DLC-1基因启动子甲基化对于B-ALL的预后价值

目的观察儿童急性淋巴细胞白血病中肝癌缺失-1（DLC-1）抑癌基因启动子甲基化状态,评估该基因甲基化对于急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）的预后价值。方法对40例B-ALL患儿DLC-1启动子甲基化状态与白血病敏感预后指标白血病微小残留病灶（MRD）,以及其他对B-ALL预后可能有影响的指标作一比较,评价DLC-1对于B-ALL的预后判断价值,以及是否可以作为B-ALL的独立预后危险因素。结果 DLC-1甲基化阳性的B-ALL患儿的复发率和5年无事件生存率均与DLC-1甲基化阴性患儿差异有统计学意义（P〈0.05）。DLC-1启动子甲基化与MRD的结果分布并不一致（P〉0.05）。但两者同为阳性结果的5例患儿在5年内全都复发,复发率为100%;而两者同为阴性结果的11例患儿,仅1例在5年内复发,复发率为9%。多因素分析显示仅MRD可作为独立的预后危险因素（P=0.017）,DLC-1基因甲基化阳性患儿复发风险是甲基化阴性患儿的8.5倍。结论 DLC-1甲基化和MRD都是B-ALL有意义的预后指标,两者结合可为临床提供覆盖面更广的预后信息。DLC-1甲基化也显示了该指标有成为独立预后危险因素的趋势。     

四种国产乙型肝炎表面抗原定量检测试剂对弱阳性样本检测结果的一致性比较

目的 比较4种国产HBsAg定量检测试剂与ARCHITECT i2000免疫检测系统对HBsAg弱阳性样本检测结果的一致性及检测值之间的相关性.方法 采用4种国产发光法检测系统和i2000检测系统分别检测185例HBsAg弱阳性血清标本以及不同浓度HBsAg的标准品.应用描述性统计和相关分析计算不同试剂分析结果的精密度、一致性和相关性.结果 4种国产发光法检测系统对i2000检测系统定量为0.05～1.00 IU/ml的弱阳性结果判断的符合率分别为25.93%、35.19%、51.85%和18.52%;对定量为＞1.00～10.00IU/ml的弱阳性结果判断的符合率分别为71.76%、87.79%、95.42%和69.47%.4种国产试剂均检测阴性的标本为i2000检测值在0.05～0.80IU/ml的低值阳性标本;i2000检测结果≥7.93 IU/ml的样本,4种国产发光法检测系统符合率为100%.国产试剂检测结果之间的相关性分析结果显示,其相关系数为0.8629～0.9265.结论 国产检测系统的分析灵敏度略低于i2000检测系统,检测值≤0.80IU/ml的样本不能给出与i2000一致的检测结果;对于≥7.93 IU/ml的样本,国产试剂均可给出与i2000一致的结果.

Abstract：

Objective To evalue the coincidence and correlation between the four domestic quantity assay reagents and with ARCHITECTi2000 immunoassay system.Methods 185 weak-reactive serum samples and standard materials of different concentrations were tested by four domestic quantity assay reagents for HBsAg test and ARCHITECTi2000 immunoassay system.The coincidence,the precision and the correlations between different systems were analyzed.Results The coincidence rates of the results of 0.05-1.00 IU/ml samples between the four domestic quantity assay reagents and ARCHITECTi2000 immunoassay system were 25.93%,35.19%,51.85% and 18.52% respectively,and for those results of ＞ 1.00-10.00 IU/ml samples the coincidence rates were 71.76%,87.79%,95.42% and 69.47% respectively.The samples of 0.05-0.80 IU/ml weak-reactive serum samples detected by the i2000 system were all negative detected by the four domestic systems.The coincidence rates of＞7.93 IU/ml serum samples detected by i2000 system were 100%detected by the four domestic systems.The correlations of the four domestic quantity assays were around 0.8629-0.9265.Conclusions The analysis sensitivity of the four domestic quantity assay reagents were below the i2000 system.The results of under 0.80 IU/ml samples detected by i2000 system were disaccord with the results detected by the four domestic systems,whereas for the sapmples over 7.93 IU/ml the results were consistent.     

