CCL22-CCR4轴在胃癌腹膜乳斑转移的机制研究

目的 探讨巨噬细胞衍生因子MDC/CCL22-CCR4反应轴在胃癌腹膜乳斑转移中的作用.方法 用RT-PCR和Western blot方法检测CCR4在5种胃癌细胞系中的表达;MTT法测定不同浓度CCL22对胃癌细胞株BGC-823增殖率的变化;Transwell小室体外侵袭实验检测CCL22对胃癌细胞株BGC-823趋化活性的影响;免疫组化检测标本中CCR4表达;单变量分析CCR4表达与胃癌临床病理参数的关系.结果 CCR4mRNA和CCR4蛋白在5种胃癌细胞系中均有表达.CCL22可以促进BGC-823细胞的增殖和趋化.CCR4在胃癌中有表达,CCR4表达水平与胃癌分化程度相关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小、位置、分期以及淋巴结转移等均无关(P>0.05).结论 CCL22-CCR4反应轴可能在胃癌腹膜乳斑转移中起作用.CCR4可能成为预防和治疗胃癌腹膜转移的潜在靶点.     

角膜基质内注射伏立康唑治疗真菌性角膜炎疗效观察

目的评价角膜基质内注射伏立康唑治疗真菌性角膜炎的安全性和临床疗效。方法选择培养证实为真菌性角膜炎并常规抗真菌治疗2周无效的患者10例(10眼)。于病灶区角膜基质内注射伏立康唑(50μg/0.1m L)。术后继续使用局部、口服抗真菌治疗,观察角膜情况、前房及晶状体情况。结果 7例患者注射一周内病灶明显缩小,一月后病灶痊愈;3例患者病情进展,一周后重复注射,其中2例患者1月内病灶痊愈;1例患者出现穿透性角膜溃疡,行角膜移植术,术后未出现再感染及移植失败。术后随访6月,未发现角膜内皮损伤、继发性青光眼等。结论角膜基质内注射伏立康唑治疗真菌性角膜炎安全有效,短期内无明显并发症。     

基于网络药理学的中药大品种深入研究策略北大核心CSCD

中医药是我国各族人民在临床实践中逐步形成的具有'君、臣、佐、使'用药原则和'七情和合'配伍规律等完整药学理论体系的医学科学。同样,其基于人整体观而作用于多靶点多途径的多组分天然药物系统,也是复方药物的典型代表。     

食管高级别上皮内瘤变的诊断与治疗

目的总结食管高级别上皮内瘤变诊断及治疗方法。方法回顾性分析28例食管高别上皮内瘤变患者的临床资料。结果接受内镜粘膜下剥离术手术治疗的28例患者中,16例（57％）术后病理证实维持高级别上皮内瘤变的诊断,其余12例（43％）术后则诊断为食管癌。结论内镜下病理检查诊断食管高级别上皮内瘤变准确率57％,内镜下活检不能作为高级别上皮内瘤变的确诊依据,应积极随访甚至手术干预。内镜粘膜下剥离术为治疗食管高级别上皮内瘤变的有效方法。     

食管癌误诊为食管平滑肌瘤2例临床分析

我国是世界上食管癌高发区,安徽省在全国食管癌发病率排名第7位[1],大多数食管癌患者就诊时已是中晚期,5年生存率低于10%,而早期食管癌经手术切除的5年生存率高达90%以上[2,3],因此早期诊断和治疗食管癌显得尤为重要,就近来2例食管癌误诊为食管平滑肌瘤,而延误诊断和治疗报道如下。     

昆虫杆状病毒系统表达人流感多表位基因盒的研究

目的 通过昆虫-杆状病毒表达系统表达人流感病毒多表位基因盒,为进一步研发通用型流感疫苗提供实验依据。方法 将甲型流感病毒H1N1颈部区(345aa-566aa)和H1/H3/B亚型HA2片段经4GS Linker串联M2e及ferritin蛋白构成的HA2-M2e-ferritin(简称HMf),参照A/Jilin/JYT-01/2018(H1N1)毒株的全基因组序列,将其HA2基因和HMf基因序列按照昆虫细胞密码子偏好性进行优化合成,经两次双酶切后分别克隆至pFastBacTM双载体中。热激法将重组质粒转化入DH10BacTM大肠埃希菌感受态,含目的基因的pFastBacDual-HA2-HMf转移载体与DH10Bac的Bacmid质粒重组,构建重组转移质粒rBacmid-HA2-HMf。在脂质体介导下,用rB-HA2-HMf转染Sf9细胞进行重组杆状病毒的拯救。通过限制性酶双酶切、测序、重组Bacmid PCR、Western blot和间接免疫荧光法(IFA)鉴定目的蛋白的表达。用重组杆状病毒感染悬浮sf9细胞,收取细胞悬液,经超速离心、蔗糖密度梯度离心获得重组蛋白,利用透射电镜...     

