SARS-CoV-2核酸检测试剂盒的制备及样本混检性能分析

目的 开发一种适用于中国大规模人群新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染筛查的核酸检测试剂盒,分析对多样本混合检测的效果,为临床多样本混合检测提供理论指导.方法 选用SARS-CoV-2的ORF1ab、N 2个靶基因,并加入RNase P作为内标基因进行试剂盒研发.采用单一变量及正交实验优化试剂盒中3个靶基因引物及探...     

免疫治疗前后不明原因习惯性流产患者ACA、封闭抗体表达的变化

目的 探讨健康妊娠妇女与不明原因习惯性流产妇女（unexplained recurrent spontaneous abortion;URSA）免疫治疗前后ACA（抗心磷脂抗体）、APLA（封闭抗体）表达差异,评价ACA、APLA在指导再次妊娠中的作用.方法 采用酶联免疫试验分别测定健康对照组和不明原因习惯性流产患者治疗前后ACA、APLA的变化.结果 免疫治疗后165例不明原因习惯性流产患者有126例再次妊娠,其中妊娠超过6个月的有112例,14例再次发生早期流产不明原因习惯性流产患者治疗前ACA、APLA阳性百分率分别是30.5%（51/165）、9.2%,健康对照妇女ACA、APLA百分率为4.0%、28.0%,健康对照组ACA阳性百分数低于不明原因习惯性流产患者,APLA高于不明原因习惯性流产患者,两组ACA、APLA表达有显著性差异.免疫治疗后不明原因习惯性流产患者封闭抗体阳性百分率为78.3%,与治疗前相比,免疫治疗可增加APLA的表达.免疫治疗后ACA阳性率为26.1%.与治疗前相比ACA没有明显变化.结论 淋巴细胞主动免疫治疗能提高不明原因习惯性流产患者再次妊娠的成功率,APLA对指导习惯性流产患者妊娠及对再次妊娠的结局有良好的参考价值,但ACA不能作为一个独立的指标评价或指导再次妊娠.     

内皮前体细胞的临床应用进展

内皮前体细胞（EPCs）是指出生后机体中存在的能特异性归巢于血管新生组织并分化成内皮细胞的一群干细胞，包括从成血-血管干细胞到完全分化的内皮细胞之间一定阶段的细胞群体。研究表明，EPCs可在生理或病理条件下迁移到新血管形成位点并在原位分化成内皮细胞，能快速修复损伤血管。为了解决来源于骨髓和外周循环中EPCs数量过少的问题，Tatiana等对人体骨髓内和外周血中的单个核细胞（MNCs）转化为EPCs的潜能进行了研究，     

DNA甲基化转移酶在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌中DNA甲基化转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)表达的临床意义与预后的相关性.方法 运用TCGA和GEO数据库分析DNA甲基化转移酶在胃癌和正常组织中的表达差异;运用生存期分析软件Kaplan-Meier plotter分析DNA甲基化转移酶对胃癌患者预后的影响;下载TCGA和GEO数据库中...     

猪胶原基真皮支架成纤维细胞生长特性的观察

目的：观察成纤维细胞在一种新型的猪胶原基真皮支架（PCDM）上的粘附生长特性,探讨提高异种真皮支架细胞相容性的方法。方法:分别在PCDM乳头层面和网状层面种植人皮肤成纤维细胞,于接种后1、7、14d通过HE染色,扫描和透射电镜下观察成纤维细胞在PCDM上的生长情况。结果:人皮肤成纤维细胞早期在乳头层真皮面的粘附优于网状真皮面,而晚期更多的网状真皮面可见到细胞形成复层并长入基质内部。结论:PCDM具有良好的细胞相容性,是与异体真皮最为接近的天然真皮支架,改良生产工艺以及去除基底膜和真皮乳头层可提高其细胞相容性。     

AFP基因特异性miRNA表达质粒的构建及鉴定

目的 构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因的miRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法 沿mRNA序列寻找连续两个AA及后面的19个核苷酸,通过同源性比较,选择与其他任何基因无同源性的序列即作为潜在的miRNA靶位点,针对AFP基因的编码序列体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR RNAi EXPRESSION VECTOR载体连接后转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、PCR及基因测序鉴定其相对分子质量及插入片段的序列.结果 纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,PCR鉴定结果符合目的 条带(260 bp左右)大小,插人的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论 成功构建了针对人AFP基因的miRRA表达质粒.     

