影响良性终末期肝病肝移植术后远期死亡的预后因素分析

目的: 分析良性终末期肝病肝移植患者术后中远期的生存情况和导致中远期生存率下降的预后因素。 方法: 回顾性地分析2003年10月至2008年6月在我院行原位肝移植手术,且术后存活超过1年的221个良性终末期肝病受者的资料,选取包括受者术前变量、供者变量、术中变量和受者术后变量共27个可能影响患者长期存活的危险因素,采用Cox回归分析,筛选出影响肝移植受者长期存活的独立危险因素。 结果: 221个受体中有28人在术后1年后死亡,主要死亡原因和相关死亡率为：感染、胆道并发症、HBV复发/再感染。保留在Cox回归方程内的协变量为：高龄、ABO血型、冷缺血时间、术后感染部位和胆道并发症。 结论: 良性终末期肝病的移植患者的中远期死亡原因主要是感染、胆道并发症和HBV复发/再感染。影响受者术后中远期存活的危险因素包括高龄（≥60y）,ABO血型（血型不符）,冷缺血时间（＞12h）,术后感染部位（肺部感染）和胆道并发症（移植肝胆管弥漫性狭窄）。术前严格筛选高龄患者,选择ABO血型相同或相符的供者,缩短冷缺血时间,积极防治术后感染和胆道并发症,将有助于提高受者术后中远期存活。     

小肠远端缺血预处理对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察小肠远端缺血预处理对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将40只Wistar大鼠被随机分为4组:假手术组(Sham)、单纯远端缺血预处理组(RJPC)、单纯缺血再灌注组(IR)和远端缺血预处理+缺血再灌注组(RIPC+IR).远端缺血预处理方式采用于小肠系膜根部游离动脉血管并夹闭5 min后开放5 min,反复3次.缺血再灌注模型采用于肝蒂阻断肝脏供血45 min,阻断范围占整个肝脏的70%,开放复流3 h.检测血液中谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)、肝脏苏木素-伊红(HE)病理、心血管指标.结果 复流3 h后,RIPC+IR组的ALT、LDH、心血管指标[平均动脉血压(MAP)、外周血氧饱和度(SaO2)]为(434.26±133.42)U/L、(2536±181)U/L、(83.1±7.3)mm Hg(1 mm Hg＝0.133 kPa)和(97.4±0.5)%,明显好于IR组(953.64±114.12)U/L、(5734±296)U/L、(67.1±7.4)mm Hg和(93.1±0.6)%(P<0.05).RJPC+IR组肝脏HE病理改变程度比IR组小.门静脉中IR组血清NO浓度(15.54±2.34)μmoL/L低于RIPC+IR组(18.10±1.82)μmol/L(P<0.05),外周血中,IR组血浆ET浓度(672.4±63.1)ng/L高于RIPC+IR组(451.7±63.6)ng/L(P<0.05),门静脉中IR组血清ET浓度(612.5±48.2)ng/L高于RIPC+IR组(401.5±51.2)ng/L(P<0.05).结论 小肠RIPC可以减轻肝脏缺血再灌注损伤,具有简便、易操作的特点,NO及ET可能在其中发挥了重要作用.     

基因转移CTLA4Ig和CD40LIg在大鼠异种胰岛移植排斥反应中的作用

目的 探讨基因转移细胞毒性T细胞相关抗原4免疫球蛋白（CTLA4-Ig）和T细胞分化群40L免疫球蛋白（CD40L-Ig）在异种胰岛移植排斥反应中的作用及其机理。方法 建立大鼠-小鼠异种胰岛移植模型,用携带CTLA4-Ig和CD40L-Ig基因的重组腺病毒感染移植胰岛细胞,观察糖尿病小鼠胰岛移植后血糖变化、生存情况及移植物病理形态学改变,检测移植物CTLA4-Ig、CD40L-Ig、胰岛素的表达和移植小鼠白细胞介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的水平变化。结果 （1）糖尿病小鼠移植后2 d血糖降至正常,对照组(A)血糖平均在移植后8 d升高,CTLA4Ig转染组(B)、CD40LIg转染组(C)和联合转染组(D)血糖分别在24、21和68 d升高。（2）对照组、CTLA4Ig转染组、CD40LIg转染组和联合转染组的移植物存活时间分别为(8.2±0.9) d,(28.7±4.0) d,(26.6±3.2) d 和 (73.6±9.8) d,联合转染组较对照组、CTLA4Ig转染组和CD40LIg转染组显著延长（P<0.01）;CTLA4Ig转染组和CD40LIg转染组较对照组显著显著延长（P<0.01）。（3）对照组在移植后1周内,IL-2、TNF-α的水平均急剧上升,较移植前显著升高（P < 0.01）。（4） 各治疗组移植物见成片的胰岛细胞团,未见淋巴细胞浸润,可见胰岛素、CTLA4Ig和CD40LIg的表达。结论 基因转移CTLA4-Ig和CTLA4-Ig均可抑制异种胰岛移植排斥反应,二者联合效果优于单独使用。     