3812株临床常见细菌耐药性分析

目的了解上海儿童医学中心2007年1月至2008年12月院内临床分离菌对各种常见抗菌药物的耐药性。方法药物敏感性试验采取纸片扩散法,参照2007版美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准判断药敏结果。耐药性数据分析采用WHONET5.4软件。结果 2007年1月至2008年12月共收集首次分离细菌3 812株,其中革兰阳性菌占40.2%,革兰阴性菌占59.8%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为11.1%和86.7%,无万古霉素耐药株;粪肠球菌和屎肠球菌对高浓度庆大霉素的耐药率分别为27.3%和35.1%;肠杆菌科细菌对亚胺培南和美罗培南耐药率最低(0.0%),产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为66.3%和76.8%;耐亚胺培南的铜绿假单胞菌检出率为19.2%;鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为21.8%和20.4%,共检出泛耐药鲍曼不动杆菌22株。结论患儿分离的细菌耐药性比较严重,应引起关注。     

新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙、哈、维、汉4民族30岁以上高血压及部分有关危险因素调查

目的了解新疆博尔塔拉蒙古自治州蒙、哈、维及汉4民族高血压高血压患病率,知晓率、治疗率、控制率及危险因素。方法采取随机整群抽样法,调查30岁以上蒙古族、哈萨克族、维吾尔族及汉族居民。结果蒙古族、哈萨克族、维吾尔族及汉族高血压患病率分别为42.0%,40.5%,35.6%,33.2%;知晓率、治疗率及控制率分别为46.0%,25.7%,6.6%。收缩压多因素回归分析显示:民族、BMI、年龄均为收缩压的危险因素,而只有蒙族男性性别为收缩压的危险因素,但其他民族性别未进入方程。舒张压多因素回归分析显示:民族、BMI、年龄均为舒张压的危险因素,同时男性性别为蒙族、哈族及汉族的危险因素。结论新疆博尔塔拉蒙古自治州地区高血压患病率较高,尤其是蒙古族及哈萨克族,而知晓率、治疗率及控制率很低。年龄及BMI是4民族高血压(不论收缩压及舒张压)主要的危险因素。男性性别是舒张压升高的危险因素。     

广州北部地区妊娠期特异的血清甲状腺功能指标参考值

目的通过对广州北部地区妇产医院的共计746例孕妇进行统计分析来提出妊娠期特异的血清甲状腺功能指标参考值,从而为临床提供依据。方法对广州北部地区妇产医院进行回访,对孕妇在医院的甲状腺检测各项检测数据进行分析,得出其中甲状腺表征数据的参考值。结果该研究结果显示妊娠4-28周TSH及FT4,选择95%可信区间范围。结果得出的TSH较ATA参考值低,而FT4参考范围较ATA推荐的参考值高。结论对于广州北部临床孕妇有一定指导意义。建议广州北部地区的早孕期间妇女FT4参考值为9.78 pmol/L-25.37 pmol/L,中孕期FT4参考值为8.76-24.19 pmol/L。TSH的参考值设定于0.02-2.74 mIU/L,处于中孕期间0.11-3.02 mLU/L。     

儿童急性淋巴细胞白血病AKAP12启动子区域异常甲基化

目的探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）中A激酶锚定蛋白12（AKAP12）基因启动子区域CpG岛异常甲基化情况及其与临床病理参数之间的关系。方法用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测儿童ALL患者骨髓和对照骨髓以及淋巴细胞白血病细胞株6T—CEM中AKAP12基因启动子区域CpG岛甲基化状态,并采用亚硫酸盐测序法检测启动子区域发生甲基化的频率。采用荧光定量逆转录PCR（FQ—RT—PCR）检测6T—CEM中,经过甲基化酶抑制剂（5-Aza—CdR）处理后,AKAP12恢复表达的情况。结果32例ALL患者MSP结果显示AKAP12基因甲基化比率为62．5％（20／32）,但与患者的临床病理学参数均无显著相关。经过5-Aza-CdR处理后,可使6T-CEM中AKAP12恢复表达,且表达强度与剂量成正比。结论AKAP12基因启动子的异常甲基化与ALL的发生有密切的联系,AKAP12基因启动子甲基化有望成为一个诊断ALL的分子标志物。     

