小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达

目的：观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体（CⅡTAm）重组腺病毒对MHCⅡ类分子表达的选择性抑制作用，并探讨其相关机制。方法：构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡTA-pIV启动子驱动的重组腺病毒Ad-pⅣ-CⅡTAm，将Ad-pIV-CⅡTAm或对照腺病毒Ad-GFP感染小鼠内皮细胞株SVEC细胞和转染巨噬细胞株J774细胞，并以IFN-γ刺激。用RT-PCR检测野生型和突变型CⅡTA mRNA的表达，用流式细胞术检测MHCⅡ类分子在细胞表面的表达。结果：成功构建CⅡTA-pIV启动子调控下的CⅡTA突变体基因重组腺病毒表达载体Ad-pIV-CⅡTAm；该腺病毒介导的CⅡTA突变体mRNA在SVEC和J774细胞内的表达受到IFN-7的上调，同时抑制这些细胞上诱导型和组成型MHCⅡ类分子的表达。结论：Ad-pIV-CⅡTAm重组腺病毒是一种WN-γ调控型表达载体，可有效地抑制受感染细胞上MHCⅡ类分子的表达。     

小儿CVB呼吸道感染时心肌酶学特征

柯萨奇Ｂ组病毒（ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ,ＣＶＢ）在病毒性心肌炎、心肌病中较受重视,近年来ＣＶＢ引起呼吸道感染国内外报道逐渐增多［１］。本研究系统地观察ＣＶＢ呼吸道感染时心肌酶学的特征,进一步探讨ＣＶＢ呼吸道感染与心肌损害的内在联系,为临床防治病毒性心肌炎提供依据。１　材料和方法１．１　临床资料　连续检测１９９５年８月至１９９７年５月呼吸道感染１２７例患儿的血清ＣＶＢ,结果ＣＶＢ抗原（ＣＶＢＡｇ）和（或）ＣＶＢＩｇＭ阳性９４例。根据ＣＶＢＡｇ和ＣＶＢＩｇＭ的阳性与否分成４组：Ａ组,…     

教学医院实验技术人员在研究生带教中的作用

为探讨教学医院实验技术人员在研究生带教中的作用,本阐述了强化思想工作,激发拼搏精神;提高自身素质,培养创新意识;规范仪器设备使用,狠抓成果经费管理;为教学医院研究生的临床实验教学提供经验。     

流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群

目的建立人和小鼠Th1和Th2细胞的检测方法,探讨两者在流式细胞仪检测方面的不同.方法采用PMA和离子霉素共同刺激外周血单个核细胞,观察在不同时间和不同剂量的PMA刺激下外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8表达的变化;采用多色荧光共同标记分析技术检测外周血单个核细胞IL-4和IFN-γ的表达.结果在PMA和离子霉素共同刺激后4 h,人外周血T淋巴细胞表面CD4表达迅速下降,而小鼠T淋巴细胞表面CD4表达仅轻度下降;采用多色分析技术可以有效的检测Th1细胞和Th2细胞;采用CD3、CD8设门分析可以有效的区分人Th细胞;采用CD4设门可以有效区分小鼠Th细胞.结论人Th细胞检测宜采用4色染色分析技术,小鼠Th细胞检测采用3色染色技术即可.     

Relationship between contents of plasma atrial natriuretic peptide and serum lipids of atherosclerosis in rabbits

Changes in plasma atrial natriuretic peptide(ANP)and serum lipids were observed us-ing dietetic atherosclerosis(AS)models.The results showed that plasma ANP level of the ASgroup was significantly higher than that of the control group(14.33±3.58μg/L vs 9.43±3.14μg/L).There was also a marked increase in serum Tch,TG,LDL-ch and VLDL-ch comparedwith the control group(P<0.01),suggesting that release of ANP increased with disturbance ofthe serum lipids and during AS formation,and that change in ANP was closely related to Tchand LDL-ch(P<0.05).Possible mechanisms causing these changes are also discussed.     

类风湿性关节炎患者淋巴细胞CD45RO、CD45RA的表达及临床意义

目的检测类风湿性关节炎（RA）患者CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO和CD45RA亚群的变化并探讨其临床意义。方法采用双色流式细胞术（FCM）检测28名正常人外周血、43例RA患者外周血和15例关节液的CD4^＋、CD8^＋细胞CD45RO、CD45RA的表达。结果RA患者关节液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于RA患者外周血和正常人外周血（P〈0.01）;RA患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于正常人外周血（P〈0.01）。活动期RA患者血液CD4^＋、CD8^＋细胞表达CD45RO的百分比显著高于非活动期RA患者（P〈0.05,P〈0.01）。结论CD45RO^＋淋巴细胞是参与RA病理过程的主要淋巴细胞。     

红细胞CD55、CD59流式细胞术检测方法的若干影响因素探讨

目的探讨流式细胞仪测定红细胞表面CD55、CD59试验过程中影响检测的若干因素,建立此项目的标准操作程序。方法利用流式细胞仪对15例非血液病、11例阵发性血红蛋白尿症（PNH）的乙二胺四乙酸（EDTA）外周抗凝血进行红细胞CD55、CD59检测,观察单克隆抗体（mAb）用量、荧光素种类及反应时间对测定结果的影响。结果在未饱和抗原的情况下（〈9μL）,平均荧光强度（MFI）随抗体量的增加而升高。CD55-异硫氰酸荧光素（FITC）的阳性率和MFI均低于CD55-藻红蛋白（PE）,CD59的FITC和PE 2种荧光标记的阳性率间差异无统计学意义,但在MFI方面前者明显高于后者。反应时间对CD55-PE阳性率、CD59-FITC和CD55-PE的MFI有明显影响（P〈0.05）;3 h内2组CD59-FITC的阳性率无明显变化。结论抗体用量、荧光素种类及标记模式和温育时间对流式细胞仪检测红细胞CD55、CD59有明显的影响。本实验室在3个影响因素上分别选择12μL抗体标记1.6×105～2.8×105个红细胞、荧光素组合模式为CD59-FITC、CD55-PE双色标记和40 min的温育时间,这样既确保了反应充分又提高了结果的稳定性。