粒细胞集落刺激因子调节T淋巴细胞免疫功能的实验研究

目的研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对T淋巴细胞免疫功能的调节作用。方法以15例健康供者为对象,在其应用G-CSF前后,用流式细胞仪(FCM)检测外周血T淋巴细胞表面免疫标记、Annexin V及细胞内细胞因子的表达,用淋巴细胞转化试验检测T淋巴细胞的增殖反应。结果供者用G-CSF后,CIM^ 、CD8^ 细胞数无明显变化,CIM^ 、CD8^ 细胞内IFN-γ表达降低,IL-4表达增高;T细胞对丝裂原的增殖反应降低。Th1和Th2细胞表面Annexin V的表达无显著性差异。结论G-CSF制了丝裂原刺激T细胞的功能,使供者T细胞向Th2型细胞转化,细胞凋亡不是Th1／Th2转化的机制。     

髓系/自然杀伤细胞祖细胞急性白血病一例并文献复习

目的 提高对髓系/自然杀伤细胞祖细胞(M/NKP)急性白血病的认识.方法 报告1例新近诊断的M/NKP急性白血病及其治疗经过并进行文献复习.结果 经联合化疗未达完全缓解,死于脑出血.结论 M/NKP急性白血病是一种罕见的白血病,有特异的免疫表型特征,临床进展迅速,对现行治疗不敏感,预后差.     

消痤胶囊对兔耳痤疮模型抗角化作用及血清睾酮、雌二醇含量的影响

目的观察消痤胶囊对兔耳痤疮模型毛囊皮脂腺导管的抗角化作用及对血清睾酮（T）、雌二醇（E2）含量的影响。方法将健康新西兰白兔随机分为消痤胶囊大、中、小剂量组、清热暗疮丸组、模型实验组、正常对照组,采用Kligman法建立兔耳痤疮模型,造模成功后分别灌饲消痤胶囊、清热暗疮丸和纯净水2周。通过肉眼和镜下病检观察皮损的角化情况,采用电化学发光法测定血清T、E2含量。结果消痤胶囊各剂量组和清热暗疮丸组均可不同程度的改善兔耳痤疮模型毛囊皮脂腺导管的异常角化,对血清T的含量有降低作用、对血清E2含量有升高作用,并呈量效关系。结论消痤胶囊可改善兔耳痤疮模型毛囊皮脂腺导管的异常角化,调节体内激素水平,对兔耳实验性痤疮有较好的治疗作用。     

Fas,P-糖蛋白和多药耐药1基因在急性白血病的表达及相关性的临床研究

 目的 探讨Fas,P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药1（mdr1）基因在急性白血病（AL）的表达及三者在多药耐药（MDR）中相关性的临床研究。方法 对59例初发AL患者,应用流式细胞仪和半定量RT-PCR法分别检测治疗前后Fas和P-gp及mdr1表达情况。结果 Fas在不同类型AL表达有差异;Fas+与P-gp+呈显著负相关,Fas+与mdr1+呈负相关,P-gp+与mdr1+呈显著正相关;COX分析结果显示：Fas和mdr1有判断预后价值;Fas+与Fas-组、P-gp+与P-gp-组、mdr1+与mdr1-组的CR率差异均有统计学意义。结论 Fas高表达可能是AL预后良好因素;P-gp,mdr1高表达为预后不良重要因素。     

髓系/自然杀伤细胞祖细胞急性白血病一例

髓系/自然杀伤细胞祖细胞(M/NKP)急性白血病是1997年Suzuki等[1]首次报道的一类独立病种,其特征为髓系和NK细胞抗原的共表达,病程进展迅速,预后差,该病发病率极低,文献报道病例有限,伴皮肤浸润的病例国内尚无报道,我院最近收治1例,现报告如下.     

基于单核苷酸多态性分型的系列特异嵌合体定量方法的建立

 【摘要】　目的　建立基于单核苷酸多态性（SNP）分型的系列特异嵌合体定量方法。方法　用免疫磁珠分选技术分离CD+3 T淋巴细胞和CD+15粒细胞,利用TaqMan探针建立实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法,对模拟血细胞嵌合体进行检测,并作出标准曲线,以评价该法的灵敏性和特异性。结果　免疫磁珠分选技术分选血细胞纯度可达94 %～97 %。所选的SNP位点在供受者间至少有两个可区分彼此的信息位点。扩增产物中供受者嵌合百分比的对数同实时荧光定量PCR检测的Ct值显著直线相关,线性相关系数 r＞0.98,灵敏度不低于0.1 %,特异性亦较好。采用实时荧光定量SNP-PCR定量分析同期4例临床病例,根据模拟嵌合体标准曲线对其中1例计算,得到的嵌合率为87.50 %。结论　基于SNP分型的TaqMan探针实时荧光定量PCR法灵敏度高,特异性好,可用于造血干细胞移植术后血细胞嵌合体的检测。     

