神经肽Y2受体促进大鼠学习记忆的机制

目的:观察双侧海马插管注射神经肽Y2受体的反义寡核苷酸对大鼠海马c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响,探讨Y2受体在学习记忆中可能的作用机制。方法:双侧海马插管注射Y2受体的反义、错义寡核苷酸或生理盐水,应用RT-PCR和免疫组化方法检测大鼠海马中c-fos基因在跳台法训练后的表达水平变化。结果:①反义组大鼠海马c-fos基因mRNA表达水平23.40±8.87明显低于生理盐水组60.38±15.52和错义组53.14±11.71,差异有显著性意义(F=22.54,P<0.001)。但错义组与生理盐水组之间大鼠海马c-fos基因的mRNA表达水平差异无显著性意义,(P>0.05)。②反义组大鼠海马c-Fos蛋白阳性细胞数在海马CA1,CA3和齿状回分别为16.33±6.18,27.00±9.72和109.67±23.44,均低于生理盐水组和错义组,而错义组与生理盐水组之间c-Fos蛋白表达水平差异无显著性意义。结论:神经肽Y2受体可能是通过调节c-fos基因的表达参与大鼠的记忆形成过程。     

注意缺陷障碍动物模型的行为学特征检测

目的：以国外常用的注意缺陷障碍动物模型SHR大鼠为观察对象，观察注意缺陷障碍动物模型的行为学特征。 方法：实验于2003—12／2004-01在南京医科大学动物实验中心完成，清洁级SHR大鼠（注意缺陷障碍组）和WKY大鼠（对照组）各10只，鼠龄4周，均为雄性，体质量70-90g，两组之间差异不显著。利用开场试验观察记录大鼠穿越的格子数、大鼠直立次数、理毛次数，以及粪便数，lat迷宫观察大鼠穿越角落的频数及直立和斜搭在墙上的频率，跳台试验记录每只大鼠受到电击后跳上平台的次数，以此作为学习成绩。24h后重新测试，在铜栅通电的情况下，直接将大鼠置于橡皮台上，记录第1次跳下橡皮台的潜伏期和5min内的错误次数作为记忆的成绩。 结果：10只SHR大鼠和10只WKY大鼠均进入结果分析。①白天及夜晚开场中SHR大鼠穿越格数及直立次数均较对照组WKY大鼠显著增多（白天：72．10&;#177;15．44，37．50&;#177;9．59，29．40&;#177;15．19，10．30&;#177;8．55；夜晚：83．70&;#177;11．78．49．00&;#177;7．94,42．00&;#177;18．12，14．10&;#177;10．45，P〈0．001）。②SHR大鼠在Lat迷宫中30min内，穿越角落频数、直立次数、理毛次数均较对照组WKY大鼠显著增加（128．30&;#177;29．38，151．90&;#177;46．51，14．00&;#177;5．03；46．10&;#177;22．97，36．00&;#177;26．31，7．90&;#177;4．12，P〈0．001或P〈0．05）；将其分为0～10min。10—20min、20～30min3个时间段来分析，发现随着时间的延续，SHR和WKY大鼠穿越角落频数逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠穿越角落频数仍较对照组WKY大鼠显著增加（63．80&;#177;15．5，36．10&;#177;13．34，28．40&;#177;8．34：26．40&;#177;11．01，13．30&;#177;12．18，6．40&;#177;4．97，t=6．13，3．99，7．15，P均〈0．01）。SHR和WKY大鼠直立次数随着时间的延续也逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠直立次数仍较对照组WKY大鼠多（67．30&;#177;20．49，46．60&;#177;21．58．38．00&;#177;14．31；18．80&;#177;12．04，11．60&;#177;12．21，5．60&;#177;4．38，t或t’=6．41，4．46。6．85，P均〈0．01）。③跳台实验结果显示，SHR和WKY的学习能力差异无显著性，记忆测试时SHR大鼠的潜伏期与WKY大鼠也未见显著差别，但SHR大鼠的错误次数显著高于WKY大鼠（1．42&;#177;1．00．0．56&;#177;0．73．t=2．19。P〈0．05）。 结论：利用开场实验、Lat迷宫及跳台实验等多方法结合，可以简单有效的从多动、注意障碍、学习记忆等方面对注意缺陷障碍模型进行行为学检测。     

