IL-1β诱导NF-κB通路对肠三叶因子治疗坏死性小肠结肠炎的影响及意义

目的 研究肠三叶因子(ITF)对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠的肠黏膜中白细胞介素1β(IL-1β)含量的影响,观察ITF对NEC新生大鼠中核因子-κB(NF-κB)的活化及胞内分布规律,探讨其在NEC发病机制中的作用.方法 50只新生Wistar大鼠随机分为5组(正常对照组、正常对照给予ITF组、NEC模型组、NEC给予生理盐水组、NEC给子ITF组),每组10只,并于NEC模型后,母鼠身边喂养3 d.第四天处死并取回盲部组织1～2 cm固定、包埋、切片、HE染色,观察组织学变化及免疫组化表现NF-κB的表达,其他肠组织制备组织匀浆,取上清液检测IL-1β含量.结果 NEC新生大鼠模型中损伤肠组织IL-1β含量明显增多,NF-κB表达增强.ITF治疗组能明显的抑制NEC新生大鼠肠组织IL-1β的产生和NF-κB(P65)的表达.结论 NF-κB信号通路可能参与了NEC发病过程,并起着信号转导作用;ITF通过抑制NF-κB信号通路,减轻小肠结肠组织炎症反应,起到保护肠黏膜的作用.     

新生儿巨细胞病毒感染性黄疸八例误诊分析

新生儿巨细胞病毒(cytomegalovirus CMV)感染在我国较常见。据报道,国外活产婴儿感染率为1％。我国与此相近,但脐血CMV抗体阳性率达97％。因此,CMV感染是构成新生儿黄疸的重要原因之一。以前,由于我院缺乏有效的检测手段,加之对该病认识不足,导致部分患儿误诊。本文收集了1993年10月～1994年10月因患新生儿高胆红素血症,     

肠三叶因子对坏死性小肠结肠炎新生大鼠白细胞介素-1β的影响

目的 探讨肠三叶因子(ITF)对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠黏膜组织IL-1β水平的影响,分析ITF对NEC的保护作用.方法 50只新生鼠随机分为5组,每组10只:A组为正常对照组,未进行缺氧、低温处理和注射药物;B组为正常ITF组,予皮下注射ITF0.2 mg(0.2 mL);C组为NEC模型组,建立NEC模型后未予药物注射;D组为NEC加9 g/L盐水(NS)组,建立NEC模型后予皮下注射NS 0.2 mL;E组为NEC加ITF组,建立NEC模型后予皮下注射ITF0.2 mg(0.2 mL).第4天断头处死动物后取其回盲部肠组织1～2 cm固定、包埋,HE染色行病理学检查,其他肠道组织制备组织匀浆取上清液应用ELISA试剂盒榆测IL-1β水平.结果 病理切片示C、D组HE染色切片见肠壁损伤轻重不一,可见全肠黏膜绒毛坏死,病理组织学积分为2～4分,E组肠上皮细胞有少量脱落,顶端绒毛坏死,病理组织学积分为0～2分.C、D组组织匀浆IL-1β水平均较E组显著增高(Pa＜0.01);E组与A、B组比较均无显著性差异(Pa ＞0.05).结论 ITF下可通过降低IL-1β的水平减轻NEC模型的肠道炎性反应,ITF有可能为NEC的治疗提供新方法.     

坏死性小肠结肠炎新生大鼠核因子-κB活性变化及肠三叶因子的干预作用

目的 研究肠三叶因子(ITF)对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠黏膜组织核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨ITF是否对NEC具有保护作用及其在NEC发病机制中的作用.方法 新生鼠50只随机分为5组,每组10只,A组(正常对照组)不做处理;B组(ITF组)皮下注射ITF 0.2 mg;C组为NEC模型组;D组[NEC加9g/L盐水(NS)组]制备NEC模型后皮下注射NS;E组(NEC加ITF组)制备NEC模型后皮下注射ITF 0.2 mg,连续3 d.大鼠均于实验第4天处死.分别于其十二指肠、小肠近中远端及结肠近端和远端处取1～2 cm肠道组织固定、包埋、切片、HE染色行病理学检查及免疫组织化学染色观察NF-κB表达.结果 C、D组组织中NF-κB(p65)阳性表达较A、B及E组显著升高(Pa ＜0.01),E组与A、B组比较也有升高(Pa ＜0.01),且随NF-κB(p165)的激活有明显的核转移;病理切片示C、D组HE染色见肠肇损伤轻重不一,可见全肠黏膜绒毛坏死,病理评分2～4分;E组轻度肠上皮细胞脱落,顶端绒毛坏死,肠组织病理评分0～2分.结论 通过皮下注射ITF可减轻NEC新生大鼠肠道炎性反应,NF-κB通路参与了NEC的发病过程,ITF可能通过抑制NF-κB的活化保护NEC模型新生大鼠的肠黏膜.     

