拟Smac促凋亡多肽的合成及其生物活性的初步研究

目的探讨拟Smac多肽的合成及其对膀胱癌细胞的促凋亡生物活性。方法应用固相多肽合成技术,合成具有细胞膜穿透性SmacN7融合多肽,经RP-HPLC纯化、纯度分析,用质谱仪定性鉴定;通过荧光显微镜观察细胞凋亡形态、细胞增殖抑制率测定及流式细胞仪分析,研究其对低剂量丝裂霉素C诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡促进作用。结果 可穿透性融合多肽SmacN7产物峰纯度达95％以上,分子量为3278．08,质谱鉴定结果与合成预期结果完全一致;50-500 μg／L SmacN7作用12-48h,肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变;随着SmacN7浓度的增加或作用时间的延长,细胞增殖抑制率出现明显增加,药物作用12h、24h、48h后增殖抑制率分别为（9．62±1．07）％～（61．48±1．15）％、（24．17±1．02）％～（72．86±1．68）％、（43．24±1．15）％～（84．91±1．74）％;肿瘤细胞凋亡率也明显增加,分别为（6．12±1．16）％～（49．81±2．11）％、（13．47±1．15）％～（64．54±2．27）％、（28．91±1．08）％～（82．36±2．19）％。结论 固相合成的拟Smac融合多肽SmacN7为高纯度的目的肽,能够稳定地转入细胞内且利用率高,并有明显促进低剂量丝裂霉素C诱导的膀胱癌T24细胞凋亡的生物活性,为进一步研究膀胱肿瘤的生物治疗积累了有价值的资料。     

Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的:检测抗凋亡(IAP)家族中生存素(Survivin)基因在膀胱移形细胞癌(BTCC)组织及癌旁组织的表达,探讨Survivin的表达在膀胱癌发生发展中的意义.方法:采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-QPCR)方法,对30例BTCC患者中Survivin基因在癌组织和癌旁组织中的表达进行检测.结果:免疫染色标本中,在癌旁组织、BTCC和胚胎癌组织中Survivin的阳性表达率分别为0、60%和100%.同一患者,Survivin在BTCC的表达量远大于癌旁组织,Survivin在BTCC组织中的-△△CT值是癌旁组织的10.2829(9.0034～11.5624)倍,同时在病理分级之间和临床分期之间均有统计学意义(P＜0.05).结论:Survivin基因在癌旁组织中有少量表达,而在BTCC组织中的表达量远远高于癌旁组织;其表达量与病理分级和临床分期均有相关性.     

Smac/DIABLO蛋白在泌尿系统肿瘤表达的研究

线粒体促凋亡蛋白(the second mitochondrial activator of caspase/direct IAP binding protein with low PI Smac/DIABLO)的结构特征与其功能密切相关,在诱导泌尿系统肿瘤细胞凋亡,增加肿瘤细胞的化疗敏感性及增强免疫力等方面显示出良好的应用前景,以Smac/DIABLO蛋白及其类似物为基础的药物或生物制品将为泌尿系统肿瘤的治疗开辟一个新领域.     

鹿角状肾结石开放取石的术式选择

目的:探讨鹿角状肾结石开放取石的术式选择、预防术中意外切肾和术后失肾的措施。方法:术中根据结石形态与肾脏解剖关系选择术式。对23例鹿角状肾结石患者行开放取石术治疗,左肾鹿角状结石9例,右肾10例,双肾4例。手术前后加强防治感染,术后充分引流,以预防术后失肾。结果:手术均顺利完成,结石均于术中取尽。术中无一例意外切肾。术后1个月随访全部患者的术侧肾脏功能恢复良好。结论:对鹿角结石,根据结石的形态、分布、肾盂类型、肾积水状态和肾实质厚度等因素综合判断,选择合理的术式,能保障手术安全、干净取石。     

经膀胱镜碎石术治疗膀胱结石(附11例报告)

报告经膀胱镜碎石术治疗膀胱结石11例,结石直径为1.0～3.5cm,经过均顺利。体会是:视野清晰是防止膀胱粘膜损伤、顺利进行碎石的关键。该术式操作简便、经济、安全、病人痛苦少、恢复快,适于门诊及基层医院开展。     

