影响,并观察其组织病理变化.结果 水提后药渣醇提物的石油醚萃取部位大剂量组能够显著地降低痛经小鼠扭体次数,提高痛经小鼠子宫组织中NO水平,降低子宫组织中Ca2+水平,且优于小剂量组.病理切片亦显示了该部位能够改善小鼠痛经模型的病理异常.结论 没药水提后药渣醇提液的石油醚萃取部位可能是其治疗原发性痛经的主要有效部位,其作用机理可能与影响子宫组织中NO和Ca2+水平有关.     

基于物料粉体学性质对5种制剂品种颗粒溶化性的相关性研究

目的 以杏贝止咳颗粒(Xingbei Zhike Keli,XZK)、桂枝茯苓胶囊(Guizhi Fuling Jiaonang,GFJ)、天舒胶囊(Tianshu Jiaonang,TJ)、腰痹通胶囊(Yaobitong Jiaonang,YJ)与参乌益肾片(Shenwu Yishen Pian,SYP)5个品种的中间体粉末及颗粒为研究对象,研究中间体粉体学性质与颗粒溶化性的相关性,筛选出影响颗粒溶化性的关键物料属性,为提升产品质量属性提供参考。方法 通过对5个品种各20批粉末及颗粒取样,以物料粉体的休止角(α)、松密度(D_a)、振实密度(D_c)、孔隙率(I_e)、卡尔指数(IC)、豪斯纳比(IH)、含水量(HR)、吸湿性(H)、粒径(D₁₀、D₅₀、D₆₀、D₉₀)、均匀性(UN)、比表面积(SSA)、相对均齐度(Iθ)、分布范围(span)、宽度(width)、粒径<50μm百分比(Pf)为自变量,中间体颗粒溶化率(DR)为因变量构建关联模型,并以物理指纹图谱与热点图分别对各品种批次间及品种间物理属性相关性进行分析,结合多元统计分析方法<研究中药物料粉体学与颗粒溶化性的相关性。结果 对所绘制雷达图进行相似度分析,XZK混合粉相似度为86.52%~99.92%,GFJ、TJ软材细粉相似度分别为90.38%~99.97%、89.79%~99.99%,YJ喷干细粉相似度为87.98%~99.90%,SYP干膏粉相似度为86.94%~99.97%;品种间物性参数相关性矩阵热点图显示,各品种指标间相关系数为-0.964~0.998,且在D_a、D_c、I_e、IC、IH、HR、Iθ及span上存在较高相似性,在α与粒径分布范围上存在差异性。主成分分析(principal component analysis,PCA)提取了2个主成分,主成分1主要由IC、IH、SSA及代表粒径性质的D10、D50、D60、D90与Iθ、width、Pf构成,解释率达到57.06%;主成分2由α、D_a、D_c、I_e、HR及UN、span组成,解释率达到20.76%。偏最小二乘回归分析(partial least squares regression analysis,PLS)结果显示,对DR影响显著的是D_c、H、SSA、HR、IH、I_e及IC。结论 运用数据统计分析方法所建立的模型可以较好地预测中间体影响颗粒溶化性的关键物料属性,通过控制相关属性指标来达到改善颗粒生产中出现的析出、焦屑、结块等溶化性问题。     

乳香、没药药对配伍挥发油成分的GC-MS分析

目的 考察乳香、没药药对配伍对挥发油化学成分的影响.方法 采用气-质联用系统对乳香、没药药材以及药对配伍中的挥发油进行分析,评价配伍对挥发油成分及含量的影响.结果 采用GC-MS对乳香、没药药材和药对挥发油的成分进行分析比较,发现乳香挥发油中检出的trans-3,5,6,8 a-四氢-2,5,5,8a-四甲基-y1-2...     

