HT-ED联合UPLC-MS/MS技术分析白头翁皂苷B4的大鼠血浆蛋白结合率

目的:建立血浆中白头翁皂苷B4的分析方法,测定白头翁皂苷B4大鼠血浆蛋白结合率。方法:采用96通道高通量平衡透析系统(HTD 96b)进行透析,利用UPLC-MS/MS测定透析内外液中白头翁皂苷B4的浓度,研究白头翁皂苷B4在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率,使用Waters XTerra MS C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.7 m L·min~(-1),柱温40℃,进样量5μL。结果:白头翁皂苷B4在5~2 000 ng·L-1线性关系良好,其精密度RSD及准确度均8.0%,重复性RSD9.0%,稳定性的RSD均15%;提取回收率和基质效应均在80%~115%。白头翁皂苷B4在低、中、高(6,12,24 mg·L-1)3个质量浓度下大鼠血浆蛋白结合率分别为(95.32±0.37)%,(94.32±0.63)%,(88.64±0.37)%。结论:白头翁皂苷B4与大鼠血浆具有较强的蛋白结合率,且结合率不具有质量浓度依赖性。     

荜澄茄素治疗失眠症的药效及相关机制研究

目的 探讨荜澄茄素对睡眠剥夺小鼠的药效及潜在作用机制。方法 首先研究荜澄茄素对正常小鼠的促睡眠作用,小鼠随机分为对照组、地西泮（2 mg/kg）组和荜澄茄素低、中、高剂量（25、50、100 mg/kg）组,各给药组ig相应药物,记录各组小鼠的入睡率以及睡眠持续时间;免疫组化法检测小鼠脑组织γ-氨基丁酸A受体α1（γ-aminobutyric acid A receptor α1,GABAA）蛋白表达;氟马西尼拮抗实验验证荜澄茄素的作用是否与苯二氮类受体有关。然后研究荜澄茄素对睡眠剥夺小鼠的作用,小鼠分为对照组、模型组、地西泮（2 mg/kg）组和荜澄茄素低、中、高剂量（10、20、40 mg/kg）组,给予药物干预后,采用旷场实验进行行为学测试;LC-MS/MS检测脑组织中神经递质GABA、L-谷氨酸（L-glutamic acid,Glu）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA）的含量;免疫组化及qRT-PCR技术检测小鼠脑组织GABAAα1表达。结果 荜澄茄素对正常小鼠的促睡眠作用研究结果显示,荜澄茄素显著增加正常小鼠的入睡率（P<0.01）,并显著延长了小鼠的睡眠持续时间（P<0.01）,显著增加皮层GABAAα1表达（P<0.05）;氟马西尼可以拮抗荜澄茄素对小鼠的促睡眠作用。荜澄茄素对睡眠剥夺小鼠的作用研究结果显示,与对照组比较,模型组小鼠活动量显著增加（P<0.05）,脑组织中GABAAα1表达以及GABA、Glu、5-HIAA含量显著降低（P<0.05、0.01）;与模型组比较,荜澄茄素组小鼠活动量明显减少（P<0.05、0.01）,脑组织中GABAAα1表达以及GABA、Glu、5-HIAA含量显著升高（P<0.05、0.01）。结论 荜澄茄素对正常小鼠和睡眠剥夺小鼠均具有促睡眠作用,可能通过调控GABAAα1及脑内神经递质GABA、Glu、5-HIAA的含量而发挥作用。     