紫杉醇在大鼠原位肝移植中的作用及其对细胞毒性T淋巴细胞实验的影响

目的观察紫杉醇在大鼠原位肝移植中的作用及其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的影响。方法建立Wistar→SD大鼠肝移植的急性排斥模型。将大鼠分为对照组(阻断全肝血流)、急排组(Wistar→SD肝移植)、紫杉醇组(Wistar→SD肝移植,紫杉醇腹腔注射0.75mg·kg-1·d-1,观察生存时间、病理改变、生化指标及CTL、T淋巴细胞凋亡情况。结果紫杉醇组大鼠的术后存活时间高于急排组,[(18.2±1.5)dvs(8.8±1.9)d,P0.01)。急排组的HE评分(Banff)高于紫杉醇组(7.80±0.83vs4.80±0.82,P0.01)。紫杉醇组的白蛋白水平高于急排组(P=0.003);紫杉醇组的谷丙转氨酶水平低于急排组(t=25.23,P0.01)。CTL检测中,急排组的特异性杀伤靶细胞的百分率均高于紫杉醇组(P0.01)。急排组的T淋巴细胞的凋亡率低于紫杉醇组[(7.16±1.56)%vs(16.47±2.51)%,P0.01]。结论紫杉醇在大鼠肝移植中具有免疫抑制作用,可能通过诱导T淋巴细胞凋亡来抑制T淋巴细胞的活化发挥作用。     

西罗莫司对人肝癌裸鼠肝脏移植瘤生长的影响

Objective To study the effects of sirolimus (SRL) on the growth of transplanted human hepatocellular carcinoma (HCC) in nude mice. Methods HepG2 cells were Implanted into the liver of nude mice. The implanted mice were then treated with SRL and tacrolimus (FK506). The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) was detected by immunohistology, microvessel density (MVD) was counted by immunostaining with anti-CD34 antibody for endothelial cells. Tumor apoptosis was detected by terminal deoxynuclcotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL) assay. Results The tumor weight was (352±38) mg, (683±53) mg and (675±45) mg in SRL, FKS06 and control group respectively. The tumor weight was significantly decreased in SRL group (P < 0.0 I), and there was no difference between FKS06 group and control group. The expression of VEGF and PCNA protein was remarkably down-regulated in SRL group compared to control group (P < 0.05), and it was not significantly different between FK506 group and control group (P > 0.05). Compared to the control group, MVD was significanly decreased in SRL group, and the apoptosis index of tumor cell was significantly higher in SRL group (P < 0.01). Conclusion SRL inhibits transplanted HCC tumor growth by reducing tumor angiogenesis, inhibiting tumor proliferation and inducing tumor apoptosis.     

西罗莫司对人肝癌裸鼠肝脏移植瘤生长的影响

Objective To study the effects of sirolimus (SRL) on the growth of transplanted human hepatocellular carcinoma (HCC) in nude mice. Methods HepG2 cells were Implanted into the liver of nude mice. The implanted mice were then treated with SRL and tacrolimus (FK506). The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) was detected by immunohistology, microvessel density (MVD) was counted by immunostaining with anti-CD34 antibody for endothelial cells. Tumor apoptosis was detected by terminal deoxynuclcotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling (TUNEL) assay. Results The tumor weight was (352±38) mg, (683±53) mg and (675±45) mg in SRL, FKS06 and control group respectively. The tumor weight was significantly decreased in SRL group (P < 0.0 I), and there was no difference between FKS06 group and control group. The expression of VEGF and PCNA protein was remarkably down-regulated in SRL group compared to control group (P < 0.05), and it was not significantly different between FK506 group and control group (P > 0.05). Compared to the control group, MVD was significanly decreased in SRL group, and the apoptosis index of tumor cell was significantly higher in SRL group (P < 0.01). Conclusion SRL inhibits transplanted HCC tumor growth by reducing tumor angiogenesis, inhibiting tumor proliferation and inducing tumor apoptosis.     

嗜酸性粒细胞升高在诊断肝移植术后迟发性急性排斥反应中的价值

目的 评价外周血嗜酸性粒细胞升高诊断肝移植6个月后发生的急性排斥反应(acute rejection,AR)的价值.方法 回顾性分析肝移植术后肝穿刺活检患者的临床资料,根据病理确诊结果分为AR组和非AR组,比较2组患者肝穿刺当天或前1天血常规中白细胞的分类,比较嗜酸性粒细胞升高在早期(术后1个月内)、中期(1～6个月)和后期(6个月后)AR组中的发生率,并评价嗜酸性粒细胞升高诊断后期AR的敏感性和特异性.结果 共185例次肝穿刺、161例肝移植患者资料入组,110例次AR,其中早期32例(29.1％)、中期54例(49.1％)、后期24例(21.8％).AR组白细胞总数、中性粒细胞绝对值和相对值显著低于非AR组,但淋巴细胞相对值、嗜酸性粒细胞绝对值和相对值显著高于非AR组.嗜酸性粒细胞绝对值≥0.4×109/L或相对值≥4％共28例,其中AR组25例(22.7％),早期、中期和后期AR分别为2例(6.3％)、13例(24.1％)和10例(41.7％),嗜酸性粒细胞升高诊断后期AR的敏感性和特异性分别为41.7％和100％.结论 肝移植术后急性排斥反应患者嗜酸性粒细胞显著高于非排斥患者,嗜酸性粒细胞升高对肝移植术后迟发性急性排斥反应具有很高的诊断价值.     