应用神经肽YY5受体反义基因治疗肥胖大鼠高leptin血症效果的探讨

目的：探讨神经肽Y Y5（NPY Y5）受体反义基因治疗对肥胖大鼠高leptin血症的改善作用及其机制。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义、正义、我寡核苷酸或生理盐水，观察大鼠腹膜后与生殖器周围脂肪组织湿重的变化，并采用ELISA双抗体心法测定血清leptin水平、放免法测定血清胰岛素水平。结果：（1）高营养饮食诱导的肥胖模型大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平及两部位脂肪组织湿重明显高于正常大鼠；（2）经NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织湿重均明显降低，但生殖器周围脂肪组织湿重无明显变化；（3）大鼠血清leptin水平、血清胰岛素水平、腹膜后脂肪组织湿重间均存在一定的正相关关系。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著改善肥胖大鼠的高leptin血症，推测其机制可能与大鼠进食行为改变、腹膜后脂肪组织减少、血清胰岛素水平下降等因素有关。     

双亲个性及孕母的心理行为方式对婴儿气质影响的研究

【目的】探讨双亲个性及孕母的心理行为方式对婴儿气质的影响，有助于早期采取干预措施，促进婴儿身心健康。【方法】随机选取符合条件的133对夫妇及其婴儿作为研究对象，应用自制的相关因素问卷、艾森克个性问卷及4～8月婴儿气质问卷进行调查。【结果】孕期工作环境、工作的紧张性、家庭经济条件、精神创伤、母亲的P维度分、母亲的N维度分对婴儿的气质类型有影响。母亲的N维度分对婴儿的气质维度影响较大。【结论】家长应做好孕期保健，调节自己的情绪，培养良好的个性，促进婴儿心理的发育。     

慢性低质量浓度多氯联苯暴露对斑马鱼视网膜形态学的影响

目的探讨慢性低质量浓度多氯联苯(PCBs)暴露对斑马鱼视网膜形态学发育的影响。方法以斑马鱼为模式生物,持续低质量浓度(0.05 mg.L-1)PCBs对斑马鱼胚胎进行暴露处理(实验组),同时设正常对照组。收集受精后7 d(7 dpf)、15 d(15dpf)及30 d(30 dpf)斑马鱼幼鱼,通过光镜和电镜技术,观察各组视网膜不同发育阶段结构形态学的变化。结果 1.光镜下:7 dpf和15 dpf,实验组斑马鱼视网膜各层厚度、细胞排列、细胞形态无明显影响。30 dpf时,实验组斑马鱼部分感光细胞出现核染色质边聚,空泡化变性,胞核变稀疏。2.透射电镜观察:7 dpf和15 dpf时,实验组斑马鱼视网膜感光细胞外节盘结构无明显影响。30 dpf时,实验组斑马鱼视网膜感光细胞有正常外节段形成,但较正常对照组小,且数量变少,线粒体空泡化变性,内质网扩张。结论日常生活中的慢性低质量浓度PCBs暴露对斑马鱼视网膜发育产生毒害作用,因此,必须加强对环境有机污染物的监测和控制。提示环境中长期存在低质量浓度PCBs暴露对人群健康可能造成一定的影响。     

Homer 1a RNA干扰后大鼠脑组织突触超微结构变化

目的 观察Homer 1a RNA干扰(RNAi)后SD大鼠脑组织突触数目及突触超微结构的变化,探讨其变化在注意缺陷多动障碍(ADHD)发病机制中的作用.方法 将24只SD大鼠随机分为2组:Homer 1a RNAi组(RNAi组,n=12)和对照组(n=12).运用侧脑室注射技术,分别向2组大鼠的侧脑室注射针对Homer 1a的RNA干扰病毒和无义病毒,等待病毒起效时间为7d,7d后从每组大鼠中随机抽取3只,应用8g·L-1多聚甲醛灌注固定脑组织,利用电镜技术观察大鼠纹状体及前额叶皮质突触超微结构的变化.结果 电镜结果显示,RNAi组与对照组相比,纹状体突触间隙显著减小(t=2.85,P=0.01);突触活性区长度有增大趋势,但差异无统计学意义(t=1.80,P=0.08);突触数目(t=0.59,P=0.57)及突触后致密物厚度(t=0.30,P=0.77)无明显差异.RNAi组前额叶皮质较对照组突触活性区长度显著增大(t =2.40,P=0.02);突触后致密物厚度(t=1.72,P=0.09)有增大趋势,但差异无统计学意义;突触数目(t=0.13,P=0.89)及突触间隙(=0.25,P=0.81)无明显差异.结论 Homer 1a RNAi大鼠在表现类似ADHD行为的同时,脑组织突触超微结构发生改变,提示Homer 1a参与的突触超微结构改变可能与ADHD的病因和发病机制相关.     