高容量血液滤过治疗脓毒症并发多器官功能障碍综合征RIFLE标准应用研究

目的探讨RIFLE标准衡量高容量血液滤过(HVHF)治疗脓毒症并发多器官功能障碍综合征(MODS)的治疗时机及其对预后的影响。方法回顾性分析成都军区总医院2006年1月至2010年12月行HVHF治疗的脓毒症并发MODS患者52例,采用RIFLE标准分A组(AKIⅠ期)、B组(AKIⅡ期)和C组(AKIⅢ期),比较各组的病死率、平均ICU住院时间、平均机械通气时间、平均连续血液滤过治疗时间,并将HVHF治疗前和治疗24 h后的APACHEⅡ评分、SOFA评分、血浆白介素(IL)-6、氧合指数、血肌酐(Scr)及平均动脉压(MAP)等指标。结果 (1)C组HVHF治疗前APACHEⅡ评分、SOFA评分、血浆IL-6及病死率均明显高于A、B组(P<0.01);(2)A、B组HVHF治疗前APACHEⅡ评分、SOFA评分及病死率比较差异无统计学意义(P>0.05),但B组HVHF治疗前IL-6及平均ICU住院时间、平均机械通气时间、平均连续血液滤过治疗时间明显高于或长于A组(P<0.01);(3)HVHF治疗24 h后血浆IL-6、氧合指数、Scr、MAP均明显改善,但C组IL-6仍高于A、B组(P<0.01),B组IL-6仍高于A组(P<0.01);A、B组HVHF治疗24 h后APACHEⅡ评分、SOFA评分显著降低(P<0.01),C组无变化(P>0.05)。结论 HVHF能有效辅助治疗脓毒症并发MODS;RIFLE标准及IL-6对判断预后有指导意义;早期(AKIⅠ期和Ⅱ期)行HVHF可明显改善脓毒症并发MODS的预后,而AKIⅠ期行HVHF的疗效更好。     

预防性应用尼莫地平对面神经损伤大鼠BDNF及GDNF表达的影响

目的探讨预防性应用尼莫地平对面神经损伤大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)表达的影响。方法 96只SD大鼠随机分为假手术组、单纯损伤组、尼莫地平预处理组、尼莫地平后处理组,每组24只。假手术组不损伤面神经,单纯损伤组建立大鼠面神经损伤模型。尼莫地平预处理组在模型建立前给予尼莫地平,持续给药到术后2周。尼莫地平后处理组在模型建立后给予尼莫地平,持续给药2周。应用Western blot方法观察大鼠面神经损伤后1、3、6个月BDNF和GDNF的表达。结果与单纯损伤组相比,尼莫地平后处理组造模后1个月大鼠BDNF、GDNF的表达均升高(均P<0.05)。尼莫地平预处理组和后处理组BNDF和GDNF的表达在各时间点差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论预防性应用尼莫地平可以调节面神经损伤大鼠GDNF和BDNF的表达,充分发挥其神经保护作用。     

藏族药小叶棘豆药材质量标准研究

目的 建立藏族药小叶棘豆药材的质量标准,为小叶棘豆药材的质量控制提供有效方法。方法 利用薄层色谱法（TLC）鉴别,并对13批小叶棘豆药材的水分、浸出物、酸不溶性灰分进行检查,同时利用高效液相色谱法（HPLC）对药材中2′,4′-二羟基查耳酮进行含量测定。结果 建立了小叶棘豆的TLC鉴别方法,确定了小叶棘豆的水分（不得超过7%）、浸出物（不得少于16%）、酸不溶性灰分（不得超过26%）限定量。2′,4′-二羟基查耳酮的质量浓度在0.009 3～0.139 9 μg·mL^–1线性关系良好,平均回收率为100.49%,RSD为2.99%。13批小叶棘豆样品中2′,4′-二羟基查耳酮质量分数为0.75%~1.72%,取均值的80%设限,规定其质量分数不得低于1.0%。结论 考虑到不同来源小叶棘豆药材中2′,4′-二羟基查耳酮含量存在一定差异,根据含量测定结果,建议2′,4′-二羟基查耳酮的最低质量分数限度为1.0%,该方法稳定可靠,可以应用于小叶棘豆质量标准研究。     

氦-氖激光治疗高血压病对血浆一氧化氮浓度的影响

本文采用氦－氖（Ｈｅ－Ｎｅ）激光照射高血压患者的颈动脉窦，观察其对高血压病的降压治疗作用，同时检测治疗前后血浆中一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）代谢产物硝酸盐（ＮＯ－３）的变化。结果表明：（１）经Ｈｅ－Ｎｅ激光治疗后高血压患者血浆中ＮＯ代谢产物较治疗前明显增加，而对正常人无明显影响。（２）经Ｈｅ－Ｎｅ激光治疗后高血压患者血压较治疗前明显降低，并能增强降压药物的治疗效果。提高Ｈｅ－Ｎｅ激光照射可降低血压，调节ＮＯ代谢可能是其降压机理之一     