急性白血病M4Eo型患者ETV6基因重排及其意义

目的探讨在急性髓细胞白血病（AML）M4Eo型患者中检测到ETV6基因重排的临床意义。方法对3例AML-M4Eo患者骨髓标本进行细胞培养,制备染色体,分析核型,Split-signal FISH技术分析12p13染色体易位,RT-PCR检测ETV6/ARG融合基因产物。结果核型分析显示3例患者均有inv(16),Split-signal FISH检出12p13染色体易位1例,RT-PCR证实患者ETV6/ARG融合基因产物阳性。这是国际上第2例报道ETV6/ARG融合基因在AML-M4Eo中表达。结论伴有ETV6/ARG融合基因的患者对化疗不敏感,预后较ETV6/ARG融合基因阴性者差。Split-signal FISH是检测ETV6基因重排准确可靠的手段。     

SARS-CoV抗体实验诊断中的假阳性原因分析

目的：探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的假阳性问题。方法：应用酶联免疫吸附试验(EUSA)和荧光定量RT-PCR技术检测了16l例非SARS患者SARS-Cov抗体的阳性率。结果：59例正常对照中,IgG抗体的阳性率为3．4％(2／59);40例肿瘤患者中,IgG抗体阳性率为17．5％(7／40);3l例自身免疫病患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为6．5％(2／31)和22．6％(7／31),IgG抗体和IgM抗体同时阳性为6．5％(2／31);3l例系统性红斑狼疮(SI正)患者中,IgM抗体和IgG抗体阳性率分别为29．0％(9／31)和58．1％(18／31),IgG抗体和IgM抗体同时阳性为22．6％(7／31)。IgM和IgG抗体诊断SARS的假阳性率分别为6．8％和21．1％,两种抗体同时诊断SARS的假阳性率为5．6％。经RT—PCR证实上述阳性均为假阳性。结论：两种抗体同时测定可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

IFA和ELISA在肿瘤患者血清SARS-CoV抗体测定中的对比分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoY)&体在SARS病原中诊断中的特异性及其在肿瘤患者血清中的假阳性问题。方法 应用ELISA和IFA检测了111例正常对照和40例肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在111例正常对照和40例肿瘤患者中,IgM抗体均阴性,IgG抗体在正常对照中的阳性率为3.6%(4/111),在肿瘤患者中的阳性率17.5％(7/40),IgC抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。经IFA检测,上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。结论 IFA诊断SARS的特异性为100％,ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。应用ELISA测定SARS-CoV抗体时,应同时测定两种抗体以降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。     

髓样细胞分化蛋白抑制乙型肝炎病毒复制的机制研究

目的探讨髓样细胞分化蛋白（MyD88）对乙型肝炎病毒复制的抑制作用及其机制。方法以连接了MyD88全长序列的腺病毒为载体感染HepG2.215细胞,免疫荧光法确认Ad5-MyD88的感染效率后,以无关蛋白GFP作为对照,用ELISA、Real-time PCR、Northern blotting、Southern blotting分别检测上清中的HBsAg和HBeAg的含量及HBV RNA、DNA的表达观察MyD88对HBV复制抑制作用的影响。结果与GFP相比,感染了带有MyD88序列腺病毒的HepG2.215细胞上清中HBsAg、HBeAg含量、细胞内RNA及Core particle DNA的水平全面下降。结论 MyD88可降低HepG2.215细胞内HBV的复制水平;MyD88在抑制HBV复制过程中有着一定的作用。