持续性操作测验在学龄前儿童注意缺陷多动障碍诊断中应用价值探讨

目的:探讨4~5岁儿童注意力持续测试软件(Conners’ kiddie continuous performance test,K-CPT)在诊断学龄前儿童注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)中的临床应用价值?方法:以美国精神障碍诊断和统计手册第4版(DSM-IV)为诊断标准,对41例临床诊断ADHD的儿童,进行Conners’父母用简明症状问卷(parent symptom questionnaire,PSQ)调查和K-CPT评估?结果:K-CPT评估结果与DSM-IV诊断标准比较,在ADHD检出率方面无显著性差异(P > 0.05)?K-CPT诊断学龄前ADHD的灵敏度为73.3%,特异度为81.8%,假阳性率为18.2%,假阴性率为26.7%,符合率为75.7%,Kappa值为0.470(P < 0.001),K-CPT与金标准之间存在中度一致性?K-CPT和PSQ在患儿阳性检出率方面,差异均无显著性(P > 0.05)?结论:K-CPT测试结果可作为客观诊断指标,用于学龄前ADHD的协助诊断?     

106例高危儿气质研究

目的:研究高危儿在气质维度及分型方面的特点。方法:应用Carey婴儿气质问卷对5~7个月,106例的高危儿及50例正常婴儿进行测试与比较。结果:气质类型两组相近,差异无统计学意义(P>0.05)。高危儿组在活动水平,节律性,趋避性维度分值与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),提示高危儿活动量小,节律性过强,易退缩。结论:高危儿有其独特的气质特点,应结合其特点,促进其更好的发育。     

miR-182在多氯联苯（PCB1254）暴露后视网膜神经节细胞内的表达及意义

目的：研究多氯联苯（polychlorinated biphenyls,PCBs）PCB1254引起视网膜神经节细胞毒性作用的可能机制。方法：分别配制浓度为0.125、0.250、0.500、1.000 mg/L的PCB1254对RGC-5细胞进行暴露处理,并设立空白对照及0.01%甲醇对照组,测定细胞内miR-182表达水平;利用miR-182类似物或抑制剂转染RGC-5细胞,使miR-182上调或下调,分别检测细胞凋亡、细胞增殖功能和细胞周期;使用0.5、1.0 mg/L的PCB1254刺激RGC-5细胞,再转染miR-182类似物,分别检测细胞凋亡、细胞增殖功能。结果：随着PCB1254浓度的增高,RGC-5细胞内miR-182的表达逐渐被抑制,当浓度≥0.5 mg/L时,与对照组的差异有统计学意义（P<0.05）。在RGC-5细胞内沉默miR-182可导致Caspase-3活性增高（P<0.05）,表明miR-182沉默促进细胞凋亡;CCK-8法显示miR-182沉默会导致RGC-5细胞活力降低（P<0.05）,表明miR-182沉默会抑制细胞增殖;MiR-182沉默对RGC-5细胞周期无显著影响（P>0.05）。使用miR-182 类似物干预0.5、1.0 mg/L PCB1254暴露后的RGC-5细胞,发现细胞内 Caspase-3活性下降（P<0.05）、细胞活力增加（P<0.05）,表明miR-182可改善PCB1254对RGC-5细胞凋亡及增殖功能的影响。结论：PCB1254可能通过抑制miR-182的表达来影响RGC-5细胞的增殖和凋亡,进而导致视功能损害。     

0~3岁智能发育迟缓儿童气质特征

目的 探索智能发育迟缓儿童的气质特征,为临床进行有效的早期干预提供参考依据。方法 采用Carry儿童气质问卷对204例0~3岁智能发育迟缓儿童及112例正常儿童进行测试与比较。 结果 智能发育迟缓儿童气质类型中难养型与启动缓慢型偏多,在节律性、趋避性、适应性、坚持性、注意力维度分值与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。智能迟缓儿男女气质类型相近,但两组在活动水平和坚持性两个维度分值差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 智能发育迟缓儿童有其独特的气质特点,应结合其特点,进行早期干预,促进其智力。