小儿血液病并发深部真菌病

探讨小儿血液病并发深部真菌病的发病原因、临床特点、防治措施与预后。方法根据病原学、影像学检查并结合临床资料综合分析。结果11例急性白血病（其中1例为慢性粒细胞白血病急淋变）及1例再生障碍性贫血于白细胞低下期出现肺部真菌感染或多脏器真菌感染,其中7例经抗真菌治疗后恢复,2例死亡,3例放弃治疗。结论深部真菌病是继发于白细胞低下及大量广谱抗生素应用的重要合并症,多次痰涂片是简便、快速有效的早期诊断手段之一,在治疗原发病的同时早期诊断治疗深部真菌病是改善预后的关键。     

逆转录病毒载体介导的耐药基因在造血细胞中基因转导和表达的研究

本文对于逆转录病毒载体介导的基因转移方法中如何提高逆转录病毒滴度进行了研究。以磷酸钙共沉淀的方法转染包装细胞PA17,经氨甲蝶呤(MTX)10~(-7)mol/L筛选,扩增得到产病毒细胞株,经点杂交证实dhfr基因成功导入并产生病毒颗粒。混合细胞克隆PA317/pSPD产生的逆转录病毒滴度为(1.1-2.3)×10~3 cfu/ml。随MTX筛选浓度增加,产病毒细胞PA317/pSPD抗性增加。当培养基中MTX浓度由10~(-7) mol/L增加到10~(-6)mol/L时,逆转录病毒滴度增加了近10倍[(1.02-2.09)×10~4 cfu/ml]。结果显示可以通过增加MTX筛选浓度来提高含dhfr cDNA的逆转录病毒滴度。     

mIL-12基因转染促进小鼠树突状细胞混合淋巴细胞反应

目的 观察ｍＩＬ－１２基因转染的小鼠树突状细胞（ＤＣ）功能的改变。方法 分离小鼠骨髓单个核细胞与ｒｍＧＭ－ＣＳＦ和ｒｍＩＬ－４培养１周,对培养的细胞进行形态学观察,ＦＡＣＳ检测细胞表面ＤＥＣ２０５、ＣＤ８６表达。以ｍＩＬ－１２重组腺病志染培养的ＤＣ,ＥＬＩＳＡ测定培养上清中ｍＩＬ－１２的水平。混合淋巴细胞反应检测转染细胞的功能。结果培养１周后,得到具有典型ＤＣ形态的细胞,以ｍＩＬ－１２重组腺病毒为     

转染p21WAF1基因降低K562细胞对VP-16的敏感性

为探讨p21^WAF1对K562细胞药物敏感性的谳节作用及其对VP－16诱导的K562细胞凋亡的影响，构建了p21^WAF1逆转录病毒表达载体，体外转染白血病细胞系K562。经RT－PCR和Western印亦检测得到稳定表达p21^WAF1的K562－p21^WAF1细胞克隆后，用MTT法和存活细胞计数法检测转染p21^WAF1的K562细胞对VP－16在剂量和作用时间上的敏感性变化，用DNA凋亡片段分析和流式细胞术检测其对VP－16诱导的K562细胞凋亡的影响。实验结果显示，外源性p21^WAF1的表达明显降低了VP－16诱导的K562细胞凋亡，降低了K562细胞对VP－16的敏感性。以上结果表明，p21^WAF1能通过抑制K562细胞的凋亡来降低其对VP－16的敏感性。     

白血病患儿重组粒细胞集落刺激因子血药浓度监测及临床意义

目的研究急性白血病患儿反复应用重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CsF)的药代动力学及其与临床的关系。方法应用酶联免疫吸附测定(ELIsA)方法检测46例白血病患儿的血清G-CSF浓度。结果获得29例患儿用rgG-CSF后的标本,其血清G-CSF浓度为(5.335±5.597)μg/L。反复应用rhG-CSF的患儿在下次用药前血清G-CSF水平恢复正常;少数未应用rgG-CSF患儿可检测到较高浓度的G-CsF。血清G-CSF浓度与粒细胞绝对计数值呈负相关(r=-0.8746,P＜0.01)。结论rhG-CSF的药代动力学中存在有粒细胞介导的清除机制,反复应用无药物蓄积作用。     

