敌敌畏对大鼠睾丸Leydig细胞凋亡的影响

目的:观察敌敌畏对子代雄性大鼠睾丸Leydig细胞凋亡的影响,探讨Leydig细胞变化在泌尿生殖系统畸形发病机制中的意义。方法:将21只孕SD大鼠随机分为对照组和敌敌畏各剂量组,在孕12～17 d期间,对照组每天分别给予灌喂玉米油1.0 ml;敌敌畏各剂量组每天分别给予敌敌畏1、4、8、16、20、24 mg/kg。待孕鼠分娩完毕,每组随机选取5只新生雄性仔鼠睾丸标本行HE染色、caspase-3免疫组化染色和DAPI荧光染色,将余下的雄性仔鼠饲养至90 d后再随机选取5只成年雄性仔鼠睾丸标本行HE染色、caspase-3免疫组化染色和DAPI荧光染色。结果:玉米油对照组雄性仔鼠睾丸组织caspase-3染色阳性的Leydig细胞数量和DAPI标记的Leydig细胞的总分值与敌敌畏1 mg/(kg.d)组比较无统计学意义(P>0.05),与敌敌畏其余剂量组比较有统计学差异(P<0.05),敌敌畏可使雄性仔鼠睾丸caspase-3染色阳性的Leydig细胞数量和DAPI标记的Leydig细胞的总分值增加,并与敌敌畏存在剂量依赖关系。结论:孕期染毒敌敌畏可使雄性仔鼠睾丸Leydig细胞的凋亡增加,这可能影响到Leydig细胞的数量,使胚胎期胎睾产生睾酮的功能受到干扰,从而使泌尿生殖系统的发育受到影响。     

新锌指蛋白基因Zfp637真核表达质粒的构建及对乳腺癌EMT6细胞的作用

目的 构建锌指蛋白 Zfp637真核表达质粒及稳定转染过表达细胞,并观察 Zfp637基因对肿瘤细胞生长增殖的影响.方法 以正常小鼠脾脏组织cDNA作为模板扩增 Zfp637 DNA,定向插入到pEGFP-C3真核表达质粒中,酶切片段分析和测序鉴定以确定成功构建pEGFP- Zfp637重组质粒,通过脂质体介导pEGFP-Zfp637重组质粒转染小鼠乳腺癌株EMT6细胞,并且通过G418筛选出稳定转染细胞( Zfp637-EMT6).荧光显微镜下对Zfp637进行亚细胞定位;RT-PCR检测Zfp637-EMT6细胞中Zfp637基因表达;同时观察细胞生长状况,MTT法测定Zfp637-EMT6细胞的增殖活性.结果 重组质粒经鉴定证实具有Zfp637全长cDNA序列,所建立的Zfp637-EMT6细胞能稳定过表达 Zfp637基因,并且其细胞生长增殖显著增加.结论 成功构建pEGFP-Zfp637真核表达质粒,显示了 Zfp637能促进肿瘤细胞增殖,为进一步研究Zfp637基因的功能奠定了基础,并将为恶性肿瘤的基因治疗提供新靶点.     

小鼠脑癌疫苗细胞生长特性的研究

目的：降低肿瘤疫苗细胞的致瘤性。方法：观察正常小鼠活化Ｂ淋巴细胞和小鼠ＡＬＡ９０７０２肺癌细胞的杂交瘤苗细胞（ＦＬＢ２ｃ、ＦＬＢ６Ｇ）的体外生长曲线,软琼脂集落形成及体内成瘤情况。结果：ＦＬＢ２ｃ、ＦＬＲ６ｇ较ＡＬＡ９７０２细胞生长明显缓慢,细胞倍增时间延长,ＦＬＢ２ｃ不能在软琼脂中形成集落,ＦＬＢ６Ｇ在软琼脂中形成集落明显减少,ＦＬＢ２ｃ、ＦＬＢ６Ｇ均不能在小鼠体内成瘤。结论：通过与正常细胞融合     

共轭三烯酸抑制肝癌细胞体外增殖和凋亡诱导的作用

目的: 探讨共轭三烯酸抑制肝癌细胞体外增殖的作用机制.方法:采用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验、Brdu掺入实验(20 g/L, 12 h)研究共轭三烯酸对人正常肝细胞L-02, 人肝癌细胞系SMMC-7721和鼠肝癌细胞系Hepa1-6的体外增殖抑制作用;Hoechst33342荧光染色, 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果: 共轭三烯酸处理后, 肿瘤细胞增殖活性降低(SMMC-7721: 1.5±2.6 vs 1.9±12.3, P<0.05;Hepa1-6: 1.0±1.5 vs 1.2±9.7, P<0.05), 克隆形成下降(SMMC-7721: 149.3±3.1 vs 191.7±5.8, P<0.05;Hepa1-6: 32.7±3.1 vs 61.3±4.2, P<0.05), Brdu标记指数降低(SMMC-7721: 42.3%±1.5% vs 63.6%±0.7%, P<0.05;Hepa1-6: 59.5%±0.7% vs 79.6%±1.6%, P<0.05), 凋亡细胞增多(SMMC-7721: 48.9%±0.7% vs 9.9%±0.4%, P<0.05;Hepa1-6: 65.1%±1.1% vs 15.9%±0.7%, P<0.05);凋亡指数升高(SMMC-7721: 16.3%±0.7% vs 3.3%±0.4%, P<0.05;Hepa1-6: 21.7%±1.1% vs 5.3%±0.4%, P<0.05), G0/G1期细胞数增加(SMMC-7721: 48.4%±1.8% vs 38.0%±2.1%, P<0.01;Hepa1-6: 53.4%±2.1% vs 41.1%±0.7%, P<0.01), S期细胞数减少(SMMC-7721: 32.2%±2.9% vs 37.2%±1.9%, P<0.05;Hepa1-6: 28.3%±0.9% vs 39.9%±0.9%, P<0.01).结论:共轭三烯酸对肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用, 其作用机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成, 诱导肿瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞.     