供肝动脉变异和植入前动脉重建

目的探讨供肝动脉变异类型,术中损伤原因及植入前重建的方法。方法1993年10月至2004年12月,中山大学附属第三医院肝脏移植中心共行供肝切取和修整术600例,术中记录肝动脉变异类型和术中动脉误伤,重建变异肝动脉,形成单一的备吻合血管。结果在600例供肝中,19·2%(115/600)供肝动脉变异。53例(53/600)变异动脉须血管重建,其中39例(39/53)代替性或副肝右动脉来自肠系膜上动脉,1例(1/53)代替性肝右动脉来自腹腔干,5例(5/53)代替性或副肝左动脉来自胃左动脉,2例(2/53)变异肝左动脉和3例(3/53)变异肝右动脉离断后来源不清,3例(3/53)变异肝左和肝右动脉双重替代。6例(6/485)供肝切取术中意外损伤正常肝动脉,需要动脉重建。变异肝动脉损伤19例(19/115),均行动脉重建。动脉重建方法包括变异动脉与脾动脉(36/53)、胃十二指肠动脉(12/53)以及复杂的吻合方法(5/53)。结论供肝快速切取过程中,肝动脉变异增加肝动脉意外损伤发生率,损伤变异动脉均须在植入前重建。变异动脉重建方法的选择取决于肝动脉解剖学特点。     

抗CD40L单克隆抗体在异种胰岛移植排斥反应中的作用

目的 探讨抗CD40L单克隆抗体在异种胰岛移植排斥反应中的作用及其机理.方法 建立人-大鼠异种胰岛移植模型,用抗CD40L单克隆抗体进行干预治疗,观察糖尿病大鼠行异种胰岛移植后的血糖变化,糖尿病大鼠和移植物的生存情况及移植物病理形态学改变,采用 ELISA法检测糖尿病大鼠细胞因子IL-2和TNF-α水平的变化.结果 ①全部糖尿病大鼠在胰岛移植后第(2.3±0.2) d血糖降至正常,对照组血糖在移植后第(8.1±0.6) d开始明显升高,治疗组血糖在移植后第(18.5±1.2) d开始明显升高,明显晚于对照组(P＜0.01).②治疗组移植物存活时间[(22±8.2) d]较对照组[(10±2.1) d]显著延长(P＜0.01).③糖尿病大鼠生存时间,治疗组[(35±6.5) d]显著长于对照组[(21±5.7) d ],P＜0.05.④对照组在移植后第(3.2±0.3) d IL-2及TNF-α的水平均急剧上升,至移植后第(7.3±0.5) d达到高峰; 治疗组IL-2及TNF-α的水平在移植后第(22.6±1.7) d开始明显上升,至移植后第(28.5±2.2) d达到高峰,明显晚于对照组(P＜0.01).结论 抗CD40L单克隆抗体可抑制异种胰岛移植的排斥反应,延长受体大鼠和移植物的存活时间.     

缺血预处理对大鼠肝脏部分切除术后残留肝脏的保护作用及其机制的研究

目的　探讨缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IPC)对大鼠肝脏部分切除术后残留肝脏的保护作用及其机制。方法　 5 0只雄性SD大鼠随机均分为假手术 (Sham)、单纯热缺血 (warmis chemia ,WI)、IPC、IPC L arginine(NO供体 )和WI NAME(NO合成酶抑制剂 ) 5组。术前、术后 1、2、3d检测血清AST和ALT ,术前、IPC后、热缺血后 0 5、1、2、3h检测肝脏组织NO浓度。AST和ALT用自动生化分析仪检测 ,NO用硝酸还原法检测。结果　WI、IPC、IPC L arginine及WI NAME组术后AST和ALT均高于Sham组 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,IPC和WI NAME组术后AST和ALT低于WI和IPC L arginine组 (P <0 0 5 )。WI、IPC、IPC L arginine及WI NAME组术后 0 5h肝脏组织NO浓度开始升高(P <0 0 5或P <0 0 1) ,IPC和WI NAME组术后肝脏组织NO浓度低于WI和IPC L arginine组 (P <0 0 5 )。结论　IPC对大鼠肝脏部分切除术后残留肝脏的缺血再灌注损伤有保护作用。IPC通过抑制大鼠热缺血再灌注肝脏产生NO ,减少NO所诱发的肝脏组织细胞的凋亡或坏死 ,保护肝脏功能。