多参数流式细胞术检测急性早幼粒细胞白血病微小残留病的研究

 目的 建立流式细胞术检测急性早幼粒细胞白血病（APL,AML-M3）微小残留病（MRD）的方法,初步探讨其临床价值。方法 采用一组四色荧光标记单克隆抗体组合（CD15-CD11b-CD33-CD45）,对40例初诊时经形态学及流式免疫分型诊断为M3的白血病患者及其治疗后12例骨髓标本进行检测,同时检测正常对照8例。结果　在初发M3,以CD45／SSC（侧向角散射）设门,95 % M3白血病细胞群表达CD-15 CD-11b CD+33。12例在第1疗程结束进行监测,CD45／SSC设门粒细胞群CD-15 CD-11b CD+33细胞分别为0,0.001 %,0.002 %,0.07 %,0.08 %,0.09 %,0.22 %,0.25 %,0.66 %,1.73 %,12.24 %,53.6 %和72.4 %。该方法的敏感度为10-4,远高于形态学检测法。而诱导分化后的白血病细胞首先表达CD+15和（或）CD+11b,并逐渐分化为CD++15 CD++11b CD+/-33成熟粒细胞。结论　四色荧光标记单克隆抗体组合（CD15-CD11b-CD33-CD45）,可作为流式细胞术检测M3的MRD的方法。     

依马替尼对c-Kit+急性髓细胞白血病骨髓细胞凋亡的作用

目的观察依马替尼(STI571)体外对干细胞受体阳性(c-Kit )急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓细胞凋亡的作用。方法用RT-PCR法检测c-Kit AML细胞抑凋亡基因SurvivinmRNA和促凋亡基因SmacmRNA的表达水平。结果抑凋亡基因SurvivinmRNA的表达水平下降,促凋亡基因SmacmRNA的表达水平上升。结论STI571能诱导c-Kit AML细胞促凋亡基因SmacmRNA上调,抑凋亡基因SurvivinmRNA的表达水平下降,发挥促凋亡作用。     

非清髓性异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病26例

为研究非清髓性异基因造血干细胞移植(non-myeloablative allogeneic stem cell transplantation, allo-NST)治疗恶性血液病的疗效及相关技术,选择26例恶性血液病患者作为研究对象(急性白血病10例,慢性髓性白血病14例,多发性骨髓瘤2例),其中14例采用FAC(fludarabin+ATG+Cy)预处理,12例采用MAC(melfalan/maleran+ATG+Cy)预处理;用G-CSF 600 μg/d或G-CSF 300 μg/d+GM-CSF 300μg/d进行外周血干细胞动员,于第5天开始用Cobe Spectra血细胞分离机连续采集2-3次;用环孢菌素A联合短程甲氨蝶呤预防GVHD;移植后第4周开始供体淋巴细胞输注,首剂1×107/kg,之后依据临床反应及嵌合体形成情况,每4周1次,剂量逐级递增;微卫星短串联重复序列(STR)分析、Bcr/Abl融合基因、Ph染色体、HLA位点分析、性染色体及ABO血型等为植活检测指标.结果显示 植入率84.62%,aGVHD发生率11.54%,cGVHD发生率23.07%;感染和出血等毒副反应发生率低、反应轻.结论非清髓性异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病疗效确切,毒副作用小,但相关技术,如适应症的选择、预处理方案、移植过程中的免疫治疗等需要进一步深入研究.     

伊马替尼体外对c-kit阳性急性髓系白血病患者骨髓细胞增殖和凋亡的影响

伊马替尼是一种2-苯胺嘧啶衍生物，除对bcr／abl融合基因阳性的慢性粒细胞白血病（CML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞有明显的作用外，还可以抑制c—kit酪氨酸激酶。在急性髓系白血病（AML）中c-kit被异常磷酸化。我们用不同浓度的伊马替尼对c—kit^＋AML患者骨髓细胞进行体外处理，采用MTT法、RT—PCR法及流式细胞术探讨其对骨髓细胞凋亡的影响，旨在为临床应用伊马替尼治疗AML提供理论依据。