短期运用环孢素A对供者骨髓移植所诱导的混合嵌合体和免疫耐受的抑制作用

目的探讨临床常用免疫抑制剂对供者骨髓移植和T淋巴细胞协同刺激信号阻滞联合诱导的混合嵌合体和免疫耐受的影响。方法将BALB/c小鼠的皮肤移植于C57BL/6小鼠背部,术后经尾静脉注射BALB/c小鼠骨髓细胞5×10~7个和AdCTLA4-FasL 5×10~9 PFU(标准方案组),部分小鼠在此基础上还接受环孢素A(CsA组)、霉酚酸酯(MMF组)和环孢素A、霉酚酸酯联合(CsA+ MMF组)皮下或腹腔注射,共用药28 d,同时设移植后不给任何处理的对照组。观察移植皮肤存活情况,流式细胞仪测定受者外周血Vβ11~+T淋巴细胞的水平和供者来源细胞的嵌合水平,行单向混合淋巴细胞反应(MLR)了解受者对供者抗原的反应。结果除对照组外,其它几个组在短期内(21 d)均诱导了高水平的混合嵌合体(＞30%),但在停药后的140 d,仅标准方案组和MMF组仍保持稳定的嵌合水平。对照组移植皮片的存活时间为(9．8±1．2)d,CsA组和CsA+MMF组皮片存活时间均不超过50 d,标准方案组和MMF组皮片存活时间均超过150 d,明显长于CsA组和CsA+MMF组(P＜0．05)。术后150 d,标准方案组和MMF组的MLR受到显著抑制,刺激指数均＜1,而CsA组和CsA+MMF组的MLR未受抑制(刺激指数均＞1)。术后21d时,各组小鼠外周血中Vβ11~+T淋巴细胞的水平均低于对照组,但标准方案组和MMF组的Vβ11~+ T淋巴细胞较CsA组和CsA+ MMF组更低(P＜0．05),至术后140 d时,标准方案组和MMF组的Vβ11~+ T淋巴细胞比例降至更低水平。结论CsA或含CsA的免疫抑制方案对供者骨髓移植和输注CTLA4-FasL联合诱导的混合嵌合体和免疫耐受具有抑制作用,其机理可能与早期外周供者反应性T淋巴细胞删除减少有关。     

尿脱落细胞增殖细胞核抗原mRNA检测在膀胱癌诊断中的应用价值

目的探讨尿脱落细胞增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA检测在膀胱癌诊断中的应用价值。方法收集32例膀胱癌、52例泌尿系统良性疾病患者和10例健康志愿者清晨中、后段尿液,采用RT-PCR法检测尿脱落细胞PCNAmRNA表达,并与尿脱落细胞学检查结果比较。结果PCNAmRNA诊断膀胱癌的特异性为64%,低于尿脱落细胞学检测的88%(P<0.05),敏感性为100%,高于尿脱落细胞学检测的69%(P<0.01)。膀胱良性疾病患者、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌患者尿脱落细胞PCNAmRNA表达强度分别为0.5128±0.0307、0.5153±0.0402、0.6560±0.0626、0.8657±0.0266。膀胱良性疾病患者与Ⅰ级膀胱癌患者间差异无统计学意义,与Ⅱ、Ⅲ级膀胱癌患者间差异有统计学意义(P<0.05)。膀胱癌患者尿脱落细胞PCNAmRNA表达强度随膀胱癌分级增加而升高(P<0.05)。浸润性膀胱癌患者尿脱落细胞PCNAmRNA表达强度高于浅表性膀胱癌患者(P<0.01),分别为0.8040±0.0807、0.5595±0.0447。结论尿脱落细胞PCNAmRNA检测在膀胱癌早期诊断、常规筛查以及术后复发监测中具有潜在的应用价值。     

移植肾功能延迟恢复与长期存活的关系

为探讨移植肾功能延迟恢复（ＤＧＦ）与长期存活的关系，分析１９８５年１月－１９９４年１月施行尸体供肾移植术６８例，结果发生ＤＧＦ３１例，占４５．６％；发生至少１次排斥反应者３８９例，占５７．３％。ＤＧＦ伴斥反应才５年存活率（０）明显低于不伴有排斥反应者（２５％），ＤＧＦ≥１４ｄ者１个月内排斥反应的发生率明显地ＤＧＦ〈１４ｄ者。提示ＤＧＦ≥１４ｄ或ＤＧＦ伴有排斥反应的发生是影响患者后长期存活的一个主要     

膀胱癌干细胞关键转录因子Oct4的表达及与肿瘤干细胞的关系

目的检测干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织及细胞系BIU-87中的表达，探讨Oct4的表达在膀胱癌发生发展中的意义及与肿瘤干细胞的关系。方法采用免疫组织化学方法对49例膀胱癌组织病理标本、采用免疫细胞荧光和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对膀胱癌细胞系BIU-87进行Oct4表达的检测。结果Oct4在膀胱癌中的表达率为81．6％（40／49），Oct4阳性细胞率约为0．6％，Oct4表达的阳性细胞率及强度与膀胱癌的分级、复发和转移无明显相关性（P〉0．05）。在BIU-87细胞中存在少量的Oct4阳性细胞，RT-PCR证实存在Oct4的弱表达。结论膀胱癌中有少量细胞表达全能干细胞标志物Oct4，这些细胞很可能是膀胱癌干细胞，这将为其最终分离和鉴定人膀胱癌干细胞提供重要的基础。     

伐地那非在肾移植伴勃起功能障碍患者中应用的有效性和安全性研究

目的:评估伐地那非在肾移植后伴阴茎勃起功能障碍(ED)患者中应用的有效性和安全性。方法:选取39例血浆肌酐值<2mg/dl的肾移植伴有ED患者进行为期4周随机、双盲的伐地那非研究,实验组20例,安慰剂组19例。应用勃起功能国际指数(IIEF)进行伐地那非有效性的评估;应用血清肌酐值,肌酐清除率和血液中免疫抑制剂环孢素浓度监测值评估伐地那非的安全性。结果:应用伐地那非治疗的ED患者评分从12.6±3.4改善到26.5±2.8(P<0.01)。肾功能和环孢素浓度在伐地那非治疗前后没有改变。有4例伐地那非组患者观察到不良反应,2例出现头痛,1例出现心悸伴颜面潮红,还有1例出现消化不良。结论:本研究证实伐地那非对肾移植伴ED患者勃起功能改善有效而且安全。