肠三叶因子对新生鼠NEC模型PI3K和caspase-3/9的影响

目的 利用PI3K的特异性抑制剂Wortmannin阻断PI3K/Akt细胞信号转导通路,观察ITF对新生鼠NEC模型caspase-3及caspase-9水平的影响,探讨ITF对NEC的保护作用机制.方法 建立NEC模型,对新生一日龄Wistar大鼠予100%氮气,1 min后放4℃冷环境中持续10min,每日2次,随后放回自制的保温箱内人工喂养,第四天处死,取肠组织待检.新生鼠50只随机分为5组,每组10只,A组为NEC模型后予以腹腔注射生理盐水0.2 ml;B组NEC模型后予以腹腔注射ITF0.2 mg;C组为NEC模型后腹腔内注射wortmannin(0.1 mg/kg);D组为NEC模型后腹腔内注射ITF+wortmannin;E组为正常对照组.取近回盲部1～2 cm肠道组织固定包埋、切片、HE染色做病理学检查,其他肠道组织制备组织匀浆取上清液应用ELISA试剂盒检测PI3K的含量及用分光光度法检测caspase-3/9的活性.结果 病理切片显示A组HE染色见肠壁损伤轻重不一,可见全肠黏膜绒毛坏死,病理评分中位积分3分;B组病变明显减轻,肠上皮细胞少量脱落,顶端绒毛坏死,病理评分中位积分1分;C、D组病理评分中位积分3分.A组组织匀浆中PI3K的含量(pg/ml)较E组略升高(P<0.05),与D组差异无统计学意义(P>0.05);B组PI3K表达水平较其他组显著升高(P<0.01);C组与E组比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).Caspase-3及caspase-9活性在A组较B、E组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),C组更加明显升高(P<0.01),A、D组及B、E组之间,差异无统计学意义(P>0.05).结论 通过腹腔注射ITF可以减轻NEC后的肠道炎症反应,ITF有可能为治疗NEC提供新的方法 ;PI3K/Akt细胞信号转导通路参与了NEC发病过程,并起着信号转导作用.而ITF可能是通过激活PI3K/Akt信号转导途径来下调caspase-3/9的水平,从而保护新生Wistar大鼠NEC模型肠道损伤.     

肠三叶因子对新生鼠NEC模型PI3K和caspase-3/9的影响

Objective To study the effects of ITF on PI3K (phosphatidylinositol 3-kinase) and caspases-3/9 (cysteinyl aspartate-specific protea-ses) in neonatal rat NEC model. Methods NEC model of neonatal rats was established. Asphyxia stress was accomplished by exposure to l00% nitrogen for 60s, followed by exposure to coldness (4 ℃ ) for 10 min twice daily. Neonatal rats were fed formula (200 kcal/kg/day) every 3 h via an gavage tube. The feeding volume began at 0. 1 cc every 3 h and was increased incrementally. This procedure is done once everyday and continued for 3 days. On the 4th day,all the subjects were sacrificed. Fifty neonatal rats were randomized into five groups: A) NEC + NS0. 2mi, (B) NEC + ITF 0. 2 mg, (C) NEC(Wortmannin (0. 1 mg/kg) (D) NEC + ITF 0. 2 mg + Wortmannin (0. 1 mg/kg), (E) control. The intestinal tissue located at the boundary of ileum and cecum was sampled for histology. The remaining intestinal tissue was homogenized. After the homogenate was centrifuged,supernatants were used to assay PI3K and Caspase-3 and caspase-9. Results The pathological lesions showed that intestinal necrosis was severe in group A、C and D, which was graded as 3points. They were significantly decreased in group B,which was graded 1 point. The level of PI3K(pg/ml)in Group A was higher than those in group E (P<0. 05), the latter had difference with those in group D(P>0. 05). The level of PI3K(pg/ml) were the strongest in group B and were lowest in group C. The activity of Caspase-3 and Caspase-9 were significantly increased in group A compared to those in group B and E (P<0. 01 ),and was significantly increased in Group C(P<0. 01 ). Caspase-3 and Caspase-9 levels of group A and D,group B and E showed no significant difference(P>0. 05). Conclusions Intestinal inflammation was ameliorated by intraperitoneal ITF. ITF may provide a new therapy for NEC; PI3K/Akt signal pathways might play important roles in signal transduction during NEC;ITF may protect the intestinal injury of neonatal Wistar rat by activation of PI3K/Akt signal transduction pathway, and down regulation of caspase-9.     

