胚胎绒毛组织的胎儿基因组DNA提取方法及其临床应用

常见遗传病 (DMD、PKU、甲型血友病 )目前尚无有效的治疗方法 ,只能通过产前诊断阻止患儿的出生来减少发病。阻患儿出生 ,最好做到妊娠早期产前诊断。建立一种简单、可靠、快速的绒毛基因组 DNA提取方法则成为妊娠早期产前基因诊断的主要问题。自 1998年 3月以来 ,我室在绒毛基因组 DNA提取方法上进行研究 ,建立了胚胎绒毛的胎儿基因组 DNA的提取方法 (煮沸法和水浴法 ) ,并成功地应用于DMD的产前基因诊断。1　材料与方法1.1　标本来源　家系由中国医科大学第二临床学院遗传室提供。胚胎绒毛 (妊娠 45～ 6 0 d)由沈阳市妇幼保健所采…     

抗维生素D佝偻病PHEX基因突变分析

目的 研究10例家族性及非家族性(散发)抗维生素D佝偻病患者PHEX基因突变,初步探讨我国东北地区抗维生素D佝偻病患者PHEX基因突变的类型.方法 应用常规饱和酚-氯仿法提取基因组DNA,聚合酶链反应扩增PHEX基因22个外显子序列,DGGE方法结合测序检测突变.结果 3名患者检测出PHEX基因突变:患者(H11)检测出16外显子上游46 bp(T>C)突变;患者(H1,H2)检测出18外显子1861(C>T)(Gin621X)的无义突变.结论 PHEX基因突变是抗维生素D佝偻病的致病原因.检测到的这两种PHEX基因突变为国际上首次报道的新的突变类型.     

软骨发育不全FGFR3基因突变的研究

目的了解中国人软骨发育不全患者成纤维细胞生长因子受体３（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ３，ＦＧＦＲ３）基因变异情况。方法应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和限制性内切酶酶切方法，分析辽宁地区７例软骨发育不全（ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ，ＡＣＨ）患者外周血ＤＮＡ标本中ＦＧＦＲ３基因第１０外显子区域。结果７例患者均检测到相同的Ｇ３８０Ｒ点突变。结论表明Ｇ３８０Ｒ为中国人ＡＣＨ患者常见突变。应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和限制性内切酶酶切的方法检测ＦＧＦＲ３基因突变是产前诊断和早期诊断ＡＣＨ患者的简便、快速、可靠的手段     

脊髓性肌萎缩症的基因诊断及其应用研究

目的 对脊髓性肌萎缩症患者及携带者进行基因诊断和产前基因诊断.方法 对26例脊髓性肌萎缩症患者应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restiction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测SMN1基因第7外显子是否缺失;对于患者的父母应用多重PCR结合变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的方法进行携带者诊断;而既往生产过患儿的孕妇于孕中期抽取羊水,进行产前基因诊断.结果 26例脊髓性肌萎缩症患者中查出25例存在SMN1基因第7外显子纯合缺失;患者的父母全部为SMN1基因第7外显子杂合缺失携带者;对20名既往生产过患儿的孕妇进行了产前诊断,8名存在SMN1基因第7外显子纯合缺失.结论 PCR-RFLP、多重PCR结合DHPLC技术可应用于患者及携带者基因诊断;PCR-RFLP可用于脊髓性肌萎缩症的产前基因诊断.     

脊髓性肌萎缩症的基因诊断及其应用研究

目的 对脊髓性肌萎缩症患者及携带者进行基因诊断和产前基因诊断.方法 对26例脊髓性肌萎缩症患者应用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restiction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测SMN1基因第7外显子是否缺失;对于患者的父母应用多重PCR结合变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的方法进行携带者诊断;而既往生产过患儿的孕妇于孕中期抽取羊水,进行产前基因诊断.结果 26例脊髓性肌萎缩症患者中查出25例存在SMN1基因第7外显子纯合缺失;患者的父母全部为SMN1基因第7外显子杂合缺失携带者;对20名既往生产过患儿的孕妇进行了产前诊断,8名存在SMN1基因第7外显子纯合缺失.结论 PCR-RFLP、多重PCR结合DHPLC技术可应用于患者及携带者基因诊断;PCR-RFLP可用于脊髓性肌萎缩症的产前基因诊断.     

遗传与优生系列谈(一)——遗传·变异·遗传病

二十世纪中期、科学园地出现了一支夺目的花朵,这就是“人类医学遗传学”。这门科学专门研究人类遗传和变异的规律。提起遗传,人们并不感到陌生,但如果提到某某家的孩子患的是遗传病,也许不少人还不明白。而事实却不能否认。人所共知,儿女的相貌、体形、生理功能都和亲代长辈相似,总是要象亲生父母、姑姑、娘舅、爷爷。进化论的创建者达尔文曾指出:孩子往往带有祖父、祖母和先代祖宗的许多特征。     

应用高效薄层色谱法检测母乳中神经节苷脂

目的：检测泌乳期母乳中神经节苷脂成分,并评价其生物学意义。方法：应用高效薄层色谱法对68份母乳标本进行了检测。结果：母乳中总神经节苷脂结合唾液酸含量为7．8－10．4μg/ml。在母乳中检测出4种神经节苷脂,分别为GM3、GD3、GX1及GX2。GX1及GX2为新发现的神经节苷脂,对GA1抗体呈阴性反应,推测其可能为C－通路神经节能苷脂。GM3与GD3为主要神经节苷脂（占总量50％－65％）。GM3在分娩后第8天时明显增高,GD3则明显降低,随分娩后天数增加GM3与GD3变化有显性。结论：母乳中存在GM3、GD3、GX1及GX24种神经节苷脂;GM3与GD3的含是随分娩后天数增加变化有显性。     

杜氏肌营养不良症的无创性产前基因诊断研究

目的 探讨杜氏肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy,DMD)的无创性产前基因诊断的可行性。方法 用不连续密度梯度离心方法初步富集妊娠9－21周孕妇外周血中的有核红细胞,细胞涂片离心机制片,瑞氏姬姆萨染色标记,显微操作仪获得单个有核红细胞,改良的PEP（primer extension preamplification)方法扩增单个核红细胞的全基因组DNA,在综合性别和DMD基因内的数个STR位点连锁分析进行DMD诊断诊断的同时,鉴定单个有核红细胞的来源,再应用标记聚合酶链反应扩增9个微卫星片段,进行基因型分析,进一步判定单个核红细胞来源。结果 成功诊断了1例DMD男性患病胎儿。结论 初步建立了DMD的无创性产前基因诊断的方法。     

12号染色体异常伴多发畸形一例报告

病例:病历介绍患儿,男,8d.以"哺乳无力伴呛奶8d为主诉"入院.G1P1,母孕39w,因胎位不正剖宫产.生后无窒息,脐带绕颈1w,胎盘、羊水正常.出生后即哺乳吸吮无力伴呛咳.因舌系带短于当地医院行切割术,术后7d仍吸吮无力来诊.父26岁,母23岁,身体健康,非近亲结婚,母孕3m患感冒1次,服用双黄连3d.父精子活力低,孕前曾服用中药"五子衍宗"1m.家族中无同类患者.