儿童急性白血病继发丙型病毒性肝炎

目的 探讨儿童急性白血病继发输血后丙型病毒性肝炎的发生、发展及转归。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ法检测血清ＨＣＶ－ＲＮＡ,并用ＥＬＩＳＡ方法测ＨＣＶ核心区多肽抗体（ＨＣＶ－ＣＰ）。结果 １０７例儿童白血病中ＨＣＶ感染率达７０％（７５／１０７）;ＨＣＶ－ＣＰ检测阳性率明显低于ＨＣＶ－ＲＮＡ（４０％ｖｓ７４％）;ＨＣＶ感染者化疗期间曾有转氨酶（ＡＬＴ）明显升高,但停止化疗后５０例中仅１例ＡＬＴ持续偏高,余均恢     

抗Fas单抗和Bcl-2反义脱氧寡核苷酸诱导小儿急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究

目的探讨抗Ｆａｓ单抗、Ｂｃｌ２反义脱氧寡核苷酸在诱导小儿急性淋巴细胞白血病（简称急淋）细胞凋亡中的作用。方法小儿急淋白血病细胞分别与Ｂｃｌ２反义脱氧寡核苷酸、抗Ｆａｓ单抗培养,或与两者一起培养,再分别定量检测其凋亡细胞。结果Ｂｃｌ２反义脱氧寡核苷酸或抗Ｆａｓ单抗分别与１７例及８例小儿急淋白血病细胞培养４８小时后,能各自诱导（３５．７±９．４）％及（３９．４±８．２）％细胞凋亡。当它们共同作用于８例小儿急淋白血病细胞时可诱导（６９．８±１３．１）％白血病细胞凋亡。结论Ｂｃｌ２反义脱氧寡核苷酸与抗Ｆａｓ单抗均能诱导小儿急淋白血病细胞的凋亡,二者联合应用可显著加强其诱导凋亡的作用。     

粒细胞集落刺激因子在儿童急性髓性白血病治疗中的应用

为了增加强化疗的安全性,15例次初治及32例次巩固强化治疗的急性髓性白血病患儿化疗中应用粒细胞集落刺激因子,中性粒细胞绝对值小于0.5×10~9/L的持续时间分别为5.3天、5.0天,与化疗方案相同的对照组相比分别缩短了5.6天、3.6天;感染发生率为40％、25％,较对照组下降了26.7％,19.4％,具显著差异(P<0.05);输血量亦随之减少,副作用少,提高了病人的生活质量,为强化疗治疗小儿急性髓性白血病提供了保障。     

应用生物素标记探针进行细胞原位杂交探讨新生儿EB病毒感染

随机抽取住院新生儿80例脐血25例利用原位杂交检测EB-W病毒基因。感染组59例，39例阳性(阳性率66%)，非感组21例，6倒阳性(阳性率28.6％)；脐血组25例，7例阳性(阳性率28％)。同时浏EB抗体，抗体阳性44例中36倒EB-W病毒阳性、抗体阴性61例中16例EB-W病毒阳性。结果提示新生儿期存在EB病毒感染，其EB-W基因整合在外周淋巴细胞核上、感染组EB病毒阳性率高。     

甲酰四氢叶酸钙对L615微小残留白血病小鼠的作用

本研究建立了L615微小残留白血病小鼠模型,观察了甲酰四氢叶酸钙(LV)对L615微小残留白血病小鼠的作用。615小鼠生存天数与其接种的L615白血病细胞数是对数线性关系。615小鼠接种L615细胞5×10~6后24h接受阿糖胞苷(Ara-C)3g/m~2腹腔注射治疗,其生存期延长至24.7d(未治疗组存活7.3d),但最终均死于白血病复发。用移植生物试验及生存期推测经Ara-C治疗后48h,小鼠体内残留白血病细胞数甚微,且处于“抑制”或“休止”状态,此时的小鼠可作为残留白血病模型。L615微小残留白血病小鼠接受不同剂量LV(50-200mg/m~2/d)处理后其平均生存期(17.9±2.19-13.3±1.35d)较对照组(24.7±2.55d)明显缩短。病理学发现LV有促进骨髓抑制期L615微小残留白血病小鼠的脾小结良性增生的作用,但同时也加速了脾脏的白血病细胞浸润。以上结果表明,LV对L615残留白血病小鼠未能起到有益的治疗作用,相反加速了残留白血病小鼠的复发。