携带跨膜信号的凋亡蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

目的构建携带跨膜信号序列的凋亡蛋白（apoptin）的原核表达载体PET-28a（＋）-apoptin,诱导表达并纯化重组apoptin蛋白,制备多克隆抗体。方法用多重PCR的方法扩增跨膜信号序列（PTD）及apoptin的编码序列,构建原核表达载体PET-28a（＋）-PTD-apoptin,转化大肠杆菌BL21（DE3）,低温条件下IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法鉴定蛋白表达,经镍亲和层析方法纯化目的蛋白后,免疫BALB／c小鼠,制备多克隆抗体。结果DNA测序鉴定表明成功构建了原核表达载体PET-28a（＋）-PTD-apoptin,该重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,经低温和IPTG诱导后,获得重组apoptin蛋白,制备的多克隆抗体经ELISA方法和免疫印迹法证实能特异性地识别apoptin。结论成功获得了携带跨膜信号序列的重组蛋白apoptin及其多克隆抗体,为进一步研究其特异性诱导肿瘤细胞凋亡功能及相关机制奠定了基础。     

巧煮水饺不粘连

▲煮水饺时,在锅里放一棵洗净的大葱,这样煮出来的饺子味道既鲜美,又不会粘成坨。 ▲在煮开的水中放点食盐,待食盐溶化后再下饺子,盖上锅盖,直到煮熟也不用     

超声造影微血管成像与常规超声靶向引导前列腺癌穿刺活检的比较研究

ObJective To evaluate the value of contrast-enhanced ultrasonography microflow imaging (MFI) in detecting prostate cancer. Methods Sixty-five patients with serum prostate-specific antigen levels higher than 4.00 μg/L were evaluated with transrectal gray-scale,power Doppler,and MFI ultrasonography and then biopsy guided by ultrasonography. Biopsy was performed at twelve sites in the base,the mid gland and the apex in each patient. In these three transverse sections, when any of the three methods showed abnormality,the biopsy site was directed to the abnormal foci. Diagnostic efficiency of the three methods for prostate cancer detection was compared based on biopsy results according to patient and biopsy site. Results Overall prostate cancers were detected in 230 (29.5 %) of 780 specimens in 36(55.4%) of 65 patients. MFI could detect more patients(34) than gray-scale(26) and power Doppler(28) (P = 0.021, P = 0.031), 6(16.7%)of the 36 patients diagnosed with cancer were identified only by MFI. By biopsy site, MFI had higher sensitivity and overall accuracy (80.0% and 83.0%) than gray-scale (47.0% and 76.8%) and power Doppler (37.4% and 74.6%) ultrasonography(P <0.001, P<0.001 ; P = 0.001, P <0.001), while the specificity of MFI was 84.4%, lower than gray-scale (89.3%) and power Doppler (90.2%) ultrasonography(P = 0.009, P < 0.001). Conclusions MFI could detect more patients and improve sensitivity and overall accuracy by biopsy site than conventional uhrasonography.     

静脉用药闭环监控信息系统在PIVAS与临床中的应用实践

[目的]探讨静脉用药执行监控系统在静脉药物配置中心(PIVAS)与临床全程信息化管理的应用,通过静脉用药调配全程信息化闭环管理及流程优化,使静脉用药更加及时、有效、规范执行。[方法]通过静脉用药执行监控及交互系统监控静脉用药的调配、运送、执行等各环节时间,系统设置提醒临床护士执行静脉用药时间为调配后2h内,统计超过2h执行情况,分析不及时执行原因进行流程优化。[结果]通过分析不及时执行原因,从输液顺序安排、调配、运送接收、临床PDA执行方面进行了流程优化及改善。2017年6月进行流程优化后,静脉用药运送接收流程优化后比优化前平均时间减少15～20min,提高了静脉用药调配后送达病区的效率;2018年1月—2018年6月静脉用药不及时执行率比2017年1月—2017年6月下降40%,PIVAS临床满意度提高到9分,均得到改善。[结论]静脉用药执行监控系统的建立,有利于PIVAS对于静脉用药全流程质控与优化,从而更好地保证临床静脉用药及时执行,降低了静脉用药调配后在临床滞留可能造成的医院感染风险和差错风险,提高了临床静脉用药满意度,保证了病人用药安全。     

超声造影对胆囊胆固醇性息肉的诊断价值

目的探讨胆囊胆固醇性息肉的超声造影特征。方法对47例胆囊胆固醇性息肉患者行常规超声及超声造影检查,常规超声观察病变大小、形态、数目、内部回声、基底部宽度及彩色血流情况。超声造影观察病变模式、增强强度、病灶的始增时间、达峰时间及减退时间。结果常规超声示24例胆固醇性息肉表现为窄基底,16例表现为宽基底,7例息肉多切面扫查难以确定基底部位置,彩色多普勒测及血流信号者8例。所有息肉行超声造影均可被强化,增强模式呈蜂窝状不均匀增强者29例,均匀增强者18例,高增强40例,低增强7例。本组病例造影始增时间为(17.03±6.51)s,达峰时间为(29.27±9.71)s,减退时间为(54.42±10.37)s。超声造影均能显示病变基底部,与常规超声比较差异有统计学意义(P=0.018)。结论超声造影表现为"蜂窝状"不均匀增强对胆固醇性息肉的诊断有一定参考价值,超声造影可显著提高息肉基底部的显示率。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞

背景：以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的：利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法：首先利用多位点Gateway技术构建慢病毒表达载体pLVpuro／EFlet．肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因一肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论：酶联免疫吸附法和Westernblot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg／L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。     

1599例遗传咨询门诊病例的细胞遗传学研究

本文对1599例遗传咨询门诊病例进行了细胞遗传学研究,结果表明:异常染色体核型的检出率为14.8%,其中有20例为世界首报核型.并对SOD-1基因剂量效应,inv(9)是否为正常多态性变异及相互平衡易位携带者的遗传效应的表达进行了探讨.     

角膜移植的免疫学研究——实验性角膜移植排斥反应的病理组织学观察

角膜移植是治疗角膜病变的重要手段之一。在过去十几年来,角膜移植术已取得了很大进步。随着手术技巧的改进,手术显微镜、无创缝线的应用及手术器械的不断更新,使属于手术操作本身所造成的各种并发症已大为减少,而移植排斥反应已成为使角膜移植术失败的主要原因。因此,开展对角膜移植免疫反应     

猫叫综合征2例

猫叫综合征系染色体结构异常的疾病。因大部分患者哭声细小似猫叫而得名。此病较为罕见,国内仅见三例报道,我室在400例先天智力低下小儿中发现两例报告如下:     

常规超声与超声造影在乳腺病变诊断中的对比

目的 比较常规超声(US)、CEUS单独及联合应用诊断乳腺病变的价值。 方法 对79例单发乳腺病变患者分别进行US和CEUS检查,分析病灶的US及CEUS增强特征,并与病理结果对照。采用评分法绘制ROC曲线,通过计算曲线下面积比较两种方法单独及联合应用的诊断效能。 结果 US、CEUS单独及联合应用ROC曲线下面积分别为0.878、0.884、0.953,Z检验结果显示联合应用的诊断价值优于单独使用US和CEUS检查(P<0.05)。 结论 US和CEUS检查均为有效的诊断方法,两者联合应用可提高对乳腺病变的诊断效能。