热休克条件下诱导型HSP70对人胚肺二倍体细胞衰老影响实验研究

目的 探讨在热休克条件下，人胚肺二倍体细胞MRC-5株诱导型热休克蛋白70（HSP70）在细胞水平的表达机制，诱导型HSP70对MRC-5细胞衰老有无影响及影响MRC-5细胞衰老的相关机制。方法 用热休克处理诱导MRC-5细胞HSP70的表达，同时采用HSP70反义寡核苷酸转染MRC-5细胞作对照，分别置42℃恒温水浴30min、1、2、4h，及每日水浴1h共3和5d，各组细胞均在37℃复温。分别测定细胞HSP70的表达，细胞超氧化物歧化酶（SOD）总活力，并通过衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色和显微镜观察判断衰老细胞。结果 在42℃热休克处理下，MRC-5细胞HSP70的表达随热处理时间延长而增加（P〈0．05），且均高于同时点对照组水平（P〈0．05）；MRC-5细胞SOD总活力随热处理时间延长而增高，均高于同时间点对照组水平，差异有统计学意义（P〈0．05）；经HSP70反义寡核苷酸处理的细胞，在反复热处理第3天及第5天，SA-β-Gal染色阳性表达率高于实验组。结论 热处理方法可成功诱导MRC-5细胞表达HSP70，随热处理时间延长，MRC-5细胞HSP70表达增加，HSP70可能通过增强细胞内源性抗氧自由基能力，影响MRC-5细胞的衰老进程。     

有机磷农药-敌敌畏诱导大鼠尿道下裂动物模型睾丸组织的病理学初步观察

目的:探讨环境内分泌干扰物-有机磷农药敌敌畏导致尿道下裂发生的可能机制。方法:30只SD大鼠随机分为两组:实验组(20只)和对照组(10只)。于孕12~17 d分别以敌敌畏10 mg/(kg.d)和生理盐水灌胃。实验组产雄仔鼠88只,其中22只发生尿道下裂,对照组产雄仔鼠33只,无尿道下裂发生。实验组(尿道下裂鼠)和对照组各5只仔鼠喂养至性成熟,取其睾丸组织作常规石蜡切片分别用HE染色和用抗大鼠Calretin in抗体作SP免疫组化染色检测。结果:尿道下裂大鼠睾丸组织中间质细胞(Leyd ig)数量明显减少,生精小管数及形态无明显改变;尿道下裂大鼠睾丸组织中Calretin in阳性的Leyd ig细胞数明显少于对照组。结论:孕SD大鼠染毒敌敌畏农药后能导致雄性仔鼠睾丸组织中的Leyd ig细胞数量减少,推测环境内分泌干扰物质敌敌畏诱导大鼠尿道下裂发生的可能机制是敌敌畏的毒性作用致使胎鼠睾丸中的Leyd ig细胞受损,导致胎鼠睾丸产生的睾酮水平降低,在尿道形成过程中发生障碍而产生尿道下裂。     

病理学教学指导材料的设计与运用

1　创设背景目标教学是一种新的教学模式 ,它强调教师和学生共同参与整个教学过程。通过教法和学法的研究 ,笔者在写好教案的同时 ,以教学目标为指南 ,从学生的年龄、原有的知识结构及学生认知规律、情感、想象、思维等心理活动特点出发 ,在把握教材各知识点的各种联系的基础上 ,归纳、概括、总结 ,勾画出教材的主干知识结构 ,设计成一些有针对性的指导材料 ,发给学生 ,作为指导学生“学”的媒体。2　设计方法一个良好的指导材料应是几种形式的综合应用。我们根据章节内容的不同 ,将指导材料设计为归纳总结式、填空式、图表式、问题定向式、…     

应用单克隆抗体测定癌症患者血清癌胚抗原临床价值的研究

为了探讨癌患者血清癌胚抗原(CEA)水平及其临床应用价值,我们应用北京生物制品研究所生产的CEA-EIA(单克隆抗体)药盒测定了恶性肿瘤患者218例、非癌疾患46例、正常人57例和手后癌瘤病人170例的血清CEA水平。结果如下:(1)94.76％的正常