核转染对成体骨髓源性干细胞的影响

背景:成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源。对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键。目的:探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化潜能是否存在的影响。方法:应用核转染技术利用U-23程序将编码maxGFP报告基因的载体对成体骨髓呈克隆样干细胞进行转染,应用MTT法对核转染前后的生长曲线进行测定,使用3μmol/L5-氮胞苷对核转染前后成体骨髓呈克隆样干细胞进行向心肌分化诱导,并利用RT-PCR对向心肌分化的特异性标记物GATA4与MLC-2v的表达进行测定。使用成年SD大鼠心肌梗死左前降支结扎模型,对使用经maxGFP转染的成体骨髓呈克隆样干细胞施心内注射并于注射后的第2天和第7天对经注射心脏行冰冻切片并观察maxGFP在体内的表达情况。结果与结论:经核转染24h后,第47代及第119代成体骨髓呈克隆样干细胞的转染率为49.4%和43.1%,转染后5h,开始出现呈绿色荧光阳性的细胞,经核转染后仍能保持小圆球形、可贴壁、呈克隆样生长。MTT检测结果显示:核转染前后第47代及第119代均具有相似的生长曲线。核转染前第47代及119代细胞平均群体倍增时间分别为8.57,10.28h;核转染后分别为9.42,10.42h,各代前后比较差异无显著性意义(P=0.551,P=0.774)。RT-PCR检测结果显示:核转染前5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强;核转染后5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强,上述2个向心肌分化指标于转染前后变化并不明显。体内实验结果:心内注射经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,第2天及第7天可在经注射心肌中发现有少量绿色荧光阳性的细胞。提示,核转染可快速地将外源基因导入细胞,经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞仍能保持其细胞形态、增殖能力及向心肌分化潜能,然而,经maxGFP基因核转染的成体骨髓呈克隆样干细胞,移植入心肌后只有少数细胞能表达经转染基因。     

泽泻提取物改善游离脂肪酸诱导的HepG2脂肪变性细胞模型的脂质代谢及氧化应激异常

目的 研究泽泻提取物（Alisma orientale extract,AE）及其3种主要单体成分对游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）诱导的HepG2脂肪变性细胞模型的脂质代谢及氧化应激异常的改善作用及机制。方法 利用FFA（油酸-棕榈酸2∶1）建立稳定的HepG2脂肪变性细胞模型,CCK-8法测定AE、泽泻醇A、泽泻醇A-23-乙酸酯及泽泻醇A-24-乙酸酯对HepG2细胞的安全剂量;在FFA诱导同时给予AE(25.00、12.50、6.25 mg/L)、泽泻醇A(50.0、25.0、12.5μmol/L)、泽泻醇A-23-乙酸酯（25.00、12.50、6.25μmol/L）、泽泻醇A-24-乙酸酯（50.0、25.0、12.5μmol/L）处理24 h,检测细胞内脂滴的形成情况,利用生化试剂盒测定各组细胞内三酰甘油（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）水平,DCFH-DA检测药物对细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）生成的影响,采用试剂盒检测细胞内氧化应激关键指标丙二醛（malo...     

老年肺癌患者胸腔镜手术后肺不张发生影响因素

目的 探讨老年肺癌患者胸腔镜手术后肺不张发生的影响因素。方法 选取120例老年肺癌患者,均行胸腔镜手术治疗,术后观察4～5 d,统计患者胸腔镜手术后肺不张发生情况;设计基线资料调查表,查阅并记录患者入院时基线资料,分析老年肺癌患者胸腔镜手术后发生肺不张的影响因素。结果 120例老年肺癌患者胸腔镜手术后发生肺不张8例,发生率为6.67%;发生组术前白细胞计数(WBC)水平、术后疼痛程度[视觉模拟评分(VAS)]均高于未发生组,手术时间长于未发生组,有吸烟史占比高于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析发现,术前WBC水平高、术后VAS高、手术时间长、有吸烟史均可能为老年肺癌患者胸腔镜手术后发生肺不张的影响因素(OR>1,P<0.05)。结论 老年肺癌患者胸腔镜手术后肺不张发生风险较高,对于术前WBC水平高、术后VAS高、手术时间长、有吸烟史的老年肺癌患者应展开相应防治措施,降低术后肺不张发生率。     

核转染对成体骨髓源性干细胞的影响

背景：成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源。对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键。目的：探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化潜能是否存在的影响。方法：应用核转染技术利用U-23程序将编码maxGFP报告基因的载体对成体骨髓呈克隆样干细胞进行转染,应用MTT法对核转染前后的生长曲线进行测定,使用3μmol/L5-氮胞苷对核转染前后成体骨髓呈克隆样干细胞进行向心肌分化诱导,并利用RT-PCR对向心肌分化的特异性标记物GATA4与MLC-2v的表达进行测定。使用成年SD大鼠心肌梗死左前降支结扎模型,对使用经maxGFP转染的成体骨髓呈克隆样干细胞施心内注射并于注射后的第2天和第7天对经注射心脏行冰冻切片并观察maxGFP在体内的表达情况。结果与结论：经核转染24h后,第47代及第119代成体骨髓呈克隆样干细胞的转染率为49.4%和43.1%,转染后5h,开始出现呈绿色荧光阳性的细胞,经核转染后仍能保持小圆球形、可贴壁、呈克隆样生长。MTT检测结果显示：核转染前后第47代及第119代均具有相似的生长曲线。核转染前第47代及119代细胞平均群体倍增时间分别为8.57,10.28h;核转染后分别为9.42,10.42h,各代前后比较差异无显著性意义（P=0.551,P=0.774）。RT-PCR检测结果显示：核转染前5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强;核转染后5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强,上述2个向心肌分化指标于转染前后变化并不明显。体内实验结果：心内注射经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,第2天及第7天可在经注射心肌中发现有少量绿色荧光阳性的细胞。提示,核转染可快速地将外源基因导入细胞,经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞仍能保持其细胞形态、增殖能力及向心肌分化潜能,然而,经maxGFP基因核转染的成体骨髓呈克隆样干细胞,移植入心肌后只有少数细胞能表达经转染基因。