脑膜瘤“脑膜尾征”的影像分型及病理

目的 探索脑膜瘤“脑膜尾征”的影像分型及病理.方法 179例凸面脑膜瘤和89例颅底脑膜瘤手术患者,术后其瘤体和硬膜标本做常规病理学检查.选取距离肿瘤基底处0～0.5 em、0.6～1.0 cm、1.1～1.5em、1.6～2.0 cm、2.1～2.5 cm、2.6 ～3.0 cm处硬膜做HE染色,检查硬膜内是否存在肿瘤细胞.分析各型”脑膜尾征”对应的硬膜肿瘤细胞侵袭率和侵袭范围的差异.结果 “脑膜尾征”在MRI上可以分为平滑型(37/268, 13.8％)、结节型(48/268,17.9％)、混合型(84/268,31.4％)、对称多极型(29/268,10.8％)、非对称多极型(70/268,26.1％).179例凸面脑膜瘤中158例(88.3％)可以见到肿瘤侵袭周边硬膜,其中82.3％ (130/158)侵袭范围在2.0 cm以内,94.9％ (150/158)在2.5 cm以内.平滑性“脑膜尾征”对应的硬膜肿瘤细胞侵袭范围在1.5 cm以内,各型“脑膜尾征”对应的硬膜的肿瘤侵袭率和侵袭范围差异均有统计学意义.“脑膜尾征”在凸面和颅底脑膜瘤分布差异也有统计学意义.结论 对于凸面脑膜瘤,肿瘤周边硬膜切除范围建议达2.5 cm,如果这个范围不能达到,“脑膜尾征”的形态可以作为决定切除范围的参考.对于一般行Simpson Ⅱ级切除的颅底脑膜瘤,肿瘤周边的硬膜可以根据“脑膜尾征”形态采取相应的处理.“脑膜尾征”的分型对术前肿瘤周边硬膜的病理变化有一定的预测性,能够使外科医生术前预测侵袭范围和获得足够的切除范围,对降低脑膜瘤远期复发率,有重要的意义.     

急性创伤性成人呼吸窘迫综合征治体会

我院自1994年1月至1999年1月共收治16例急性创伤性成人呼吸窘迫综合征(Ａｃｕｔｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＡＲＤＳ)病人,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　16例病人均因多发性复合性创伤后发生ＡＲＤＳ,男10例,女6例,年龄7～61(平均32)岁。全部病例均符合1995年重修ＡＲＤＳ诊断标准,临床上均有迅速加剧的呼吸窘迫、发绀、难以纠正的缺氧、呼吸频率≥28次/分,ＰａＯ2/ＦｉＯ2≤200ｍｍＨｇ,ＰａＯ2≤50ｍｍＨｇ,ＰａＣＯ2<33.75ｍｍＨｇ或>44.85ｍｍＨｇ[1]。胸片2例无实变,6例有双肺浸润影,8例肺野…     

白头翁皂苷B4调控结肠癌小鼠脂肪酸代谢重编程作用研究

为探究白头翁皂苷B4(anemoside B4)对结肠炎相关结肠癌(colities-associated cancer, CAC)小鼠肿瘤组织中脂肪酸代谢的影响,该研究采用氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)/葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)建立CAC小鼠模型,将实验小鼠随机分为5组(正常组,模型组以及白头翁皂苷B4低、中、高剂量组),实验结束后测量小鼠结肠长度、肿瘤大小,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色法观察结肠的病理变化,取结肠肿瘤切片进行空间代谢组学分析,分析肿瘤中脂肪酸代谢相关物质的分布变化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)检测结肠肿瘤组织中SREBP-1、FASN、ACCα、SCD-1、PPARα、ACOX、UCP-2、CPT-1 mRNA的表达。结果显示,模型组小鼠体质量显著降低(P<0.05),结肠长度显著缩短(P<0.001),肿瘤数量增加,病理学评分显著升高(P<0.01);空间代谢组学分析发现结...