盐酸氨溴索不同给药方式治疗新生儿肺炎68例临床分析

目的:探讨盐酸氨溴索不同给药方式治疗新生儿肺炎的疗效及安全性。方法:依据不同的给药方式随机分组,均采用常规治疗方法。干预组分别加用盐酸氨溴索静脉滴注和雾化治疗。结果:治疗组显效率及有效率均优于对照组,提示盐酸氨溴索可明显改善新生儿肺炎症状和体征。治疗过程中未发现与盐酸氨溴索相关的药物不良反应。同时雾化组与静脉应用组显效率及有效率间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:盐酸氨溴索治疗新生儿肺炎疗效显著,有良好的安全性,值得临床推广;雾化治疗更具有推广价值。     

不同中枢神经系统感染患儿脑脊液肝细胞生长因子水平变化的意义

目的通过观察病毒性脑炎、细菌性脑膜炎及结核性脑膜炎患儿脑脊液肝细胞生长因子(HGF)水平变化,探讨其是否可以作为一个鉴别诊断的生化指标,为临床疾病的诊断提供依据。方法选择临床确诊病毒性脑炎30例、细菌性脑膜炎21例、结核性脑膜炎19例及对照组24例,采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测各组患儿脑脊液HGF水平。同时将HGF水平分别与脑脊液中白细胞计数和蛋白定量进行直线相关分析,观察脑脊液中HGF水平与脑脊液中白细胞计数和蛋白定量的关系。结果细菌性脑膜炎组、结核性脑膜炎组脑脊液HGF水平高于病毒性脑炎组和对照组,结核性脑膜炎组高于细菌性脑膜炎组患儿,细菌性脑膜炎组、结核性脑膜炎组及病毒性脑炎组与对照组患儿比较均有显著性差异(Pa<0.05),病毒性脑炎组与对照组患儿比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HGF有可能成为鉴别细菌性脑膜炎、结核性脑膜炎及病毒性脑炎的指标之一。     

长程服用苯巴比妥和托吡酯对幼鼠脑组织中Bcl-2和Bax蛋白的影响

目的探讨长程服用苯巴比妥(PB)和托吡酯(TPM)对幼鼠脑组织中Bcl-2和Bax蛋白的影响。方法将60只日龄18 d的健康SD幼鼠随机分为正常对照组、PB组、TPM组,各20只。根据给药时程又将每个给药组分为2周短程及4周长程给药组,共6组,各10只。PB组给予PB 30 mg·kg-1·d-1灌胃,TPM组给予TPM 40 mg·kg-1·d-1灌胃,正常对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。3组分别于2周、4周时测幼鼠体质量后采血并处死,称取脑质量,脑组织石蜡包埋,切片,进行苏木素-伊红染色及尼氏染色,光镜下观察脑组织形态变化。用免疫组化方法检测各组大鼠脑切片海马及额叶皮质凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。结果短程PB给药组和短程TPM给药组体质量、脑质量及脑组织结构变化与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。长程PB给药组幼鼠脑质量较正常对照组明显减轻(P0.01),额叶皮质神经元减少,且神经元结构明显异常。长程TPM给药组体质量、脑质量及脑组织结构变化与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。长程PB给药组幼鼠脑组织额叶皮质Bax蛋白表达水平高于正常对照组(P0.01),Bax/Bcl-2比值高于正常对照组(P0.05)。长程TPM给药组幼鼠脑组织Bax蛋白水平及Bax/Bcl-2比值与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论长程服用PB可引起发育中脑组织明显的组织学损伤及神经元坏死与过度凋亡,幼鼠脑组织额叶皮质Bax蛋白表达显著增强和Bax/Bcl-2比值增高可能是未成熟鼠脑质量减轻和引起脑功能障碍重要原因。长程服用TPM后幼鼠脑组织结构无明显变化。     

少腹逐瘀汤对寒凝血瘀大鼠模型血液流变性及卵巢功能的影响

目的:评价少腹逐瘀汤对寒凝血瘀SD大鼠模型血液流变性及卵巢功能的影响。方法:采用冰水浴及注射肾上腺素的方法造成SD大鼠急性血瘀模型,对其血液流变性及卵巢分泌功能进行测定。结果:少腹逐瘀汤能改善寒凝血瘀SD大鼠血液流变性指标;对卵巢功能也显示出一定改善作用。结论:少腹逐瘀汤能改善寒凝血瘀SD大鼠全血黏度、血浆黏度、血沉、红细胞压积及调节E₂和P的水平。