新生儿肺炎心肌酶谱与心电图的临床意义

目的探讨新生儿肺炎患儿心肌酶谱及心电图改变的临床意义。方法选取2009年7月～2011年10月笔者医院收治的120例足月新生儿肺炎患儿其中重症肺炎组40例,单纯性肺炎组40例,对照组(正常足月新生儿)40例,肺炎组治疗前、后及对照组均行肘静脉穿刺采血做心肌酶谱(AST、LDH、CK、CK-MB)及心电图检查。结果除AST、CK在单纯组急性期和对照组比较中P>0.05外,单纯组和重症组急性期心肌酶谱与对照组比较以及单纯组与重症组急性期比较明显升高,心电图有明显改变,差异有统计学意义(P<0.05);单纯性肺炎组和重症肺炎组急性期和恢复期比较心肌酶谱及心电图结果有统计学意义(P<0.01);肺炎组恢复期心肌酶谱及心电图恢复正常(P>0.05)。结论新生儿肺炎可发生心肌损害,早期心肌酶谱测定及心电图检查有助发现其心肌损害,具有临床指导意义。     

血清降钙素原和血常规在新生儿晚发型败血症中的诊断价值

目的:探讨降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比例(Neu%)在新生儿晚发型败血症中的诊疗价值。方法:回顾性分析2017年1月-2019年1月我院新生儿科的住院患者,分晚发型败血症组、一般细菌感染组和未感染组,分析PCT、WBC、Neu%在各组的情况。结果:PCT用于诊断败血症及与一般感染组时受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)均最大,分别为0. 987(P<0. 05)和0. 941(P<0. 05),灵敏度及特异度均高于WBC及Neu%;WBC诊断一般感染时AUC为0. 981(P<0. 05),灵敏度为100%,特异度为86. 7%,均高于PCT及Neu%;Neu%在诊断败血症及与一般感染鉴别时AUC、灵敏度及特异度均居中。结论:PCT、WBC、Neu%可指导诊断晚发型败血症,三者中PCT诊断败血症时效能最高,WBC诊断一般细菌感染时效能最高,Neu%诊断效能居中。     

肠三叶因子对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型iNOS及TNF-α、NO的影响及意义

目的探讨肠三叶因子(intestinaltrefoilfactor,ITF)对坏死性小肠结肠炎(necrotizingenterocolitis,NEC)新生大鼠的肠黏膜组织中iNOS、TNF-α、NO的含量的影响,及ITF对NEC是否具有保护作用。方法建立NEC模型,对新生1日龄Wistar大鼠予100%二氧化碳,5min后再予以100%氧气,5min后放回母鼠身边喂养,第4天处死,取肠组织待检。新生鼠40只随机分为五组,每组8只,A组为NEC模型后予以腹腔注射ITF0.5mg;B组为NEC模型后予以皮下注射ITF0.2mg;C、D组为NEC模型后予以腹腔注射生理盐水分别为0.5ml和0.2ml;E组为正常对照组。取近回盲部1~2cm肠道组织固定包埋、切片、HE染色做病理学检查及免疫组化观察iNOS的表达,其他肠道组织制备组织匀浆取上清液检测TNF-α、NO的含量。结果A、B及E组iNOS呈弱阳性表达,C、D组iNOS呈强阳性表达;A、B组组织匀浆中TNF-α的含量各为[(30.515±2.731)和(32.229±4.978)pg/mg·pro]均较C、D组[(39.957±8.283)、(39.960±8.374)pg/mg·pro]明显下降(P<0.01),与E组[(33.523±6.752)pg/mg·pro]差异无统计学意义(P>0.05);A、B组组织匀浆中NO的含量各为[(0.37±0.07)和(0.54±0.08)μmol/mgtissue]较C、D组[(0.76±0.01)和(0.82±0.04)μmol/mgtissue]明显下降(P<0.01),与E组[(0.41±0.02)μmol/mgtissue]差异无统计学意义(P>0.05);A、B组间及C、D组间TNF-α、NO含量差异无统计学意义(P>0.05);病理切片显示C、D组HE染色切片见肠壁损伤轻重不一,可见全肠黏膜绒毛坏死,病理评分的中位积分为3分;A、B组肠上皮细胞少量脱落,顶端绒毛坏死,病理评分的中位积分为1分。结论通过腹腔和皮下注射ITF可以减轻NEC后的肠道炎症反应,ITF有可能为治疗NEC提供新的方法。