TdT在儿童期B-ALL中的表达特点

目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达特点，并探讨TdT在B-ALL微小残留(MRD)检测中的意义。方法用TdT／CD10／CD34／CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测．以3例正常骨髓标本作为对照．分析TdT在B-ALL中的表达特点同时．以能够使白血病细胞在TdT／CD10双参数点图上出现的位置完全不同于TdT^ CD19^ 的正常骨髓细胞分布的位置，作为TdT／CD10／CD34／CD19组合有效并可用于MRD监测的标准。以该组合对病人诱导治疗结束后以及持续治疗过程中的骨髓标本进行监测。结果在70例B-ALL中．TdT阳性为63例(90．0％)。其中．Common B-ALL中的TdT阳性例数比例．及TdT阳性表达率都显著高于其它各期；其它各期之间无显著差异。虽然大部分病例的TdT与CD34都呈现较高的阳性表达率，但TdT与CD34阳性表达率之间并无明显的相关性Pro B-ALL．Pre B-ALL和Common B-ALL之间．平均TdT MFI无显著差异．但三者中除了前两者的平均TdT MFI都显著低于正常骨髓中的TdT^ CD19^ 细胞外．Common B-ALL的平均TdT MFI与正常细胞无显著差异。所有B-ALL总的平均TdT MFI显著低于正常细胞。应用TdT／CD10／CD34／CD19抗体组合可在65．7％的B-ALL病例中进行MRD检测．其有效频率高于其它用于MRD检测的抗体组合。结论由于B-ALL的平均TdT MFI显著低于TdT^ CDl9^ 的正常骨髓单个核细胞，可以利用B-ALL的这一特点以TdT／CDl0／CD34／CDl9抗体组合进行MRD检测．且此抗体组合的有效频率在现有的MRD检测抗体组合中最高。     

不同抗体和透膜剂组合对胞浆抗原检测的影响

目的探讨不同抗体和透膜剂组合对流式细胞术中胞浆抗原检测的影响.方法通过单色直接标记法和流式细胞术,用不同抗体和透膜剂组合进行胞浆内抗原的检测.结果急性B淋巴细胞性白血病(B-ALL)、急性髓细胞性白血病(AML)标本使用抗CD3抗体(Becton Dickinson公司)进行胞浆内抗原检测时,出现假阳性的结果;B-ALL、急性T细胞性白血病(T-ALL)标本使用抗髓过氧化酶(MPO)抗体(Immunotech公司)和8E透膜剂组合可出现MPO假阳性的现象,而使用其他3种透膜剂时,MPO检测都为阴性;B-ALL和正常人标本使用抗CD22抗体(Immunotech公司)和FACS Permeabilization solution搭配进行胞浆抗原检测时,CD22抗原检测为假阴性;AML和T-ALL标本使用抗CD22抗体(Immunotech公司)和8E组合检测时,胞浆抗原CD22可出现假阳性.结论流式细胞术不同抗体和透膜剂组合可产生不同的结果,应当谨慎选择,以便正确进行白血病的免疫分型和微小残留病的检测.     

p27KIPI与神经母细胞瘤分化的研究

目的：探讨p27^KIPI在神经母细胞瘤诱导分化及预后的作用。方法：用BrdU诱导神经母细胞瘤细胞系TGW的分化，免疫组化法分析神经母细胞瘤分化过程中p27^KIPI的表达，Western blot法分析p27^KIPI的总体表达水平。结果：BrdU引起p27^KIPI的表达明显增加，主要位于细胞浆，p27^KIPI的表达使神经母细胞瘤细胞株的生长停滞，p27^KIPI在诱导分化作用下蛋白质表达的总体水平增加。结论：p27^KIPI的表达与神经母细胞的分化呈正相关，p27^KIPI可以抑制神经母细胞瘤的生长并可以成为以促进肿瘤细胞分化的基因治疗方案的基础。     

TdT在儿童期B-ALL中的表达特点

目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达特点,并探讨TdT在B-ALL微小残留(MRD)检测中的意义.方法用TdT/CD10/CD34/CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测,以3例正常骨髓标本作为对照,分析TdT在B ALL中的表达特点.同时,以能够使白血病细胞在TdT/CD10双参数点图上出现的位置完全不同于TdT+CD19+的正常骨髓细胞分布的位置,作为TdT/CD10/CD34/CD19组合有效并可用于MRD监测的标准.以该组合对病人诱导治疗结束后以及持续治疗过程中的骨髓标本进行监测.结果在70例B-ALL中,TdT阳性为63例(90.0%).其中, Common B-ALL中的TdT阳性例数比例,及TdT阳性表达率都显著高于其它各期;其它各期之间无显著差异.虽然大部分病例的TdT与CD34都呈现较高的阳性表达率,但TdT与CD34阳性表达率之间并无明显的相关性. Pro B-ALL、Pre B-ALL和Common B-ALL之间,平均TdT MFI无显著差异,但三者中除了前两者的平均TdT MFI都显著低于正常骨髓中的TdT+CD19+细胞外,Common B-ALL的平均TdT MFI与正常细胞无显著差异.所有B ALL总的平均TdT MFI显著低于正常细胞.应用TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合可在65.7%的B ALL病例中进行MRD检测,其有效频率高于其它用于MRD检测的抗体组合.结论由于B-ALL的平均TdT MFI显著低于TdT+CD19+的正常骨髓单个核细胞,可以利用B-ALL的这一特点以TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合进行MRD检测,且此抗体组合的有效频率在现有的MRD检测抗体组合中最高.